PK-13 猪肾细胞系

"PK-13 猪肾细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞接收操作说明：请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式：T２５培养瓶(一般是贴壁细胞使用，悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多，当然，有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞，但是，长期经验来说，贴壁细胞容易发生形态变化，估计是细胞培养空间狭小，血清不足导致(最主要是怕运输延误导致这些情况发生)，个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用，主要是冬天天气冷，温度低于４℃的地方，都要考虑冻存细胞)。T２５培养瓶：是用T２５细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T２５培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷７５%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装好备用，如细胞密度高于８０%，可以直接消化传代，相反则加入５-６ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管：是用１５ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装好备用(如果实验室没有T２５培养瓶，可以暂时T７５培养瓶，加入１０-１５ml培养基，建议１０ml培养基，也可以使用T１７５培养瓶，加入５０-６０ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心(１０００rpm，３min)收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。干冰：是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
PK-13 猪肾细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
细胞培养更好经验详解：1)收到细胞，首先要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题。比如293T，平时贴壁就不是很牢，在装满的培养基瓶子里面，会发生大片的脱落，细胞聚集在一起，但是细胞生长还是正常的，通过离心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察，细胞初步没有问题时，进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时，则处理如下：弃除瓶中大部分培养基，仅保留5到10mL培养所需的常规培养基；或更换新鲜的培养基，置于培养箱中，随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下，会调整为静止期，或者慢速生长期，恢复37度的环境至少3个小时左右，才能重新调整到接近对数生长期的状态，在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率，和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%，并且细胞状态很好时，则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快，状态稳定，不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶；对于生长较慢，细胞比较薄，状态容易波动的细胞类型，一次少传些，每瓶细胞密度大些，便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞，次处理也可以依照第二种情况。 
细胞传代方法：１：２—１：４传代，每周换液２—３次 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
PK-13 猪肾细胞系
常规的细胞实验(增殖，凋亡，迁移，分化之类的)，受消化影响不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验，比如病毒包装，对细胞代数，对细胞状态要求极高。这个时候，胰酶消化，就是润洗，都会对细胞包装病毒的能力有影响，传代次数一多，细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化，用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性，来使得细胞脱离基质附着表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。许多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白，trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白，而EDTA通过螯合Ca离子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者对付特别难消化的细胞，添加多一些EDTA，就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果１０min还消化不彻底的话)，而应该想其它办法；PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤，是常见的操作，因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲，对于一些难消化细胞，那么可以配制不含Ca，Mg离子的PBS，因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞，不需要配制如此溶液。 
细胞形态特性：上皮细胞样 
HO8910细胞系相关产品：HEC-1B细胞、HBZY 1细胞、H-2330细胞 
MHCC 97-H细胞系相关产品：NIT-1细胞、SW-626细胞、16HBEo-细胞 
MJ细胞系相关产品：RN细胞、NCI-SNU-119细胞、Jurkat-FHCRC细胞 
NCI H548细胞系相关产品：HCC 38细胞、MDAMB175VII细胞、AQ-Mel细胞 
Hs 578.T细胞系相关产品：OUMS-23细胞、CT26WT细胞、UMUC-14细胞 
IOSE-Mar细胞系相关产品：4T1-A细胞、GM02132细胞、SEG1细胞 
SV40 MES 13细胞系相关产品：DITNC1细胞、OCI-Ly 10细胞、HCC-95细胞 
HS688AT细胞系相关产品：OPM2细胞、COV 504细胞、Adeno 293细胞 
HUVEC-C[HUVEC]细胞系相关产品：N1S1细胞、M-07e细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞 
LN 382细胞系相关产品：SK-N-FI细胞、T98G细胞、HuNS1细胞 
MKN1细胞系相关产品：MDCK2细胞、KLN-205细胞、Ly3细胞 
SW480细胞系相关产品：HPAEpiC细胞、SK-LMS-1细胞、TK-1细胞 
SKCO-1细胞系相关产品：FAT细胞、EU-3细胞、293GP细胞 
H838细胞系相关产品：E.G7-OVA细胞、Hs 600.T细胞、AML-2细胞 
SEM细胞系相关产品：LTEP-a2细胞、OC-3-VGH细胞、WM115细胞 
PK (15)细胞系相关产品：GM07404D细胞、Hs-578T细胞、NCIH2286细胞 
PK (15)细胞系相关产品：GM07404D细胞、Hs-578T细胞、NCIH2286细胞 
Pt K2 (NBL-5)细胞系相关产品：NP69SV40T细胞、Cor L88细胞、NCIH1650细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞系相关产品：MDCKII细胞、NCI-HUT-596细胞、SK-ES细胞 
L929(NCTC)细胞系相关产品：C-26细胞、GP-293细胞、AHH1细胞 
PK-13 猪肾细胞系
L 1210细胞系相关产品：BHP10-3细胞、NCI-SNU-5细胞、NCI-H2073细胞 
PLC-8024细胞系相关产品：aTC1-6细胞、BT-B细胞、AMC-HN8细胞 
FRTL 5细胞系相关产品：RAW264细胞、OCI/AML-5细胞、NS1-Ag 4/1细胞 
HEK-293F细胞系相关产品：Jurkat E6细胞、FTC-133细胞、COLO 320DM细胞 
BC-PAP细胞系相关产品：NMCG-1细胞、QG56细胞、WM 239A细胞 
MIHA细胞系相关产品：HCS-2/8细胞、NPC-039细胞、PaTu8988s细胞 
RM-1细胞系相关产品：ChaGo K-1细胞、HOP-92细胞、159PT细胞 
HCC-1171细胞系相关产品：MCF-10A细胞、LNCaP.FGC细胞、FDC-P1细胞 
NCIH209细胞系相关产品：LA-N-5细胞、Capan 1细胞、VE细胞 
0V-1063细胞系相关产品：A2780S细胞、QGY 7701细胞、JB 6细胞 
H69/P细胞系相关产品：Mo 59J细胞、SNU-1040细胞、HFT-8810细胞 
AHH-1细胞系相关产品：Be Wo细胞、3T6-Swiss albino细胞、WEHI231细胞 
B16-BL6细胞系相关产品：C6661细胞、COLO 357细胞、HLEC-B3细胞 
CT26.WT细胞系相关产品：NCIH1341细胞、SCC-25细胞、SN-12C细胞 
NB-19细胞系相关产品：HREC细胞、PGLH7细胞、F98细胞 
P3J-HR-1细胞系相关产品：HFF1细胞、HIEC6细胞、MCF7-GFP细胞 
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PE/CA-PJ34细胞系相关产品：HIT-T15细胞、NS20-Y细胞、Hce8693细胞 
H865细胞系相关产品：HEK 293FT细胞、B16F0细胞、R-1059-D细胞 
NB-9细胞系相关产品：LYR细胞、HEM细胞、HEK-AD 293细胞 
NL20SV细胞系相关产品：MA-c细胞、NCI-SNU-398细胞、Jiyoye细胞 
NBL-7细胞系相关产品：KU 812F细胞、M14细胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞 
Molm14细胞系相关产品：CAL78细胞、HCE-2 [50.B1]细胞、HS 445T细胞 
D341细胞系相关产品：hFOB1.19细胞、CAL-120细胞、KASUMI6细胞 
UMRC2细胞系相关产品：32D/cl3细胞、Malme3M细胞、HBZY-1细胞 
293/EBNA-1细胞系相关产品：SK_N_FI细胞、Ly3细胞、U2-OS细胞 
HT3细胞系相关产品：FDC-P1细胞、HEK293EBNA细胞、OK细胞 
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HCS2/8细胞系相关产品：SUSM-1细胞、CHP126细胞、H-2227细胞 
SF 539细胞系相关产品：SNU739细胞、HTR-8/SV-neo细胞、NH6细胞 
SKNBE(1)细胞系相关产品：WERI-Rb 1细胞、HCC-1588细胞、NBL_S细胞 
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MeT5A细胞系相关产品：OCIAML5细胞、H2066细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞 
TYKnu细胞系相关产品：NCIH1915细胞、OVSAHO细胞、Fortner's melanotic melanoma #3细胞 
H865细胞系相关产品：HEK 293FT细胞、B16F0细胞、R-1059-D细胞 
G361细胞系相关产品：EBNA-293细胞、H-1755细胞、Ly10细胞 
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HVSMC细胞系相关产品：OCI-AML5细胞、1.1B4细胞、BLO 11细胞 
SUDHL1细胞系相关产品：GC-1 spg细胞、ZR7530细胞、Huh 7.5.1细胞 
Lu99A细胞系相关产品：B16-F1细胞、Renal Carcinoma细胞、MBT2细胞 
FHL124细胞系相关产品：GCT0404细胞、MADISON LUNG TA-109细胞、HeLa-229细胞 
PK-13 猪肾细胞系
JB6 Cl 30-7b细胞系相关产品：T-ALL-1细胞、Jurkat-77细胞、NCI-H2030细胞 
RK 13细胞系相关产品：NCIH2405细胞、HNE3细胞、SNU601细胞 
R.K.13细胞系相关产品：MDA-MB-134-VI细胞、Microbiological Associates-104细胞、OCI AML5细胞 
Human Embryo Kidney-2细胞系相关产品：U-251-MG细胞、JROECL 21细胞、C-26细胞 
WPE-int细胞系相关产品：HCC-2108细胞、DMS-53细胞、BIC细胞 
CAL62细胞系相关产品：H-2405细胞、NCI-H-82细胞、AgC11x3A细胞 
PZ-HPV-7细胞系相关产品：NCI-SNU-216细胞、174xCEM.T2细胞、HEK-293FT细胞 
H-69细胞系相关产品：VK2 (E6/E7)细胞、E304细胞、NCI-H1048细胞 
KY70细胞系相关产品：MC3T3-E1 Subclone 4细胞、SNU398细胞、Malme-3M细胞 
JHH2细胞系相关产品：DMS 153细胞、HNE2细胞、OCI AML3细胞 
HUT125细胞系相关产品：MLE 12细胞、NCIH660细胞、MCF7细胞 
MJ细胞系相关产品：RN细胞、Y-79细胞、Daoy细胞 
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