KP-N-NS 人肾上腺神经母细胞瘤细胞系

"KP-N-NS 人肾上腺神经母细胞瘤细胞系
细胞背景资料：源自脑转移灶的肾上腺神经母细胞瘤。 
细胞形态：上皮细胞样 
体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良好(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，最后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
KP-N-NS 人肾上腺神经母细胞瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。 
细胞传代方法：１：２传代 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
KP-N-NS 人肾上腺神经母细胞瘤细胞系
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞(绝大部分１min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的(比如Calu-３细胞)，吹打不超过２０次后(一般１０次即可)，成小规模聚集(１０个细胞左右)，是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
DHL4细胞系相关产品：IALM细胞、CALU 1细胞、GDM1细胞 
MCA-205细胞系相关产品：HEK-293 c18细胞、NCI-SNU-1040细胞、Nb2a细胞 
TOV21细胞系相关产品：H-1563细胞、MDA-231细胞、OCI-Ly18细胞 
ID8细胞系相关产品：IPI-2I细胞、RA 1细胞、FHs 74 Int细胞 
Panc10.05细胞系相关产品：MUGCHOR1细胞、MLE-12细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞 
VK2/E6E7细胞系相关产品：ESC细胞、H660细胞、C17细胞 
Lu99A细胞系相关产品：B16-F1细胞、Renal Carcinoma细胞、MBT2细胞 
Chinese Hamster Lung细胞系相关产品：H-1568细胞、PNT1-a细胞、COLO-320-DM细胞 
J 774A.1细胞系相关产品：Panc4.03细胞、SKCol1细胞、KBM-5细胞 
Mouse INsulinoma 6细胞系相关产品：U251MG细胞、H1436细胞、WI38细胞 
KNS-42细胞系相关产品：P-388D1细胞、mRMEC细胞、T47-D细胞 
CC-LP-I细胞系相关产品：MES-SA Dx5细胞、NCIH2052细胞、OVHM细胞 
FC33细胞系相关产品：MonoMac1细胞、HEK-A细胞、AM38细胞 
AN3 CA细胞系相关产品：BV-2细胞、Ishikawa细胞、COLO 679细胞 
MDCC-MSB-1细胞系相关产品：C-33-A细胞、RDES-1细胞、NCI-H1623细胞 
Cor L88细胞系相关产品：NCI-H1573细胞、SW-900细胞、CV1细胞 
Cor L88细胞系相关产品：NCI-H1573细胞、SW-900细胞、CV1细胞 
HOC细胞系相关产品：H-2073细胞、293S细胞、H1648细胞 
UWB1-289细胞系相关产品：A2780/CP细胞、HHFK细胞、DBTRG-05MG细胞 
NCI-SNU-398细胞系相关产品：SCC-9细胞、MDA 231-LM2-4175细胞、SNU423细胞 
KP-N-NS 人肾上腺神经母细胞瘤细胞系
Huh 7.5细胞系相关产品：MiaPaCa2细胞、Lewis Lung Cancer细胞、SUM 190细胞 
HCT_116细胞系相关产品：RT4-D6P2T细胞、Hs-675-T细胞、WB F344细胞 
MDA-MB-175VII细胞系相关产品：H-2108细胞、SF767细胞、BNL-HCC细胞 
GC-1细胞系相关产品：Normal Rat Kidney-52E细胞、Hs 695T细胞、GM05372E细胞 
P3HR1-BL细胞系相关产品：Pan02细胞、MCA-205细胞、SK-ES-1细胞 
SUM 149PT细胞系相关产品：3-LL细胞、SHEE细胞、PE CA PJ34细胞 
HEC1-B细胞系相关产品：HConEpic细胞、HT 1376.T细胞、GDM-1细胞 
CEF细胞系相关产品：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、343 MG细胞、MALME 3M细胞 
SCC90细胞系相关产品：COLO.205细胞、U-373MG ATCC细胞、W256细胞 
SGC-996细胞系相关产品：Hs 604.T细胞、HCET细胞、LAN1细胞 
NCI-H187细胞系相关产品：RCK8细胞、Y 1细胞、HEK-293H细胞 
UCLA-SO-14细胞系相关产品：NCI-H650细胞、HDSMC细胞、H-711细胞 
H82细胞系相关产品：FRTL-5细胞、H596细胞、OCM-1细胞 
Reuber-H-35 hepatoma细胞系相关产品：HCC-1588细胞、MPC5细胞、SW-527细胞 
CCRF/CEM-C7细胞系相关产品：SLMT-1细胞、COLO206细胞、SCCVII/St细胞 
MDA-MB-134-VI细胞系相关产品：MDA-MB436细胞、TGW-nu细胞、RAOEC细胞 
C8-D1A细胞系相关产品：MN9D细胞、CCRF CEM细胞、CSQT-2细胞 
DMS 53细胞系相关产品：CCRF-CEM C7细胞、VB细胞、Eca 109细胞 
HPAF-2细胞系相关产品：L Wnt-3A细胞、NCI-H2107细胞、HMC3细胞 
NCI-H460细胞系相关产品：SK Mel28细胞、NCI-H1793细胞、SW 480细胞 
SNU-1细胞系相关产品：MDA436细胞、U-138MG细胞、U373-MG细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞系相关产品：LM TK negative细胞、MDAMB175细胞、OVCAR 5细胞 
KYSE-180细胞系相关产品：SUM190细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、SKNBE(1)细胞 
Hs 636.T细胞系相关产品：EFO-27细胞、HCC1428细胞、PAa细胞 
H-1703细胞系相关产品：Porcine Kidney-13细胞、IOSE 80细胞、U343MG细胞 
Hs 606.T细胞系相关产品：NCI-SNU-16细胞、TM3细胞、HDSMC细胞 
P31FUJ细胞系相关产品：DHL-16细胞、ME1细胞、FU-OV-1细胞 
BE2-M17细胞系相关产品：COLO680N细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞、SW1222细胞 
H-865细胞系相关产品：Huh-7.5细胞、A20细胞、SKES-1细胞 
SBC5细胞系相关产品：NCI-SNU-C2A细胞、KLE细胞、RD细胞 
MCF-10A细胞系相关产品：NALM6细胞、Human Embryo Kidney-2细胞、MCF7-CTRL细胞 
CV 1细胞系相关产品：hADSCs细胞、BALL-1细胞、Z310细胞 
MOLP8细胞系相关产品：D341MD细胞、LX-2细胞、McCoy B细胞 
343MG细胞系相关产品：Fox/NY细胞、ECC-12细胞、BCP-1细胞 
LM6细胞系相关产品：NFS 60细胞、NCI-H735细胞、P30-OHKUBO细胞 
PA-TU S细胞系相关产品：NCI-H322T细胞、IMR 32细胞、NCI-ADR-RES细胞 
PA-TU S细胞系相关产品：NCI-H322T细胞、IMR 32细胞、NCI-ADR-RES细胞 
Madin Darby Canine Kidney细胞系相关产品：M20 [Human melanoma]细胞、SK-MEL5细胞、TM-4细胞 
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞系相关产品：H128细胞、HASMC细胞、NCI-H1299细胞 
MDA-MB-435 S细胞系相关产品：MDA231-LM2细胞、DHL6细胞、INS1E细胞 
SF126细胞系相关产品：KMH-2细胞、MCA 205细胞、MKN 7细胞 
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HEY A8细胞系相关产品：ME-180细胞、H-2198细胞、CMK细胞 
DoHH-2细胞系相关产品：MSCs（mUCMSCs）细胞、Lung cancer-1/squamous细胞、RAW264.7细胞 
TI-73细胞系相关产品：Hep 3B2.1-7细胞、KS-SLK细胞、P3J.HR1K细胞 
HEC251细胞系相关产品：CL1-0细胞、IHH4细胞、MDA453细胞 
Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞系相关产品：THP 1细胞、IGR-OV1细胞、BHK-21细胞 
U-343细胞系相关产品：P3HR1-BL细胞、HCCC9810细胞、786-0细胞 
NCC-IT细胞系相关产品：NCI-H2198细胞、MGHU1细胞、SUP-T1细胞 
H1651细胞系相关产品：OVSAHO细胞、LC-2-Ad细胞、SkChA1细胞 
COLO-1细胞系相关产品：Hs 766T细胞、OACP4 C细胞、Hs-675-T细胞 
LNCaP细胞系相关产品：Y79细胞、HS-683细胞、293T细胞 
H660细胞系相关产品：TE5细胞、266 Bl细胞、AZ 521细胞 
TOV21细胞系相关产品：H-1563细胞、N-Tera-2细胞、SKHEP-1细胞 
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