SC Thawing人急性单核细胞白血病细胞系

"SC Thawing人急性单核细胞白血病细胞系
细胞背景资料：急性单核细胞白血病；男性
细胞形态：淋巴母细胞样
SC Thawing人急性单核细胞白血病细胞系
细胞生长：悬浮
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SC Thawing人急性单核细胞白血病细胞系
细胞生长特性：悬浮
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。
细胞形态特性：详见细胞说明书
SK 1细胞系相关产品：Colo-206F细胞、SW 756细胞、Hep 3B2细胞
Co-115细胞系相关产品：RIN Cl-5F细胞、HCT-FET细胞、MDAMB415细胞
HOC细胞系相关产品：H-2073细胞、293S细胞、H1648细胞
GS-9L细胞系相关产品：BC-028细胞、Neukoplast细胞、OAW42细胞
SK MEL 28细胞系相关产品：Fetal Human Colon细胞、NP69细胞、HREC细胞
DHBE细胞系相关产品：SW900细胞、Suzhou Human Glioma-44细胞、Hep 3B2_1-7细胞
K-562细胞系相关产品：GFP-Olig2细胞、Colo205细胞、H3255细胞
IHH4细胞系相关产品：NCTC929细胞、NCI-H1836细胞、VP267细胞
Swiss/3T3细胞系相关产品：Human Fetal Thymocyte-8810细胞、LL/2 (LLC1)细胞、NCI-H2085细胞
INS1E细胞系相关产品：HEC1B细胞、KTCTL140细胞、HEK 293T/17细胞
MC3T3-E1细胞系相关产品：NCIH2228细胞、RAW-264.7细胞、Hs 729T细胞
MM6细胞系相关产品：Kit225细胞、Rabbit Kidney 13细胞、C3A细胞
SLMT-1细胞系相关产品：L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、SNU1细胞、BV173细胞
U-343细胞系相关产品：P3HR1-BL细胞、HCCC9810细胞、786-0细胞
D283细胞系相关产品：SKMEL3细胞、M-1细胞、OCILY7细胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞系相关产品：H211细胞、MNNGHOS细胞、GM00346B细胞
K-1735细胞系相关产品：786.O细胞、Calu 6细胞、HSAS3细胞
RPMI 7666细胞系相关产品：DMS 53细胞、SR-786细胞、SN12C-PM6细胞
Panc_05_04细胞系相关产品：JIMT1细胞、H2172细胞、McARH7777细胞
MDA-231细胞系相关产品：HOS(TE85)细胞、MNNG/HOS Clone F-5细胞、OC 316细胞
SCL I细胞系相关产品：UCW 100细胞、SF-295细胞、Centre Antoine Lacassagne-33细胞
SCL I细胞系相关产品：UCW 100细胞、SF-295细胞、Centre Antoine Lacassagne-33细胞
ARH77细胞系相关产品：H-9细胞、SNU407细胞、P19细胞
MLMA细胞系相关产品：NCI-H727细胞、COLO-16细胞、SW1417细胞
P3X63NS1细胞系相关产品：KYSE 30细胞、RSC 96细胞、VP 267细胞
VK2/E6E7细胞系相关产品：ESC细胞、H660细胞、C17细胞
SC Thawing人急性单核细胞白血病细胞系
NCIH838细胞系相关产品：MAVER1细胞、KMM-1细胞、NE-4C细胞
NB1RGB细胞系相关产品：SK-MEL-2-LUC细胞、H-1819细胞、SHIN-3细胞
LL/2 (LLC1)细胞系相关产品：HeLa229细胞、ROS 17/2.8细胞、LAN6细胞
G-292, clone A141B1细胞系相关产品：Hs 766.T细胞、SCC-1395细胞、MT4细胞
SK-GT-2细胞系相关产品：D-407细胞、KP-N-RT-BM-1细胞、H-774细胞
MB468细胞系相关产品：Pt-K2细胞、BT325细胞、HEK-293A细胞
RSC 96细胞系相关产品：Ej138细胞、SKMEL-31细胞、IEC 18细胞
A-72细胞系相关产品：MDA-157细胞、aTC1 Clone 6细胞、NU-GC-4细胞
QBC939细胞系相关产品：HRA-19细胞、TE9细胞、C518细胞
COLO320HSR细胞系相关产品：H2110细胞、SuDHL 4细胞、H2073细胞
108CC15细胞系相关产品：OAW 42细胞、BHP10-3细胞、RT 112细胞
OCILY3细胞系相关产品：Madison细胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞、HEK AD293细胞
JHH2细胞系相关产品：DMS 153细胞、KCL22细胞、675T细胞
201T细胞系相关产品：Fetal Bovine Heart Endothelial细胞、KALS-1细胞、MDBK (NBL-1)细胞
Mv1.Lu细胞系相关产品：MDA-MB-361细胞、H1975细胞、P3X63细胞
LC-2 ad细胞系相关产品：C17.2细胞、IMR-32细胞、SMA 560细胞
FM88细胞系相关产品：BaF3细胞、NCTC-1469细胞、SKO007细胞
Hs819.T细胞系相关产品：SKO-007细胞、H-524细胞、NCIH2073细胞
Huh 7.5细胞系相关产品：MiaPaCa2细胞、Lewis Lung Cancer细胞、SUM 190细胞
AU-565细胞系相关产品：LCLC-103H细胞、Clone 166细胞、Panc04.03细胞
LAN5细胞系相关产品：SW 1463细胞、293GP细胞、H295细胞
HEK-293F细胞系相关产品：Jurkat E6细胞、FTC-133细胞、COLO 320DM细胞
OVCAR-432细胞系相关产品：SK-N-BE细胞、SKMEL24细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞
IMCD3细胞系相关产品：P560细胞、MKN-1细胞、NCI-H2052细胞
SUP-M2细胞系相关产品：SW1271细胞、D283MED细胞、Baby Hamster Kidney-21细胞
BT 549细胞系相关产品：DU4475细胞、HS-729细胞、Mouse podocyte细胞
PLMVEC细胞系相关产品：JB6 clone 30, subclone 7b细胞、HTh-74细胞、L(TK-)细胞
Anip 973细胞系相关产品：OE21细胞、CCD-966SK细胞、Co 115细胞
LNCaP-FGC细胞系相关产品：CORL26细胞、NCI-H250细胞、RA 1细胞
RKOAS451细胞系相关产品：T2(174 x CEM.T2)细胞、H-2141细胞、H-820细胞
VMM5细胞系相关产品：NuTu 19细胞、HCC9724细胞、EM3细胞
RMS 1598细胞系相关产品：PC 61.5.3细胞、JJN-3细胞、NCIH1693细胞
SKGIIIA细胞系相关产品：Strain L-929细胞、MDAMB415细胞、H1672细胞
SC Thawing人急性单核细胞白血病细胞系
Roswell Park Memorial Institute 8402细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-39细胞、NCI-H378细胞、CAL-33细胞
P3X63 AG 8.653细胞系相关产品：C33细胞、P-2003细胞、PANC-10-05细胞
P815细胞系相关产品：SKMEL2细胞、NPA'87细胞、hFOB 1.19细胞
143BTK-细胞系相关产品：H9细胞、NCIH1770细胞、HCEC细胞
RPMI2650细胞系相关产品：H747细胞、HEC-1-A细胞、HS688AT细胞
LLC-PK(1)细胞系相关产品：Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞、mRTEC细胞、HLMVEC细胞
OCUM-1细胞系相关产品：MDA-MB-157细胞、NCI-H1666细胞、HEK (AD293)细胞
Hs 888Lu细胞系相关产品：Ramos 2G6 4C10细胞、KP2细胞、KYSE70细胞
LN-229细胞系相关产品：RGCs细胞、786-0细胞、hSCC-25细胞
Calu-1细胞系相关产品：KYSE-140细胞、BCAP37细胞、NCI-BL2141细胞
HG2855细胞系相关产品：P116细胞、H-735细胞、MLE-12细胞
"