COS-7 SV40转化的非洲绿猴肾细胞系

"COS-7 SV40转化的非洲绿猴肾细胞系
细胞背景资料：此细胞株源自CV-１细胞株，经转染起始点缺失的SV４０病毒突变体得到；编码表达野生型T抗原，所以该细胞适合作为需要SV４０T抗原表达的载体的转染宿主。该细胞表达T抗原，允许SV４０病毒的溶解性生长，支持４０℃时温度敏感性A２０９病毒的复制，支持起始区域缺陷的SV４０突变体的复制。因含有SV４０病毒的DNA序列，该细胞需要在２级生物安全柜中操作。 
细胞形态：上皮细胞样 
养了几年细胞，说一点自己培养细胞方面的看法：１)培养细胞前，可以看看细胞特点说明书，包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等；２)不同细胞生长周期不同，有的生长很快，比如说MDA-MB-２３１，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了，有的又是特别慢，等的人心焦，BT４７４就是，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满，所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了；３)对于娇弱的细胞，就得细心呵护了，胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间，每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况；４)冻存细胞复苏后第二天更换一次培养基；５)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次；６)养细胞的教训：不能偷懒!细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。１)不管买的细胞、惠赠的细胞，刚拿到手赶紧做两件事：检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存；２)发现有污染迅速处理掉，特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染，真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，买个支原体检测的kit定期检测一下；３)传代细胞日常的值日清洁是必须的，此外还要定期熏蒸；４)细胞的传代一定要规律，保持相同的confluency和传代时间间隔，不要随心所欲或者拖延；５)注意个人卫生。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
COS-7 SV40转化的非洲绿猴肾细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
细胞培养时分布不均匀，通常操作步骤：做细胞生物学实验，细胞铺板大概是我们最常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀：要么中间密周围稀，要么周围密中间秃顶。下面为大家分享几点经验。尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶润洗一遍（25cm2培养瓶或6孔板），弃掉胰酶，37度消化2-3分钟或室温消化5min左右，镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够，延长消化时间。96孔板一般以100微升每孔接种，直接用100微升移液器吸取细胞悬液，沿孔壁（稍离开一点孔底即可，不要离底太高）直接接入，移液器不需完全打到，轻轻按下即可，每铺完一行换一次枪头同时轻轻混匀细胞悬液。都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（我一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时针效果不好），依次敲击剩余三个边，静置约5分钟，放入37度培养箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用将每个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔依此类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢，但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式，但力度没有96孔板好掌握，效果没有96孔板好。培养瓶里面加好细胞以后(比如传代好/分好细胞以后)，先顺时针摇晃3次，马上逆时针摇晃3次。然后延X轴Y轴分别水平摇动3次。放入CO2培养箱后,平放着培养瓶重复延X轴Y轴分别水平摇动3次。 
细胞传代方法：１：２传代 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
COS-7 SV40转化的非洲绿猴肾细胞系
很多朋友讨论细胞培养问题，见到很多很好的经验总结，这里说一些我个人的经验，因为一些比较特殊的原因，我自己培养接触过近３００种细胞，常用于做实验的，累积有百余种，可以说遇到过许多各式各样古怪的细胞。这里挑细胞消化开始做我的篇专题，并不是因为细胞消化最重要，而是近期看到大家频繁讨论这个话题，我就抛砖引玉，下面几点拙见，可能与其它朋友总结的一些经验有点出入，仅供大家参考。许多同学对细胞消化做了许多研究，得出了很多有价值的经验，也见到很多人的困惑。其实细胞培养，尤其是细胞系的培养，就消化而言，不是太难，做得多了，善于总结经验，就能把细胞越养越好。一般的程序步骤，细节操作，我这里就不讲了，只讲一些基本操作背后的知识，如果不对之处，欢迎指正，总结下来，细胞培养中消化很重要，但其实消化并不是细胞培养的关键所在(虽然很重要)，关键所在是细胞来源，血清质量和水源(自己配制溶液的话)。我看到版上许多人养细胞遇到各种各样的问题，很多时候bottleneck没有找到，虽然通过其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因为人们往往注意自己的操作，总觉得自己没有经验，而忽视试剂，溶液尤其是细胞的质量，后者其实才是许多细胞培养实验室常见的问题。 
细胞形态特性：成纤维细胞样 
INS1E细胞系相关产品：HEC1B细胞、KTCTL140细胞、HEK 293T/17细胞 
Caco-2/ATCC细胞系相关产品：NCI-H1944细胞、R D细胞、SUD4细胞 
HEK 293-EBNA细胞系相关产品：HIT clone T15细胞、NCIH211细胞、SUM-52-PE细胞 
PK15细胞系相关产品：WM 2664细胞、HEC151细胞、Mel RM细胞 
DHL4细胞系相关产品：IALM细胞、CALU 1细胞、GDM1细胞 
PT-K75细胞系相关产品：KBM5细胞、NCIH548细胞、HMVEC细胞 
H-748细胞系相关产品：Mel624细胞、MARC 145细胞、SK-RC 39细胞 
NOZAWA细胞系相关产品：ME180细胞、NCI-SNU-878细胞、HepaRG细胞 
Hepatoma-22细胞系相关产品：NCI.H522细胞、Colo320细胞、B-104细胞 
16-HBE14o细胞系相关产品：SN12-PM6细胞、HEC1-B细胞、P-388D1细胞 
P3/X63-Ag8细胞系相关产品：MHCC 97细胞、MOVAS细胞、HCC-366细胞 
M21细胞系相关产品：NCIH1385细胞、RKO细胞、SKCO 1细胞 
MDA157细胞系相关产品：Mink Lung细胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、UCLA NPA-87-1细胞 
JROECL 33细胞系相关产品：HOCF细胞、BHK细胞、C3H10T1/2CL8细胞 
H-847细胞系相关产品：Li-7细胞、ATDC-5细胞、CMECs细胞 
GM05887A细胞系相关产品：MDCK Type II细胞、H2196细胞、CORL51细胞 
OVMANA细胞系相关产品：SK-MEL-5细胞、LIXC-002细胞、PA317细胞 
PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞系相关产品：MOLT 4细胞、Swiss-3T3细胞、H-2087细胞 
BMU-S1细胞系相关产品：Caco 2细胞、NCI-H1781细胞、SW 982细胞 
SCC 15细胞系相关产品：VeroC1008细胞、NCI-H522细胞、MV4-11细胞 
COS-7 SV40转化的非洲绿猴肾细胞系
Panc327细胞系相关产品：KPL-1细胞、BEL-7402细胞、COLO-320HSR细胞 
KATO III细胞系相关产品：MES 23.5细胞、PLC8024细胞、TGW-I-nu细胞 
NCI-H1688细胞系相关产品：MOLT3细胞、P 3 HR 1细胞、CCD 1112SK细胞 
SKNBE-1细胞系相关产品：SKOV-433细胞、BC3H-1细胞、JS1细胞 
SNK1细胞系相关产品：H1882细胞、NCI-H847细胞、Human Hepatocyte Line 5细胞 
GM2219C细胞系相关产品：AK细胞、HEK 293-EBNA细胞、Loucy细胞 
HeLa-229细胞系相关产品：HEK 293T/17细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞、SP2/0 Ag-14细胞 
PCI:SG231细胞系相关产品：NCTC-1469细胞、NCI747细胞、A10细胞 
Ketr3细胞系相关产品：HRA19细胞、VE细胞、RPMI7666细胞 
293 EBNA细胞系相关产品：Calu 3细胞、SUM159细胞、B 95-8细胞 
MESSA/Dx5细胞系相关产品：KM12-SM细胞、HLEC-B3细胞、MEG01细胞 
NG 108-15细胞系相关产品：GM03569B细胞、MDA-MB-436细胞、A431细胞 
P3 NS1 Ag4/1细胞系相关产品：OLN93细胞、Panc 2.03细胞、H-740细胞 
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293 HEK细胞系相关产品：FAO-1细胞、Huh 7.5细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞 
PTK 1细胞系相关产品：Medical Research Council cell strain-9细胞、SKRC-42细胞、SHI-1细胞 
LNCaP FGC细胞系相关产品：H446细胞、SMC-1细胞、H1092细胞 
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H-322细胞系相关产品：LOU-NH91细胞、NCI-H125细胞、KLM1细胞 
H-295R细胞系相关产品：SNU-182细胞、HCMEC细胞、UCH1细胞 
BBE细胞系相关产品：Kupffer细胞、Y1细胞、HuCCT-1细胞 
GM3190细胞系相关产品：RS4-11细胞、C17.2细胞、Hep 3B2.1-7细胞 
SLMT1细胞系相关产品：L 428细胞、SK-N-F1细胞、HEC-1-B细胞 
3T3F442A细胞系相关产品：Microbiological Associates-104细胞、JB-6 Cl 30细胞、NWA细胞 
COS-7 SV40转化的非洲绿猴肾细胞系
AK细胞系相关产品：Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞、HGMC细胞、TE-13细胞 
MIN-6细胞系相关产品：SCC090细胞、DCS细胞、Caov-4细胞 
COLO320HSR细胞系相关产品：H2110细胞、SuDHL 4细胞、H2073细胞 
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GRSL细胞系相关产品：Granta519细胞、DBTRG-05MG细胞、NCI-H1836细胞 
ABE­8.1/2细胞系相关产品：Bovine ENDometrial cells细胞、RC-K8细胞、FL 62891细胞 
NCI-H2196细胞系相关产品：MA-104细胞、6-10B细胞、H-1915细胞 
HuCCT-1细胞系相关产品：T-98细胞、AR-42J细胞、RPMI1788细胞 
Hs 737.T细胞系相关产品：293 F细胞、BT细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞 
Tb1Lu细胞系相关产品：J-774细胞、Hs688(A)T细胞、H2087细胞 
EHEB细胞系相关产品：KYSE-270细胞、AMC-HN-8细胞、Central Adrenergic TH-expressing a细胞 
HEK 293A细胞系相关产品：ESC-410细胞、NHEK细胞、NCI-H1734细胞 
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