WILL-2 Thawing人弥漫大B淋巴瘤细胞系

"WILL-2 Thawing人弥漫大B淋巴瘤细胞系
细胞背景资料：弥漫大B淋巴瘤；女性
细胞形态：淋巴母细胞样
WILL-2 Thawing人弥漫大B淋巴瘤细胞系
细胞生长：悬浮
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
WILL-2 Thawing人弥漫大B淋巴瘤细胞系
细胞生长特性：悬浮
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
细胞形态特性：详见细胞说明书
LED-WiDr细胞系相关产品：SVOG细胞、H1404细胞、ARO-81细胞
MV-4-11细胞系相关产品：OCILY-3细胞、SPC-A1细胞、UACC-893细胞
HCC-1599细胞系相关产品：B/C3T3细胞、HBEpiC细胞、Human ErythroLeukemia细胞
PC 61 5.3细胞系相关产品：NE1-E6E7细胞、ST2细胞、HT 1197细胞
C2BBe1细胞系相关产品：PC3-M细胞、GT39细胞、HPAF2细胞
NCI-H220细胞系相关产品：HEC-1A细胞、WM 239细胞、MUTZ1细胞
L02细胞系相关产品：NCI-H1651细胞、NCI-H1435细胞、B958细胞
LK-2细胞系相关产品：RAEC细胞、COLO 829细胞、A1847细胞
NCIH208细胞系相关产品：L6565细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞、M-G63细胞
TE3A细胞系相关产品：U266B1细胞、HOSEpiC细胞、A172细胞
NCI-SNU-182细胞系相关产品：HIC细胞、WEHI-231细胞、PNT1/A细胞
TK+/- (clone 3.7.2C)细胞系相关产品：NCI-H2106细胞、130 T细胞、PLC-8024细胞
Hep 2细胞系相关产品：RA细胞、HEK 293FT细胞、HOSEpiC细胞
KYSE 180细胞系相关产品：H2108细胞、OVCAR-8细胞、SBC-3细胞
MCF-7/ADR细胞系相关产品：CAL 62细胞、TE-32细胞、NCI-SNU-601细胞
NCI-H1238细胞系相关产品：NCI-H1668细胞、BRL 3A细胞、3T3细胞
HC11 Mammary Epithelium细胞系相关产品：F98细胞、H-1734细胞、4T1.2细胞
OSKM-1细胞系相关产品：CMEC/D3细胞、Hs 839.T细胞、CCD-841-CoTr细胞
KPL1细胞系相关产品：HS-940-T细胞、C2BBe1细胞、MV 3细胞
NCI-H1930细胞系相关产品：TCC Sup细胞、Hs695细胞、NCI-H1793细胞
T-ALL1细胞系相关产品：RS(4;11)细胞、HFE-145细胞、SKMel-5细胞
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High5细胞系相关产品：C2BBe 1细胞、Kit225 K6细胞、BrCL15细胞
RPMI 1846细胞系相关产品：AMC-HN8细胞、CMT64细胞、TE85细胞
HRIF细胞系相关产品：CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞
GM04679细胞系相关产品：HEK-2细胞、CO115细胞、SK-RC-42细胞
WILL-2 Thawing人弥漫大B淋巴瘤细胞系
293-GP细胞系相关产品：SHG 44细胞、SKES1细胞、Panc2.03细胞
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NUGC-3细胞系相关产品：H-735细胞、MOLT 16细胞、HTR-8/SV neo细胞
H747细胞系相关产品：SUD-4细胞、MDA MB 231细胞、SUM-52PE细胞
TK 10细胞系相关产品：MC-116细胞、AG06814-N细胞、CAL851细胞
MDAMB415细胞系相关产品：293F细胞、SCL-I细胞、MDA436细胞
GOS3细胞系相关产品：NCIH660细胞、H-28细胞、LAN-1细胞
JCA1细胞系相关产品：NCI-Hut 125细胞、Sp2/O细胞、H-64细胞
FHs74 Int细胞系相关产品：HRC-99细胞、Med 283细胞、LO2细胞
KYSE520细胞系相关产品：TE-85细胞、Lewis lung carcinoma细胞、LC-2 ad细胞
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H4-II-E细胞系相关产品：Hmy.2 CIR细胞、PANC 203细胞、624细胞
ECV 304细胞系相关产品：SK-MEL24细胞、NCI-H596细胞、THLE-2细胞
TYK-nu细胞系相关产品：SEG-1细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、HTSMC细胞
H295R-S1细胞系相关产品：AU565细胞、AN3-CA细胞、HEK-2细胞
PBMC细胞系相关产品：kms 11细胞、LLC-MK-2细胞、526-mel细胞
HT22细胞系相关产品：Ramos细胞、Kato-III细胞、MDA-MB453细胞
LSC-1细胞系相关产品：NCIH1703细胞、NIH 3T3细胞、CF-1 MEF细胞
NCI-H661细胞系相关产品：MDA-MB-231细胞、NCI H295R细胞、RetroPack PT67细胞
NTC200细胞系相关产品：SUPB15细胞、SK-ES细胞、P815细胞
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NCIH345细胞系相关产品：COLO 738细胞、MT4细胞、Jurkat clone A3细胞
NCI-SNU-520细胞系相关产品：SUM-159细胞、H-2029细胞、NCIH1770细胞
WILL-2 Thawing人弥漫大B淋巴瘤细胞系
HEB细胞系相关产品：KMS26细胞、H-847细胞、EB1细胞
266 Bl细胞系相关产品：GM03671C细胞、KM-H2细胞、SACC-83细胞
C8-D1A细胞系相关产品：MN9D细胞、CCRF CEM细胞、CSQT-2细胞
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L-363细胞系相关产品：H2342细胞、MCF-7细胞、SK ES 01细胞
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PE/CA-PJ-34细胞系相关产品：SK-OV-433细胞、SUM52细胞、S-16细胞
KP2细胞系相关产品：Hs832.Tc细胞、PAa细胞、NRCC细胞
H-1954细胞系相关产品：OV 1063细胞、ZR75_1细胞、C-Lu65细胞
NCI-H1435细胞系相关产品：Rat-1细胞、MHCC97L细胞、NCI-H1668细胞
TE7细胞系相关产品：NCI-H1417细胞、CPA 47细胞、UM-UC-14细胞
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