EoL-1 Thawing人急性髓系白血病细胞系

"EoL-1 Thawing人急性髓系白血病细胞系

细胞背景资料：急性髓系白血病；男性

细胞形态：淋巴母细胞样

EoL-1 Thawing人急性髓系白血病细胞系

细胞生长：悬浮

细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。

细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系

EoL-1 Thawing人急性髓系白血病细胞系

细胞生长特性：悬浮

细胞冻存基本方法：１．细胞：选对数生长期细胞，收集细胞２４小时前换液一次。２．计数：按常规方法把细胞制成细胞悬液，计数，令细胞密度达５×１０(６)/ml，离心去上清，吸入离心管中。３．冻存液：先用培养液９分＋DMSO １分（或甘油）配成１０％的DMSO冻存液，按上法一滴滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。４．分装：分装入无菌安剖中，每安剖加１.５毫升细胞悬液。５．封口：用塑料安剖时拧紧瓶口即可；如用火焰封闭安剖口后，仔细检查，定要封严，必要时可浸入蓝色液中观察，为安全起见，把安剖缝入纱布小袋中，以防液氮浸入后，融解时因受热发生爆炸伤人；纱袋一端系以线绳，末端扎有小牌，注明：细胞名称，冻存日期，以便日后查找。细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。

细胞形态特性：详见细胞说明书

HEK293-A细胞系相关产品：UPCI:SCC154细胞、H-2170细胞、C-4-I细胞

MDA-MB-231 #4175细胞系相关产品：REC 1细胞、EBNA293细胞、ROS17/28细胞

P3 88 D1细胞系相关产品：UM-UC-14细胞、SF-539 BT细胞、MES13细胞

FO [Mouse myeloma]细胞系相关产品：P31/Fujioka细胞、Colo16细胞、MHH-CALL-2细胞

HRMC细胞系相关产品：Institute for Medical Research-90细胞、3T3-Swiss细胞、Hs852T细胞

NCI-H345细胞系相关产品：MOVAS-1细胞、MAC1细胞、K-1735细胞

GM02219D细胞系相关产品：RMa-bm细胞、WSU-DLCL2细胞、HFT8810细胞

H226细胞系相关产品：H-1882细胞、SK N SH细胞、CEM.C1细胞

RT-BM细胞系相关产品：DHL6细胞、H-740细胞、OKAC1细胞

TE11细胞系相关产品：Lung cancer-1/squamous细胞、OUMS-27细胞、U2OS细胞

HuO9细胞系相关产品：SW1990细胞、MDA-436细胞、BT.549细胞

Medical University of Graz-Chordoma 1细胞系相关产品：HEH2细胞、CA46细胞、B95-8细胞

130T细胞系相关产品：L 132细胞、HuPT4细胞、F81细胞

H4细胞系相关产品：M1细胞、RPMI-2650细胞、SNU761细胞

COLO 679细胞系相关产品：CAOV4细胞、UMUC-14细胞、WM-2664细胞

Hs294T细胞系相关产品：MDAPCa-2b细胞、PL-11细胞、Caco-2细胞

SKLU-1细胞系相关产品：SK-Mel1细胞、WEHI 3细胞、D283-MED细胞

RS4;11细胞系相关产品：KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

细胞、Colo741细胞、D10G41细胞

CAL-85-1细胞系相关产品：SW837细胞、WIL2 Secreting细胞、NCI-H1688细胞

A2780细胞系相关产品：RMG1细胞、Sf21细胞、CCD 841 CoTr细胞

HDLM-2细胞系相关产品：MHCC-97细胞、D407细胞、H2106细胞

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Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞系相关产品：Hep-3B细胞、KM12 SM细胞、HEK293E细胞

JVM-2细胞系相关产品：3T3-L1 ad细胞、Caco-2 BBe细胞、SaOS-2细胞

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GAK细胞系相关产品：RSC-364细胞、C-28I2细胞、SVEC4-10细胞

EoL-1 Thawing人急性髓系白血病细胞系

ST2细胞系相关产品：R D细胞、RS4:11细胞、Hs675细胞

UPCI:SCC90细胞系相关产品：Jurkat (clone E6-1)细胞、NCIH1155细胞、GM00637B细胞

Sf21细胞系相关产品：U-251_MG细胞、NHRF细胞、HT-3细胞

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HEK.EBNA细胞系相关产品：NCIH2196细胞、WM115F细胞、NCIH226细胞

NCIN87细胞系相关产品：H1876细胞、NCIH841细胞、NCI-H2405细胞

SUP-T1细胞系相关产品：N-2a细胞、A-431细胞、SN12C细胞

Rat 1细胞系相关产品：HMrSV5细胞、NCI-H1792细胞、ACT-1细胞

Strain KB细胞系相关产品：6-T CEM细胞、RPMI 8226细胞、H-1792细胞

MPC5细胞系相关产品：COLO-HSR细胞、CCRF.CEM细胞、H-2052细胞

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COV-362细胞系相关产品：BAEC细胞、MKN45细胞、PLB 985细胞

NCI-SNU-520细胞系相关产品：SUM-159细胞、H-2029细胞、NCIH1770细胞

MV4II细胞系相关产品：Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞、KYSE520细胞、HFLS-RA细胞

CCD-841-CoTr细胞系相关产品：MEF (CF-1)细胞、LS513细胞、HCoEpiC细胞

ASPC1细胞系相关产品：HT-144细胞、TE671/RD细胞、MFM223细胞

NP69细胞系相关产品：H-2023细胞、LM(TK-)细胞、NCI-H1573细胞

CemT4细胞系相关产品：HCC-1937细胞、X63-Ag8细胞、GM2219C细胞

NCI-441细胞系相关产品：SGC-996细胞、HCC-1569细胞、A 253细胞

PLMVEC细胞系相关产品：JB6 clone 30, subclone 7b细胞、HTh-74细胞、L(TK-)细胞

HEL-92_1_7细胞系相关产品：SKG-IIIa细胞、H4-IIE-C3细胞、NCI H226细胞

Z-138细胞系相关产品：H838细胞、LNCaP-FGC细胞、D283 Med细胞

UACC-893细胞系相关产品：HGC27细胞、NCIH810细胞、NB19细胞

CFSC-8B细胞系相关产品：L-6 myoblast细胞、HCAEC细胞、M20 [Human melanoma]细胞

S3-HeLa细胞系相关产品：Hi-five细胞、RPTEC/TERT 1细胞、HNTEC细胞

4T1.2细胞系相关产品：SHG-44细胞、143 B细胞、Colon26细胞

JCA-1细胞系相关产品：NTC-200细胞、H-1975细胞、Fox/NY细胞

TO175T细胞系相关产品：CMT167细胞、U-343 MG细胞、LM TK negative细胞

H-510细胞系相关产品：LC-2 ad细胞、FHL124细胞、SK-BR3细胞

J-774细胞系相关产品：IMR 90细胞、A9细胞、Rat-1细胞

KU-19-19细胞系相关产品：MM1.S细胞、SK-NEP-1细胞、HT细胞

EoL-1 Thawing人急性髓系白血病细胞系

SK-N-BE(1)n细胞系相关产品：NSC34细胞、H-2023细胞、EAHY-926细胞

SK-NEP-1细胞系相关产品：SCL II细胞、Dunn LM8细胞、COLO-829细胞

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HR1K细胞系相关产品：JB6 Cl 30-7b细胞、TM-4细胞、IB-RS2细胞

NCI-H1755细胞系相关产品：BEAS2B细胞、Leukemia 1210细胞、LCLC103H细胞

H1688细胞系相关产品：T/G HA VSMC细胞、KLM1细胞、HEL-299细胞

RPMI-8226细胞系相关产品：Human Epithelioma-2细胞、CCRF-CEM细胞、Turbot Embryonic Cell line细胞

SK-Mel 2细胞系相关产品：GMK,BSC-1细胞、YAC细胞、Tb 1 Lu细胞

SHG 44细胞系相关产品：HD-LM-2细胞、Hs840T细胞、RT4-D6P2T细胞

JURKAT E-6.1细胞系相关产品：MEL细胞、NCIH647细胞、Balb/c3T3细胞

L- cell细胞系相关产品：UMR 106细胞、32D CL3细胞、SK MEL-28细胞

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