CEM-T4 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系

"CEM-T4 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系
细胞背景资料：急性T淋巴细胞白血病；女性
细胞形态：淋巴母细胞样
CEM-T4 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系
细胞生长：悬浮
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CEM-T4 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系
细胞生长特性：悬浮
细胞培养相关问题总结：冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂；细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DMSO？除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，应直接放入含有１０-１５ml新鲜培养基之培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题；可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活；培养细胞时应使用５%或１０%CO２？或根本没有影响？一般培养基中大都使用HCO３-/CO３２-/H+作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO３的含量将决定细胞培养时应使用的CO２浓度。当培养基中NaHCO３含量为每公升３.７g时，细胞培养时应使用１０%CO２；当培养基中NaHCO３为每公升１.５g时，则应使用５%CO２培养细胞。何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。培养基中是否须添加抗生素？除于特殊筛选系统中外，一般正常培养状态下，培养基中不应添加任何抗生素。
细胞形态特性：详见细胞说明书
PIGI细胞系相关产品：GTL 16细胞、HS-683细胞、Y3细胞
LY-R细胞系相关产品：EJ1细胞、A498细胞、Colon-26细胞
526 mel细胞系相关产品：RTE细胞、293-EBNA细胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞
RPE1-hTERT细胞系相关产品：H1993细胞、FRTL 5细胞、A2780S细胞
SNU216细胞系相关产品：MyLa 2059细胞、DI-TNC1细胞、HeLa细胞
SW 1353细胞系相关产品：Hs 729.T细胞、WM266-4细胞、alphaTC clone 6细胞
RMa-bm细胞系相关产品：CT26WT细胞、HEL-92.1.7细胞、HCC2218细胞
CL 1-5细胞系相关产品：PANC-1细胞、H-1563细胞、IBMF-7细胞
GA-10细胞系相关产品：NIH3T3-L1细胞、HIEC-6细胞、K1细胞
143B细胞系相关产品：JVM2细胞、Hs-695-T细胞、V 79-4细胞
CO115细胞系相关产品：SK.MEL.5细胞、PECAPJ34细胞、MADB-106细胞
Panc5.04细胞系相关产品：Hs281T细胞、H2342细胞、TOV21细胞
KLN205细胞系相关产品：HeLa S 3细胞、ES-2细胞、H9c2 (2-1)细胞
H1869细胞系相关产品：PA12细胞、SW900细胞、H283细胞
BCAP37细胞系相关产品：HSCT6细胞、HEK 293T/17细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞
AML-EOL-1细胞系相关产品：HSAS1细胞、HKF细胞、BJAB-1细胞
SW 954细胞系相关产品：A375-S2细胞、Mel526细胞、SUIT 2细胞
MiaPaca.2细胞系相关产品：MGHU1细胞、L-428细胞、MDA-MB-330细胞
J774A.1细胞系相关产品：32D:cl3细胞、UCLA-SO-14细胞、U-138-MG细胞
MONO-MAC 6细胞系相关产品：H-2135细胞、P30/OHK细胞、EOC 20细胞
NCI-H2170细胞系相关产品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞、BHT101细胞、COLO-824细胞
NCI-H2170细胞系相关产品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞、BHT101细胞、COLO-824细胞
NCIH1694细胞系相关产品：GC1-SPG细胞、S3-HeLa细胞、Hs 636 T细胞
Ramos 1细胞系相关产品：HBE 135-E6/E7细胞、SK-N-BE-2c细胞、Sc-1细胞
NT-2细胞系相关产品：CATH.a细胞、CT 26细胞、3T3-L1细胞
H283细胞系相关产品：U266 Bl细胞、beta TC6细胞、Gerner 7666细胞
CEM-T4 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系
NCI-H1781细胞系相关产品：253JBV细胞、NHEK细胞、ESC-410细胞
FRTL-5细胞系相关产品：Hs-675-T细胞、P3X63Ag8.653细胞、SO-RB50细胞
TE15细胞系相关产品：N-Tera-2细胞、PAEC细胞、4T1-LUC细胞
Kit-225-K6细胞系相关产品：OVCA-420细胞、H4IIEC3细胞、ABE­8.1/2细胞
T 98 G细胞系相关产品：FHs74Int细胞、MLA144细胞、MPC-83细胞
NPC-TW 039细胞系相关产品：Leghorn Male Hepatoma cell line细胞、LLC PK1细胞、CAL51细胞
H-676细胞系相关产品：X63-Ag 8.6.5.3细胞、Hs742T细胞、H1238细胞
GM02219C细胞系相关产品：MCF 10A细胞、Lec1细胞、RD 2细胞
A2780/CP70细胞系相关产品：A-375SM细胞、SNU-16细胞、alpha TC1-6细胞
786O细胞系相关产品：OCI-Ly 1细胞、NCI/ADR-RES细胞、NCI-H441-4细胞
P3JHR-1细胞系相关产品：SV40-MES13细胞、NCI-H920细胞、SKNBE细胞
U87细胞系相关产品：PANC1005细胞、ECC10细胞、RCM1细胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞系相关产品：Fortner's melanotic melanoma #3细胞、3T3-442A细胞、HCCC9810细胞
HMEL细胞系相关产品：Strain V细胞、HEK 293A细胞、H1184细胞
Ramos 1细胞系相关产品：HBE 135-E6/E7细胞、SK-N-BE-2c细胞、Sc-1细胞
Z310细胞系相关产品：NCI660细胞、NCI-H2122细胞、TE354.T细胞
LUDLU1细胞系相关产品：OCILY3细胞、CT-26 WT细胞、K562细胞
C22细胞系相关产品：OVCAR 420细胞、Ca759细胞、NCIH1417细胞
Helacyton gartleri细胞系相关产品：HCGC细胞、VP229细胞、RBL.2H3细胞
IHHA-1细胞系相关产品：G402细胞、BEL 7405细胞、TE-32细胞
RSC-364细胞系相关产品：NCI-H-128细胞、KMBC细胞、MES-SA细胞
U-343 MG细胞系相关产品：MGH-U3 (RN)细胞、H735细胞、H1385细胞
MOPC细胞系相关产品：HS-294细胞、GM3570细胞、C57 Mouse Tumor 64细胞
MADISON LUNG TA-109细胞系相关产品：PK136细胞、MIA PaCa-2细胞、C666-1细胞
FHL124细胞系相关产品：GCT0404细胞、MADISON LUNG TA-109细胞、HeLa-229细胞
ASH-3细胞系相关产品：H-1703细胞、SW756细胞、NCI-H2342细胞
N-87细胞系相关产品：108CC15细胞、Hs 895 T细胞、KYSE 520细胞
RBL 2H3细胞系相关产品：NCIH2023细胞、UPCI-SCC-90细胞、C4-2细胞
RAG细胞系相关产品：HFTF细胞、OSRC2细胞、CD18细胞
MV3细胞系相关产品：TE7细胞、IHH-4细胞、RD-2细胞
H-2227细胞系相关产品：HT1197细胞、HUT 125细胞、J.E6-1细胞
RPMI2650细胞系相关产品：H747细胞、HEC-1-A细胞、HS688AT细胞
Michigan Cancer Foundation-12A细胞系相关产品：NBL-12细胞、HSC/mHSC细胞、CAL27细胞
CEM-T4 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系
MDAMB468细胞系相关产品：HT1080细胞、BC-023细胞、IM9细胞
GB-1细胞系相关产品：DLD-1细胞、RPVSMC细胞、MOLT3细胞
Lewis Lung细胞系相关产品：WEHI231细胞、UMNSAH/DF#1细胞、LIXC-002细胞
BC3H-1细胞系相关产品：769P细胞、ETCC007细胞、GEO细胞
NW38细胞系相关产品：H1648细胞、MDA MB 361细胞、NTERA2-D1细胞
CMEC/D3细胞系相关产品：DB细胞、GM00215A细胞、FBHE细胞
G-Olig2细胞系相关产品：C3H10T1-2细胞、SNUC1细胞、Calu 6细胞
MFE280细胞系相关产品：EBC1细胞、MG-63细胞、BaF3细胞
PANC-02-03细胞系相关产品：HEK-293-EBNA细胞、MSTO211H细胞、MeWo细胞
UCLA RO-81A-1细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞、Hep3B细胞、M14-MEL细胞
MV-522细胞系相关产品：SUM 102细胞、451-LU细胞、Caki2细胞
"