KE-37 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系

"KE-37 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系
细胞背景资料：急性T淋巴细胞白血病；男性
细胞形态：淋巴母细胞样
KE-37 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系
细胞生长：悬浮
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37℃消化。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
KE-37 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系
细胞生长特性：悬浮
如何把细胞养的形态更好更漂亮。１.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。２.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入３ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）；其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。１０分钟观察一次，２０分钟，３０分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入３ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。３.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。（可能也是竞争很大，有优胜劣汰吧。呵呵。）对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。４.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，比玻璃瓶会好，对于生长速度慢的细胞，玻璃瓶则会更好。同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。
细胞形态特性：详见细胞说明书
OCI/AML-3细胞系相关产品：MDST8细胞、293FT细胞、He La细胞
118 MG细胞系相关产品：HNE3细胞、LK-2细胞、B16/F10细胞
Caco-2/ATCC细胞系相关产品：NCI-H1944细胞、R D细胞、SUD4细胞
NL20细胞系相关产品：RIN m5F细胞、MLFC细胞、LTEP-sm 1细胞
L-WRN细胞系相关产品：LC-1细胞、NCIH1836细胞、CW-2细胞
MDCK细胞系相关产品：SK-BR-3细胞、PNEC30细胞、293/EBNA-1细胞
BI-Mel细胞系相关产品：KHYG-1细胞、SkChA1细胞、SW.620细胞
NCI/ADR-RES细胞系相关产品：FM-88细胞、DC 2.4细胞、L-cell细胞
NTERA-2 clone D1细胞系相关产品：NCI-H226细胞、H-226细胞、C81-61细胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞系相关产品：H-1623细胞、H-719细胞、OVSAHO细胞
NB19-RIKEN细胞系相关产品：MODE-K细胞、NCI-H2342细胞、IPEC-J2细胞
Cloudman M3细胞系相关产品：Dami细胞、Hs600T细胞、H1650细胞
L363细胞系相关产品：alpha-TC1-6细胞、H1568细胞、S180细胞
UMRC-2细胞系相关产品：RBL细胞、NCI-H740细胞、CMT-93细胞
HBVSMC细胞系相关产品：CAL-27细胞、PG-LH7细胞、G402细胞
H-250细胞系相关产品：H520细胞、DHBE细胞、OLN-93细胞
TE13细胞系相关产品：H1944细胞、GM05372细胞、CT26.CL25细胞
TPC-1细胞系相关产品：OUMS23细胞、D407 RPE细胞、RTE细胞
TE-7细胞系相关产品：Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、MGH-UI细胞、H2291细胞
SN-12C细胞系相关产品：BRL 3A细胞、KM.12细胞、MCF7细胞
SNU-182细胞系相关产品：B-104细胞、Hep 3B细胞、MDA-MB-175细胞
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Rainbow Trout Embryo细胞系相关产品：SupB15W细胞、BOWES细胞、TOG细胞
VK-2/E6E7细胞系相关产品：HS-445细胞、HT(H9)细胞、GLC82细胞
P3/NS-1细胞系相关产品：3LL细胞、SUM-102PT细胞、IPLB-Sf21细胞
HTR8svn细胞系相关产品：HCC-9204细胞、Panc3_27细胞、HT-144细胞
KE-37 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系
MDA-MB-330细胞系相关产品：U-226AR1细胞、SNU-216细胞、HLE B-3细胞
MiaPaCa-2细胞系相关产品：TW-039细胞、FET细胞、Potorous tridactylus Kidney 1细胞
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KE-37 Thawing人急性T淋巴细胞白血病细胞系
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Granta 519细胞系相关产品：HET-1A细胞、J 774A.1细胞、Central Adrenergic TH-expressing a细胞
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GCT细胞系相关产品：BRL-3A细胞、M1细胞、EFM-192B细胞
NCIH1838细胞系相关产品：High Five细胞、A-20细胞、RMS 1598细胞
MIN6细胞系相关产品：NCIH1568细胞、10RGB细胞、LS 123细胞
LUDLU 1细胞系相关产品：HCC9204细胞、CCD841CoTr细胞、NPC-TW-039细胞
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