SHI-1 Thawing人单核细胞白血病细胞系

"SHI-1 Thawing人单核细胞白血病细胞系
细胞背景资料：急性单核细胞白血病；男性
细胞形态：淋巴母细胞样
SHI-1 Thawing人单核细胞白血病细胞系
细胞生长：悬浮
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
公司细胞库冻存并保种有2300多种各类细胞系。针对每种不同的细胞系，公司摸索并积累了大量细胞培养条件和优化参数，为您的细胞实验保驾护航。细胞培养是生命科学研究中最基础、也是最常用的实验手段。从冻存→复苏→传代→实验，在每一次细胞培养的过程中我们都是精心呵护，小心培养，心里都是默默承诺：我要护你一世周全！可是可是……无数次细胞都因污染而离我而去，投入的不只是我们貌美如花的青春，还有那一去不复返的经费！在细胞生物学，生物化学，免疫学，神经生物学，病理学……只要涉及细胞的研究领域，都面临着支原体污染的威胁。在众多污染物中，也就属支原体最狡猾了，他最善于隐藏自己，因为被支原体污染的细胞不会马上死亡，但会改变细胞的新陈代谢，甚至会改变细胞的基因表达谱，我们就这样被欺骗了无数次，谁让我们就是个看“颜值”的花痴了。可是我们通过被虐了几百次的经验中总结出来，当你的细胞出现了这些症状时：生长速率改变；活性减弱；形态改变；染色体畸变；转染效率显著降低；细胞复苏后存活率降低……。那你就得千万小心了，也许你的细胞已经被支原体欺凌了！
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SHI-1 Thawing人单核细胞白血病细胞系
细胞生长特性：悬浮
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO２培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于４°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于４°C冰箱中，培养基内之CO２会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO２，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞形态特性：详见细胞说明书
PA-1细胞系相关产品：Becker细胞、NUGC-2细胞、NCIH1819细胞
MIA-PaCa-2细胞系相关产品：Dakiki细胞、HSC3细胞、HCPEpiC细胞
NCIH69细胞系相关产品：RD 2细胞、H-1963细胞、ASPC1细胞
U-226AR1细胞系相关产品：H-1417细胞、U-937细胞、WML2细胞
CF-1 MEF细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-62细胞、RM1细胞、NCI-H-82细胞
IGROV1细胞系相关产品：NCI.H226细胞、GH3细胞、SW982细胞
HCC2108细胞系相关产品：BNCL2细胞、MXI细胞、SW1783细胞
EoL-1-cell细胞系相关产品：BRL细胞、H-1048细胞、SPCA-1细胞
NB-9细胞系相关产品：LYR细胞、HEM细胞、HEK-AD 293细胞
HEK293S细胞系相关产品：Michigan Cancer Foundation-12A细胞、SUM149PT细胞、LNCaP.FGC细胞
MS 751细胞系相关产品：OVCA5细胞、BALB 3T3 clone A31细胞、NCI-H520细胞
TMK1细胞系相关产品：HMEC细胞、NCIH1819细胞、RSC-96细胞
Mink细胞系相关产品：ROS 17/28细胞、SUIT2细胞、Human Microglia Clone 3细胞
KU-19-19细胞系相关产品：MM1.S细胞、SK-NEP-1细胞、HT细胞
AtT-20细胞系相关产品：H-1436细胞、RT4P细胞、Chang liver细胞
MDA-MB-361细胞系相关产品：LICR-LON-HN6细胞、hFOB1.19细胞、H508细胞
IEC6细胞系相关产品：HEK 293-EBNA细胞、COR-L23细胞、ME-180细胞
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JIII细胞系相关产品：MDA-MB-468细胞、LS1034细胞、3D4/21细胞
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Liver-02细胞系相关产品：MC-4细胞、GM00637F细胞、Ca-Ski细胞
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SHI-1 Thawing人单核细胞白血病细胞系
Calu3细胞系相关产品：PY8119细胞、CV1细胞、TM3细胞
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H2108细胞系相关产品：MES-13细胞、H-2405细胞、NCIH69细胞
SF 539细胞系相关产品：SNU739细胞、HTR-8/SV-neo细胞、NH6细胞
SHI-1 Thawing人单核细胞白血病细胞系
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D283细胞系相关产品：SKMEL3细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞、Det 562细胞
SW1417细胞系相关产品：B-16细胞、Kuramochi细胞、L细胞
Hs 281.T细胞系相关产品：COLO-320-DM细胞、NCM460细胞、ARH-77细胞
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ACT-1细胞系相关产品：LC-2-Ad细胞、SW1990细胞、H1688细胞
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