FaDu 人咽鳞癌细胞系

"FaDu 人咽鳞癌细胞系
细胞背景资料：１９６８年从一位印度下咽骨肿瘤患者的钻孔活组织切片中建立了FaDu细胞株。在建立的细胞株中发现细胞质中含有成束的细丝，并且细胞分界上的桥粒特别突出。 
细胞形态：上皮细胞样 
体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良好(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，最后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
FaDu 人咽鳞癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
细胞培养更好经验详解：1)收到细胞，首先要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题。比如293T，平时贴壁就不是很牢，在装满的培养基瓶子里面，会发生大片的脱落，细胞聚集在一起，但是细胞生长还是正常的，通过离心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察，细胞初步没有问题时，进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时，则处理如下：弃除瓶中大部分培养基，仅保留5到10mL培养所需的常规培养基；或更换新鲜的培养基，置于培养箱中，随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下，会调整为静止期，或者慢速生长期，恢复37度的环境至少3个小时左右，才能重新调整到接近对数生长期的状态，在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率，和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%，并且细胞状态很好时，则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快，状态稳定，不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶；对于生长较慢，细胞比较薄，状态容易波动的细胞类型，一次少传些，每瓶细胞密度大些，便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞，次处理也可以依照第二种情况。 
细胞传代方法：消化３-５分钟。１：２。３天内可长满。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
FaDu 人咽鳞癌细胞系
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗(冲洗)，加入适量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以盖住细胞，消化温度是３７℃；２)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度；(３)吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。【吹打分散细胞操作】１)吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液；２)吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入１０ml离心管中；３)平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以１０００转/分钟离心６-８分钟；４)弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入２ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。【分装稀释细胞操作】１)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于５×１０５/ml。最后要做好标记；２)分装：将细胞悬液吸出分装至２～３个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖；３)继续培养：用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO２培养箱中继续培养。传代细胞２小时后开始贴附在瓶壁上。 
细胞形态特性：上皮样 
118MG细胞系相关产品：SUP-B1细胞、Detroit 562细胞、LM1细胞 
NCIH1792细胞系相关产品：HOS TE85细胞、Y3-Ag 1.2.3细胞、HCC1833细胞 
S-16细胞系相关产品：Hs578Bst细胞、Vero 76 clone E-6细胞、QGY 7701细胞 
NCIH510细胞系相关产品：N-9细胞、HCT GEO细胞、SNU-886细胞 
Panc8.13细胞系相关产品：GM04680细胞、Nb2a细胞、NCIH660细胞 
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Mouse Colon 38细胞系相关产品：KTC1细胞、SNU-484细胞、MDA-231细胞 
C32-mel细胞系相关产品：GLAG-66细胞、huH 1细胞、WEHI-279细胞 
KY70细胞系相关产品：MC3T3-E1 Subclone 4细胞、SNU398细胞、Malme-3M细胞 
H-2444细胞系相关产品：CAL85-1细胞、PA-1细胞、NCI-H1341细胞 
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞系相关产品：Hs600T细胞、NCI-SNU-182细胞、NRK clone 52E细胞 
Line 522细胞系相关产品：H4IIEC3细胞、F442-A细胞、hMSC-BM细胞 
Y79细胞系相关产品：CHL-1细胞、MAVER细胞、NCI-H211细胞 
143B TK-细胞系相关产品：GM03571细胞、MH-22a细胞、SK RC 52细胞 
H2081细胞系相关产品：hFOB细胞、NCI-H2171细胞、CP70细胞 
293c18细胞系相关产品：NCIH23细胞、UO31细胞、BC-023细胞 
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Caki-1细胞系相关产品：NPA-87细胞、NCIH929细胞、GM-3573细胞 
Panc3_27细胞系相关产品：PG13细胞、Hs 746.T细胞、SVG p12细胞 
FaDu 人咽鳞癌细胞系
OVCA432细胞系相关产品：KU 19-19细胞、REC-1细胞、H-838细胞 
SCL1细胞系相关产品：NCTC clone 1469细胞、HTR-8细胞、RWPE1细胞 
SK-RC 39细胞系相关产品：TE-15细胞、HT1080细胞、NCI.H23细胞 
BLO-11细胞系相关产品：3T3-Swiss细胞、MCF 7B细胞、16HBE细胞 
NCI-SNU-601细胞系相关产品：U87 MG细胞、NIH3T3-L1细胞、H2591细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞系相关产品：LM TK negative细胞、MDAMB175细胞、OVCAR 5细胞 
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Lu-99A细胞系相关产品：P3X63 Ag8细胞、HPAF II细胞、CHO K1细胞 
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FaDu 人咽鳞癌细胞系
Fetal Human Colon细胞系相关产品：GM04154细胞、PBMC细胞、SR786细胞 
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