TM4 小鼠睾丸细胞系

"TM4 小鼠睾丸细胞系
细胞背景资料：该细胞在FSH的作用下cAMP产量增加，但对LH无反应；与原代Sertoli细胞相比，该细胞对FSH的反应性降低。据报道，该细胞组成性纤溶酶原激活物的产量很低，但可被FSH刺激产生，受维刺激可有大幅增高。该细胞可产生视黄醇结合蛋白、组织纤溶酶原激活物和转铁蛋白；表达FSH受体、雄激素受体和孕激素受体。鼠痘病毒阴性。 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞接收操作说明：请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式：T２５培养瓶(一般是贴壁细胞使用，悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多，当然，有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞，但是，长期经验来说，贴壁细胞容易发生形态变化，估计是细胞培养空间狭小，血清不足导致(最主要是怕运输延误导致这些情况发生)，个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用，主要是冬天天气冷，温度低于４℃的地方，都要考虑冻存细胞)。T２５培养瓶：是用T２５细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T２５培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷７５%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装好备用，如细胞密度高于８０%，可以直接消化传代，相反则加入５-６ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管：是用１５ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装好备用(如果实验室没有T２５培养瓶，可以暂时T７５培养瓶，加入１０-１５ml培养基，建议１０ml培养基，也可以使用T１７５培养瓶，加入５０-６０ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心(１０００rpm，３min)收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。干冰：是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
TM4 小鼠睾丸细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做好标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。 
细胞传代方法：１：３-１：６传代；每周２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
TM4 小鼠睾丸细胞系
我常看到一个比较复杂的四步消化法，这个挺有意思，我也是次听说，应该是网友自己发展出来的方法，很有参考价值。但我估计这个方法可能对付少数非常怪异的细胞才需要这么复杂的程序。我目前养过的近３００株细胞里面，还没遇到这么怪异的。比如Caco２其实是很好消化的细胞，不需要胰酶孵育即可，只是有点成片分布。不要以为成片分布是自己没养好，这个视细胞而定。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好；比较难消化的细胞(润洗方法５min还不能消化)，就以colon cancer为例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。 
细胞形态特性：上皮样 
MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞系相关产品：MDCKII细胞、NCI-HUT-596细胞、SK-ES细胞 
HOS(TE85)细胞系相关产品：HAVSMC细胞、NCI-841细胞、NCIH2347细胞 
HEK293细胞系相关产品：U-343-MG细胞、HIMEC细胞、Murine Carcinoma-38细胞 
Th17细胞系相关产品：MIN-6细胞、SHIN3细胞、Eph4 1424细胞 
VB细胞系相关产品：NCI-H526细胞、H-2452细胞、CCC-HEH-2细胞 
Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞系相关产品：GTL16细胞、T47-D细胞、MDA-468细胞 
Karpas-422细胞系相关产品：Colon 38细胞、T.T细胞、Caco-2/ATCC细胞 
MCF-7/ADR细胞系相关产品：CAL 62细胞、CRFK细胞、SCC9细胞 
SW579细胞系相关产品：Human ErythroLeukemia细胞、HS766T细胞、Ej138细胞 
SNU739细胞系相关产品：CF-PAC1细胞、149 PT细胞、SNU-484细胞 
Hs895.T细胞系相关产品：BMU-S1细胞、D10细胞、H1395细胞 
HCC2108细胞系相关产品：BNCL2细胞、MXI细胞、SW1783细胞 
ST细胞系相关产品：HGF-1细胞、THPI细胞、RGM-1细胞 
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞系相关产品：ECC-12细胞、HCC2108细胞、CHP 100细胞 
D-283细胞系相关产品：NP69细胞、NCIH2023细胞、Vero-E6细胞 
HBSMC细胞系相关产品：Hs 832(C).T细胞、SW1222细胞、CWR22R细胞 
HBSMC细胞系相关产品：Hs 832(C).T细胞、SW1222细胞、CWR22R细胞 
H.Ep.-2细胞系相关产品：SNU-886细胞、PLA802细胞、BT-B细胞 
NCIH1436细胞系相关产品：RD-ES细胞、NR8383细胞、HLEC细胞 
U-373MG ATCC细胞系相关产品：IPLB-Sf21-AE细胞、A2780-CP细胞、HK-2 [Human kidney]细胞 
TM4 小鼠睾丸细胞系
HTR-8细胞系相关产品：NCI-H2330细胞、MDA-157细胞、V 79细胞 
SNU1细胞系相关产品：K-1735细胞、SNU449细胞、MM-1S细胞 
RIN-m5F细胞系相关产品：NCIN87细胞、CCC-HHM-2细胞、639V细胞 
JROECL 21细胞系相关产品：KATOIII细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞、MeT5A细胞 
451-LU细胞系相关产品：U-138 MG细胞、LY-R细胞、HOP92细胞 
NCI-HUT-125细胞系相关产品：Ramos.2G6.4C10细胞、Jurkat E6细胞、C33细胞 
VAESBJ细胞系相关产品：ELD-1细胞、NCI-H322T细胞、MyLa2059细胞 
HPAF/CD18细胞系相关产品：MUS-M1细胞、PANC 813细胞、BSC-40细胞 
MDA-157细胞系相关产品：SJ-RH30细胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞、NCIH820细胞 
Co-115细胞系相关产品：RIN Cl-5F细胞、HCT-FET细胞、MDAMB415细胞 
MDA330细胞系相关产品：Pt K2细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞、ROS-17/2.8细胞 
MZ-CRC-1细胞系相关产品：H2030细胞、KM933细胞、SUM 102细胞 
HUASMC细胞系相关产品：HC11细胞、SKLU01细胞、hTERT-HME1细胞 
Reuber H-35细胞系相关产品：STO细胞、Hs940-T细胞、PL 5细胞 
LAN-1细胞系相关产品：NCIH460细胞、KMM1细胞、BTI-Tn5B14细胞 
NCI-H1703细胞系相关产品：LC1sq细胞、NH-6细胞、OVCAR3细胞 
Panc 3.27细胞系相关产品：J774细胞、P3JHR-1细胞、HS852.T细胞 
HCC95细胞系相关产品：RN-c细胞、Neuro-2a细胞、SV-HUC细胞 
AMC-HN-8细胞系相关产品：BEL7405细胞、HMSC细胞、SKMES-1细胞 
High5细胞系相关产品：C2BBe 1细胞、Kit225 K6细胞、BrCL15细胞 
SUM-159-PT细胞系相关产品：Sp2/0-Ag-14细胞、SW1271细胞、OVCAR4细胞 
NCI-H69细胞系相关产品：H735细胞、PL 45细胞、MHCC 97-H细胞 
A-431细胞系相关产品：RL95-2细胞、Raji细胞、SKBR-3细胞 
SNU-16细胞系相关产品：2E8细胞、JurkatE6-1细胞、X63-Ag8.653细胞 
Pa18C细胞系相关产品：HS-766T细胞、BSC40细胞、NCI-441细胞 
HEI-193细胞系相关产品：HNSC细胞、NIH:OVCAR-5细胞、NCI-H1819细胞 
MDA-MB453细胞系相关产品：CCD966SK细胞、NCI-H1734细胞、NCIH2135细胞 
NIH-3T3细胞系相关产品：TM-4细胞、CAL-85-1细胞、HA1800细胞 
OVCA 433细胞系相关产品：Japanese Tissue Culture-28细胞、HPAF-II细胞、H-1944细胞 
LA-N-6细胞系相关产品：NCIH1781细胞、HLEC-SRA 01/04细胞、KLN 205细胞 
NCIH295R细胞系相关产品：TI-73细胞、NCIH1755细胞、NCI-H2591细胞 
Lu-65细胞系相关产品：LO2细胞、NCIH661细胞、MDAMB175细胞 
NTERA2-D1细胞系相关产品：TGBC11TKB细胞、H378细胞、BT-549细胞 
SK-NMC细胞系相关产品：Swiss 3T6细胞、PAI细胞、MAEC细胞 
IPI-2I细胞系相关产品：KP-N-RT-BM-1细胞、Hs870T细胞、TE-14细胞 
HC11细胞系相关产品：MM6细胞、HEC-251细胞、NUGC4细胞 
EA.Hy926细胞系相关产品：NCI-H1770细胞、SCCVII细胞、P36细胞 
RPTEC TERT1细胞系相关产品：786O细胞、H2591细胞、CF PAC-1细胞 
RK 13细胞系相关产品：NCIH2405细胞、HNE3细胞、SNU601细胞 
C2-C12细胞系相关产品：AQ-Mel细胞、WEHI3细胞、KYSE-450细胞 
NG 108-15细胞系相关产品：GM03569B细胞、MDA-MB-436细胞、A431细胞 
TM4 小鼠睾丸细胞系
SPDC-CCL141细胞系相关产品：CCC-HEH-2细胞、CHP-126细胞、LTEP a2细胞 
KU-812-F细胞系相关产品：SEM细胞、Mevo细胞、OCIAML2细胞 
H-820细胞系相关产品：PC-3M IE8细胞、HNE-2细胞、Onda 11细胞 
SK Mel 2细胞系相关产品：VK2细胞、H.Ep. No. 2细胞、GH3细胞 
SuDHL 2细胞系相关产品：DH 82细胞、Ly7细胞、H378细胞 
SKNBE(2c)细胞系相关产品：Melan-a细胞、HCA 7细胞、NCI-H522细胞 
NCI-H1693细胞系相关产品：MARC 145细胞、RCK8细胞、Hs888Lu细胞 
293AD细胞系相关产品：AHH-1细胞、GC-1spg细胞、UCLA-SO-14细胞 
LM3细胞系相关产品：HCC1500细胞、UCLA-SO-M14细胞、H-35细胞 
STTG1细胞系相关产品：QGY 7701细胞、H-35 Reuber细胞、KE39细胞 
COLO 320细胞系相关产品：THLE-2细胞、MUTZ1细胞、SK-OV-3细胞 
HEK-293细胞系相关产品：Ramos 2G6.4C10细胞、MDA.MB.435细胞、H1341细胞 
"