38C13 Thawing小鼠B淋巴瘤细胞系

"38C13 Thawing小鼠B淋巴瘤细胞系
细胞背景资料：B淋巴瘤；C３H/eB
细胞形态：淋巴母细胞样
38C13 Thawing小鼠B淋巴瘤细胞系
细胞生长：悬浮
常见培养细胞预防污染的有效措施：体外培养的细胞受到严重污染时，有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此，防止污染，预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终，才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手：１)添加抗生素：各种抗生素性质不同，对各种微生物的作用也不同，联合应用比单用效果好，预防性应用比污染后使用好(但迄今尚无对抗支原体特效抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性，且对细胞本身也有一定影响，因此为避免诱导抗药细菌，应定期更换培养系统中的抗生素，或尽可能不用抗生素处理；２)从物品、用品消毒灭菌着手：细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时，在无菌过滤操作中，随着滤过体积的增大，滤膜破损的可能性增加，故应选择最后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作：７５%的酒精搽拭培养箱后，使用可移动的紫外灯至少消毒３０min，加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制３００ml的饱和酸铜加３L灭菌超纯水混合成酸铜溶液加入水槽中。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
贴壁细胞冻存注意事项：细胞冻存液需提前配制，不可直接将DMSO加入细胞悬液中；不同细胞消化时间有差异，以实际镜检结果为准，大部分细胞回缩变圆并有少量细胞脱落即可中止消化，消化时间不宜过长；应选择汇合度80%-90%左右，细胞处于对数生长期时进行冻存操作，确保细胞冻存时状态，冻存密度可根据细胞特性进行调整；冻存细胞保存温度应低于-130℃，不可在-80℃长期保存。贴壁细胞冻存操作步骤：从培养箱中取出准备冻存的细胞；显微镜下观察细胞状态并拍照记录；酒精消毒培养瓶后放入安全柜中；吸去多余的培养基，加人2~3ml(PBS缓冲液)润洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在显微镜下观察细胞消化情况；消化完全后，加3ml完全培养基终止；将细胞悬液移入15ml离心管中离心，1000rpm/min（约200g）离心3-5min；吸去多余的液体，向细胞沉淀中加入适量的冻存液，轻轻吸打混匀；按比例分装至冻存管中；贴好标签后放入梯度冻存盒中；将冻存盒放入-80℃，降温过夜后，移入液氮中保存。贴壁细胞冻存实验准备事项：将15mL离心管、冻存管、PBS缓冲液、移液管、电动移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒灭菌；细胞完全培养基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、细胞冻存液等从4℃冰箱中取出后，复温至室温，备用；程序降温盒复温至室温备用。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
38C13 Thawing小鼠B淋巴瘤细胞系
细胞生长特性：半贴壁
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
细胞形态特性：详见细胞说明书
BEAS-2B细胞系相关产品：PA-1细胞、143TK-细胞、HCC0078细胞
E304细胞系相关产品：SR-786细胞、3LL细胞、U138细胞
HL7702细胞系相关产品：HPAFII细胞、MCAEC细胞、H-1373细胞
WEHI 3细胞系相关产品：NCI-H292细胞、Hs27F细胞、Clone 15 HL-60细胞
Human Fetal Thymocyte-8810细胞系相关产品：HCC-1569细胞、H-69细胞、KATO III细胞
UMUC1细胞系相关产品：HLE细胞、HFL-1细胞、H-2029细胞
Caco 2细胞系相关产品：HEM-L细胞、hSCC-25细胞、FRO细胞
SKMEL1细胞系相关产品：HL-60 Clone 15细胞、HCC1954BL细胞、CHO-Lec1细胞
Hs-729-T细胞系相关产品：RPMI8226细胞、OCILY-10细胞、MM96L细胞
SCC 9细胞系相关产品：MLE-12细胞、SK-MEL-24细胞、GM03671C细胞
P3/NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品：EU-3细胞、GM 2132细胞、SHP-77细胞
HLMVEC细胞系相关产品：MKN 7细胞、ML-2细胞、HPaSteC(HPSC)细胞
HEK293-F细胞系相关产品：P3-X63Ag8.653细胞、SKG3A细胞、B4G12细胞
FHL124细胞系相关产品：GCT0404细胞、MADISON LUNG TA-109细胞、HeLa-229细胞
CAL 78细胞系相关产品：SNU-387细胞、H-1915细胞、HCC 70细胞
CHL-11细胞系相关产品：U373 MG细胞、MFM223细胞、MCF10A细胞
JIMT1细胞系相关产品：SKMel-28细胞、CL40细胞、Calu-6细胞
HCA 7细胞系相关产品：H-292细胞、GC1-SPG细胞、AR4-IP细胞
RGC6细胞系相关产品：SF-295细胞、MFE 296细胞、KYSE 180细胞
H220细胞系相关产品：H-676细胞、L cells细胞、EL 4细胞
Y-79细胞系相关产品：MBT2细胞、DITNC1细胞、CX-1细胞
LIXC-002细胞系相关产品：B4G12细胞、MRC9细胞、M059J细胞
UWB1-289细胞系相关产品：A2780/CP细胞、HHFK细胞、DBTRG-05MG细胞
HCM细胞系相关产品：HEK-AD293细胞、AG 9细胞、WIL2-S细胞
CHL-IU细胞系相关产品：KU-812-F细胞、SK-BR3细胞、QGY-7703细胞
NOZ细胞系相关产品：H196细胞、NCI-H-69细胞、THP-1细胞
38C13 Thawing小鼠B淋巴瘤细胞系
SW-1116细胞系相关产品：CL1细胞、Transformed Human Liver Epithelial-3细胞、MODE-K细胞
MLO-Y4细胞系相关产品：HELF细胞、Hs 832(C).T细胞、Jiyoye (P-2003)细胞
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BT 20细胞系相关产品：NCI-HUT-460细胞、NE-4C细胞、NCI-H2122细胞
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NCIH2452细胞系相关产品：B-3细胞、NMCG1细胞、HPMEC细胞
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JF305细胞系相关产品：HT115细胞、HT22细胞、HTh74细胞
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OKAC1细胞系相关产品：P3JHR1细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、MC57细胞
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C-33 A细胞系相关产品：ST2细胞、KRC-Y细胞、VP 229细胞
LOU-NH-91细胞系相关产品：MCF-7/AdrR细胞、SUP-M2细胞、C-33-A细胞
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Ca Ski细胞系相关产品：Tb 1 Lu (NBL-12)细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞、D-407细胞
PLC细胞系相关产品：Hs739T细胞、RPMI-1788细胞、OVCA-432细胞
NIH 3T6细胞系相关产品：CP70细胞、H1373细胞、SKNBE(2c)细胞
BRL 3A细胞系相关产品：PFSK细胞、UO.31细胞、HCC1954BL细胞
CHL1细胞系相关产品：MBMEC细胞、NCI-H220细胞、MDA157细胞
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Daoy细胞系相关产品：KMB-17细胞、UMRC-2细胞、Rat-2细胞
VAESBJ细胞系相关产品：ELD-1细胞、NCI-H322T细胞、MyLa2059细胞
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