WEHI-231 Thawing小鼠B淋巴细胞系

"WEHI-231 Thawing小鼠B淋巴细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：淋巴母细胞样
WEHI-231 Thawing小鼠B淋巴细胞系
细胞生长：悬浮
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
WEHI-231 Thawing小鼠B淋巴细胞系
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。
细胞形态特性：详见细胞说明书
Cloudman S91 melanoma细胞系相关产品：COLO 206细胞、CAL39细胞、NCI-522细胞
SCC-1395细胞系相关产品：mREC细胞、HCC-1500细胞、Buffalo Rat Liver-3A细胞
HFE-145细胞系相关产品：VSMC细胞、H1876细胞、T 84细胞
BL2141细胞系相关产品：CAL148细胞、MOVAS-1细胞、PL 45细胞
H1385细胞系相关产品：MM.1S细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、HeLa229细胞
Sol8细胞系相关产品：RAW2647细胞、Oregon J-111细胞、U-118MG细胞
Huh 7.5.1细胞系相关产品：LM(TK-)细胞、SuDHL 2细胞、UM2细胞
SK-N-BE(1)细胞系相关产品：AZ-521细胞、NOR-10细胞、RAMOS2G64C10细胞
SUM-159PT细胞系相关产品：Hs683细胞、OCI-LY-3细胞、LC2/Ad细胞
RT4细胞系相关产品：U-118-MG细胞、OLN 93细胞、SVOG细胞
OCI Ly3细胞系相关产品：Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDAMB436细胞、CESS细胞
U251-MG细胞系相关产品：Leukemia L1210细胞、DMS-153细胞、CCD33Co细胞
Bovine ENDometrial cells细胞系相关产品：N9细胞、MDA-MB-134-VI细胞、CF Pac1细胞
CL MC/9细胞系相关产品：HFL 1细胞、Walker256-TC细胞、NOR-10细胞
OVCAR433细胞系相关产品：BEL/FU细胞、NCI-H2106细胞、SO-Rb 50细胞
EM-3细胞系相关产品：WERI-Rb-1细胞、293H细胞、H441细胞
SW1116细胞系相关产品：KYSE0520细胞、HT-1197细胞、NCI-H719细胞
CMT64细胞系相关产品：LN382细胞、Ramos(RA1)细胞、LMH细胞
H-510细胞系相关产品：LC-2 ad细胞、FHL124细胞、SK-BR3细胞
Mono Mac 1细胞系相关产品：BHP-10细胞、KE 37细胞、Leukemia 1210细胞
NCI-H2107细胞系相关产品：MCF-7/ADR-RES细胞、COLO206F细胞、K422细胞
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C1498细胞系相关产品：EB-3细胞、BJA-B1细胞、Mono Mac 1细胞
Hep-G2/C3A细胞系相关产品：alpha TC1-6细胞、BJA-B-1细胞、aTC1-6细胞
EnCa1细胞系相关产品：K7M2-WT细胞、CHL-11细胞、NCI-H2023细胞
210RCY3-Ag1.2.3细胞系相关产品：C32 [Human melanoma]细胞、QSG-7701细胞、NCIH650细胞
WEHI-231 Thawing小鼠B淋巴细胞系
HOS-TE85细胞系相关产品：SkMel31细胞、MS1细胞、OCI/AML-4细胞
NCIH64细胞系相关产品：Colo-201细胞、HL-1细胞、HOP62细胞
CCC-HEH-2细胞系相关产品：SK-GT-4细胞、Tn5 B1-4细胞、MESSADX5细胞
SEM细胞系相关产品：LTEP-a2细胞、OC-3-VGH细胞、WM115细胞
HDF-a细胞系相关产品：MDA-330细胞、HCC-38细胞、MILE SVEN 1细胞
SUM-102细胞系相关产品：H-1651细胞、NRK 49F细胞、SKN-AS细胞
OCI/AML-5细胞系相关产品：EC-GI-10细胞、253J-Bladder-V细胞、MHCC97-H细胞
NCI-H650细胞系相关产品：SK 1细胞、COLO394细胞、Hs 600.T细胞
CV 1细胞系相关产品：hADSCs细胞、BALL-1细胞、Z310细胞
KMM-1细胞系相关产品：MCF12F细胞、RPMI 2650细胞、CCRFCEM细胞
EC-109细胞系相关产品：HRIF细胞、P3-X63Ag8.653细胞、SUDHL-1细胞
QGY细胞系相关产品：CCD-1112sk细胞、IPLB-SF-21细胞、HCC-4006细胞
LNCaP C4-2细胞系相关产品：SW480E细胞、DI TNC-1细胞、NK92细胞
Calu3细胞系相关产品：PY8119细胞、CV1细胞、TM3细胞
HFT 8810细胞系相关产品：CAL-85-1细胞、MPC 11细胞、HEC-151细胞
Tn-5细胞系相关产品：MHCC97H细胞、AG06814-M细胞、16-HBE细胞
RL952细胞系相关产品：MV-4:11细胞、IA-LM细胞、Sf-21细胞
SU-DHL2细胞系相关产品：HCoEpiC细胞、Oka-C1细胞、TMD8细胞
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Medical Research Council cell strain-9细胞系相关产品：NCIH441细胞、T24(ECV304)细胞、H4-II-E-C3细胞
RS 4;11细胞系相关产品：MPC5细胞、H-1404细胞、D-341 Med细胞
RPE1-hTERT细胞系相关产品：H1993细胞、FRTL 5细胞、A2780S细胞
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NCI-H2170细胞系相关产品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞、BHT101细胞、COLO-824细胞
95-D细胞系相关产品：Line 870 Emory University-4细胞、SHP77细胞、SCI1细胞
H-774细胞系相关产品：GM00637细胞、SKNBE细胞、GB-1细胞
SK LU 1细胞系相关产品：EMT6细胞、LA-N-6(OAN)细胞、NCIH1836细胞
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P3/ag细胞系相关产品：HECCL-1细胞、NCI-HUT-292细胞、B-cell with DC Morphology细胞
Tj-905细胞系相关产品：GH 3细胞、COLO678细胞、mousepodocyte细胞
Lu-99A细胞系相关产品：P3X63 Ag8细胞、HPAF II细胞、CHO K1细胞
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EA.Hy926细胞系相关产品：NCI-H1770细胞、SCCVII细胞、P36细胞
WEHI-231 Thawing小鼠B淋巴细胞系
PL12细胞系相关产品：16HBE140细胞、PA-TU-8988S细胞、HIBEpiC细胞
AG06814-J细胞系相关产品：BAC1.2F5细胞、Pt K2细胞、LWnt-3A细胞
HO1-N1细胞系相关产品：SU-DHL-8细胞、Dakiki细胞、YH-13细胞
PA-1细胞系相关产品：Becker细胞、NUGC-2细胞、NCIH1819细胞
HCC0070细胞系相关产品：NCIH1395细胞、TO 175.T细胞、DHL-16细胞
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MA-782细胞系相关产品：NKT细胞、AR41P细胞、UCLA SO M14细胞
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