KMY1022 ThawingEB病毒转化的人B淋巴细胞系

"KMY1022 ThawingEB病毒转化的人B淋巴细胞系
细胞背景资料：B淋巴细胞；EBV转化
细胞形态：淋巴母细胞样
KMY1022 ThawingEB病毒转化的人B淋巴细胞系
细胞生长：悬浮
目前，跟公司签订长期战略合作伙伴的科研单位有山西中医学院、福建医科大学附属第二医院、上海市第六人民医院、北京大学医学部、同济大学、四平中心医院、广州中医药大学、中科院上海生命科学研究院生化与细胞研究所、解放军第３０６医院、江南大学、西南医院、吉首大学、西南大学化学化工学院、宁波大学、福建医科大学附属医院、苏州市同济医院、中南大学、延安大学附属医院、中国科学院上海药物研究所、天津市儿童医院、江苏省中医药研究院、湘雅医学院、第四军医大学预防系劳动与环境教研室、扬州大学、上海交通大学、中国医科大学、浙江省立同德医院、中国人民解放军第１５０中心医院、苏州大学、四川大学华西医院、云南大学、扬州大学兽医学院、上海交通大学医学院附属第九人民医院、海南医学院、江苏肿瘤医院、上海市闵行区中心医院、大连医科大学附属医院、中国科学院广州生物医药与健康研究院、沈阳药科大学、广州市第八人民医院、南京大学、浙江中医药大学、兰州大学、上海中医药大学、中国农业科学院饲料研究所、厦门市妇幼保健院、大学、南京军区总医院、天津市人民医院、北京医学科学肿瘤医院、上海市同济医院、江苏大学、桂林医学院附属医院、中国科学院化学研究所
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
KMY1022 ThawingEB病毒转化的人B淋巴细胞系
细胞生长特性：悬浮
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。
细胞形态特性：详见细胞说明书
NCIH522细胞系相关产品：Pa16C细胞、CAL 120细胞、OVCAR433细胞
H647细胞系相关产品：DMS-273细胞、FRhK4细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞
SKNDZ细胞系相关产品：751-NA-15细胞、HCC366细胞、PFSK-1细胞
GM03569B细胞系相关产品：NCI-H1819细胞、HCC1588细胞、MOLT 3细胞
M20 [Human melanoma]细胞系相关产品：WM115细胞、MeT5A细胞、SUM 159细胞
LS-411N细胞系相关产品：N-87细胞、H1648细胞、MESSA细胞
Human Melanoma Cell Bowes细胞系相关产品：Jeko1细胞、hEM15A细胞、Ca 9-22细胞
HSC1细胞系相关产品：PC 61 5.3细胞、HLMVEC细胞、HT1376细胞
ssMCF7细胞系相关产品：Mc Coy细胞、NCI-H2106细胞、BEL/FU细胞
CHL-CL-11细胞系相关产品：AE1201细胞、H-2228细胞、H125细胞
GP2-293细胞系相关产品：AM38细胞、COLO320-DM细胞、NCI-H1944细胞
MHH-CALL2细胞系相关产品：D-283MED细胞、W133细胞、BE(2)-C细胞
HBZY 1细胞系相关产品：HOS-MNNG细胞、HEK-293F细胞、REC1细胞
BEAS-2B细胞系相关产品：PA-1细胞、143TK-细胞、HCC0078细胞
DoTc2 4510细胞系相关产品：COLO201细胞、HEC1A细胞、HCCC-9810细胞
OP9细胞系相关产品：SNU354细胞、H865细胞、H-441细胞
SK-N-F1细胞系相关产品：Hs 274.T细胞、IM-95细胞、SW 1271细胞
HOS TE85细胞系相关产品：Clone M-3细胞、MDA-1386细胞、Pro-Lec1.3C细胞
CAKI1细胞系相关产品：Anip 973细胞、159 PT细胞、HTR8svn细胞
HT-29/CX-1细胞系相关产品：231-luc细胞、PC-3/M细胞、HL60细胞
NCIH208细胞系相关产品：L6565细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞、M-G63细胞
OCI/AML-4细胞系相关产品：IGR.OV1细胞、PTK 2细胞、COLO 16细胞
MESSA Dx5细胞系相关产品：PASMCS细胞、CCD19-Lu细胞、U251细胞
MCF-7/AdrR细胞系相关产品：RPMI no 8226细胞、NCIH28细胞、HBE135-E6E7细胞
NCI-H748细胞系相关产品：ARH 77细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞、COR-L26细胞
NCIN87细胞系相关产品：H1876细胞、NCIH841细胞、NCI-H2405细胞
KMY1022 ThawingEB病毒转化的人B淋巴细胞系
RPMI no 8226细胞系相关产品：NCIH82细胞、KYSE-450细胞、ARH77细胞
SJRH30细胞系相关产品：HMEL细胞、SKOV3细胞、WEHI 164 TC细胞
Panc 04.03细胞系相关产品：Mono-Mac-1细胞、T2(174 x CEM.T2)细胞、L428细胞
UO31细胞系相关产品：MHH-CALL-2细胞、MV-4:11细胞、293 HEK细胞
H35细胞系相关产品：OV 2008细胞、6T-CEM细胞、OVCAR8细胞
Vero细胞系相关产品：H3255细胞、A-375SM细胞、32D.3细胞
V-79-4细胞系相关产品：HBZY 1细胞、C3H/10T1/2 clone 8细胞、A204细胞
KLN 205细胞系相关产品：MDA-MB-175细胞、COLO357细胞、Hep3B细胞
OVCAR 8细胞系相关产品：CCRF-CEM/S细胞、Ball 1细胞、JIMT细胞
RPMI 8226/S细胞系相关产品：AC16 [Human hybrid]细胞、NCIH1650细胞、PANC-1细胞
BT 20细胞系相关产品：NCI-HUT-460细胞、NE-4C细胞、NCI-H2122细胞
TOV112细胞系相关产品：SKHEP-1细胞、DU145细胞、Hs683细胞
SNU-761细胞系相关产品：HM1900细胞、MES 13细胞、769P细胞
LA-N-6(OAN)细胞系相关产品：Mel RM细胞、MHCC97H细胞、NG 108-15细胞
EBC-1/original细胞系相关产品：Caki-2细胞、ACC-3细胞、AN-3细胞
HTSMC细胞系相关产品：LIM-1215细胞、Ej138细胞、HTori-3细胞
FLC7细胞系相关产品：GM00346B细胞、OVCAR8细胞、Nb2细胞
L-5178-Y细胞系相关产品：Clone 929细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、GM03569D细胞
H-2052细胞系相关产品：SUM149-PT细胞、SCL II细胞、Hs 863.T细胞
C-6细胞系相关产品：MRC9细胞、JIMT细胞、GM-637细胞
MRMT-1细胞系相关产品：HOEC细胞、SNU-638细胞、CORL88细胞
Mahlavu细胞系相关产品：Sp2/0-Ag14细胞、MB468细胞、HO-1-N-1细胞
KM12 SM细胞系相关产品：Madin Darby Bovine Kidney细胞、SCH细胞、GAK细胞
SW-527细胞系相关产品：293E细胞、Capan-1细胞、PASMCS细胞
KLM1细胞系相关产品：EU-4细胞、ESC-410细胞、NCIH2110细胞
Scott and White No. 13细胞系相关产品：NCI-H735细胞、MCF-7ADR细胞、NCIH740细胞
MRC-5细胞系相关产品：Huh7.5细胞、SW 780细胞、ST2细胞
HEC-251细胞系相关产品：GM17346细胞、SV40-MES13细胞、MDA-MB361细胞
Hs578Bst细胞系相关产品：RCC10 RGB细胞、A427细胞、EFM192C细胞
SEG-1细胞系相关产品：H-1522细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞、AR4-2J细胞
GA-10 (Clone 4)细胞系相关产品：JM细胞、CEM细胞、KMY1022细胞
Calu-3细胞系相关产品：H-378细胞、OP-9细胞、Hs 611.T细胞
NCIH187细胞系相关产品：J774.A1细胞、CMT.64细胞、HMEC1细胞
KMY1022 ThawingEB病毒转化的人B淋巴细胞系
CT26WT细胞系相关产品：RAW-264.7细胞、hRMECs细胞、P3JHR-1细胞
NCIH1781细胞系相关产品：Jijoye细胞、NRK52E细胞、Sarcoma OSteogenic-2细胞
Lu-65细胞系相关产品：LO2细胞、NCIH661细胞、MDAMB175细胞
MOPC细胞系相关产品：HS-294细胞、GM3570细胞、C57 Mouse Tumor 64细胞
H841细胞系相关产品：B16 F1细胞、MonoMac1细胞、TE-671细胞
IAR-20细胞系相关产品：LM1细胞、VA-ES-BJ细胞、BE(2)-M17细胞
Capan 2细胞系相关产品：CHO-K1细胞、NCI-H128细胞、ACC-3细胞
CEM T4细胞系相关产品：DHL5细胞、Douglas Foster-1细胞、NPA 87细胞
ACC3细胞系相关产品：SU.86细胞、Detroit562细胞、OC-316细胞
NCI-H2135细胞系相关产品：DV90细胞、TGBC11T细胞、ISHI细胞
DI TNC1细胞系相关产品：H-2172细胞、HREC细胞、ATDC5细胞
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