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HCE-T Thawing人角膜上皮细胞系

HCE-T Thawing
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2000000cells 起订
上海 更新日期:2024-10-01

上海宾穗生物科技有限公司

VIP5年
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产品详情:

中文名称:
HCE-T Thawing人角膜上皮细胞系
英文名称:
HCE-T Thawing
保存条件:
低温避光
纯度规格:
1x10(6)viable cells/ml
产品类别:
有机化学品
"HCE-T Thawing人角膜上皮细胞系
细胞背景资料:角膜上皮细胞;Ad-SV40转化;女性
细胞形态:上皮细胞样
HCE-T Thawing人角膜上皮细胞系
细胞生长:贴壁
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升高到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
冻存和复苏的原则:慢冻快融》当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序:采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时,1~2℃/min;当温度达-25℃以下时,5~10℃/min;当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。2.简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。3.传统程序:冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。细胞冻存方法:1.预先配制冻存液》(1)8%DMSO+细胞生长液(92%血清)2.取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×10(6)~5×10(6)细胞/ml)。3.加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法:1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCE-T Thawing人角膜上皮细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例);具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(你也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比。)这是第三步。4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。这是第四步。其实还可以有第五步,对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话,你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,没办法,你必须分多批多次消化,这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低,保证细胞的状态能够。当然了,如果细胞是属于那种很容易消化的细胞,像RAW264.7,仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较,去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步,除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外,还有一个更重要的作用就是,可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态,不成片不连体。
细胞形态特性:详见细胞说明书
OCI-Ly3细胞系相关产品:C8166细胞、WERI-Rb-1细胞、PLA801D细胞
Hs294细胞系相关产品:HIT细胞、COLO 201细胞、MDA-MB435细胞
H1436细胞系相关产品:Hep 2细胞、NRK clone 49F细胞、D6P2T细胞
HEK293EBNA细胞系相关产品:OACP4 C细胞、NCIH2110细胞、3AA细胞
Hep-G2/C3A细胞系相关产品:alpha TC1-6细胞、BJA-B-1细胞、aTC1-6细胞
Rabbit Kidney 13细胞系相关产品:NCIH1650细胞、A2780CP70细胞、SK-N-BE2C细胞
HCC366细胞系相关产品:L-363细胞、KYSE70细胞、GM00637H细胞
MAntle cell VERona-1细胞系相关产品:CORL88细胞、PASMCS细胞、Tu686细胞
R1610细胞系相关产品:H510细胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞、HUT 28细胞
TOV21G细胞系相关产品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PANC-1细胞、SNU398细胞
LIM 1215细胞系相关产品:U-87细胞、DF1细胞、H1573细胞
WILL-2细胞系相关产品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞、BMF细胞、NCIH2172细胞
Kasumi-1细胞系相关产品:NCIH1623细胞、HL-60 Clone 15细胞、NCI-H1155细胞
LC-1-sq细胞系相关产品:RH35细胞、P30OHK细胞、Panc_03_27细胞
PL11细胞系相关产品:BHK细胞、MDA-MB-175细胞、D341Med细胞
Lewis lung carcinoma line 1细胞系相关产品:MDA157细胞、A431/P细胞、MCF-7B细胞
NCIH460细胞系相关产品:Panc02-H0细胞、COLO-357细胞、NCIH292细胞
BNL-CL.2细胞系相关产品:NW-MEL-38细胞、HSF细胞、P31-FUJ细胞
NS1细胞系相关产品:H-889细胞、OVCAR-5细胞、AN3细胞
Y1细胞系相关产品:CaSki细胞、28SC细胞、LS-123细胞
V79-1细胞系相关产品:MM96L细胞、Capan1细胞、HEY-A8细胞
V79-1细胞系相关产品:MM96L细胞、Capan1细胞、HEY-A8细胞
OUMS23细胞系相关产品:LA795细胞、WEHI-164细胞、Panc 03.27细胞
MC3T3-E1 Subclone 4细胞系相关产品:RCF细胞、H184A1细胞、CAL 148细胞
NCI-H838细胞系相关产品:hTERT-RPE-1细胞、R1610细胞、Okayama University Medical School-23细胞
G361mel细胞系相关产品:VP 267细胞、HCC-202细胞、HPB/ALL细胞
HCE-T Thawing人角膜上皮细胞系
RWPE-1细胞系相关产品:NCI-H2073细胞、EFM192A细胞、TE3细胞
HMC3细胞系相关产品:LC-1Sq细胞、CG-4细胞、HConEpic细胞
Panc-08.13细胞系相关产品:C4-I细胞、Normal Rat, August 3, 1983细胞、MCF 7细胞
MONO-MAC 6细胞系相关产品:H-2135细胞、P30/OHK细胞、EOC 20细胞
H9c2(2-1)细胞系相关产品:MFE296细胞、PLCPRF5细胞、HCC0044细胞
SCCVII细胞系相关产品:U-373MG ATCC细胞、Vx-2细胞、SiHa细胞
Wien-133细胞系相关产品:NCI-322细胞、NL20细胞、NCIH2030细胞
SJRH-30细胞系相关产品:MC3T3-E1 Subclone 14细胞、746T细胞、SuDHL 4细胞
CD18细胞系相关产品:LUDLU 1细胞、MARC-145细胞、HCC0827细胞
Medical Research Council cell strain-9细胞系相关产品:NCIH441细胞、T24(ECV304)细胞、H4-II-E-C3细胞
RCC-JF细胞系相关产品:HUVEC-C[HUVEC]细胞、T47D细胞、EFM19细胞
H283细胞系相关产品:U266 Bl细胞、beta TC6细胞、Gerner 7666细胞
MDAMB435S细胞系相关产品:Caco-2/BBe 1细胞、TOV21细胞、NCI-SNU-520细胞
Hs 688(A).T细胞系相关产品:SCC25细胞、E.G7-OVA细胞、SK LU 1细胞
H-1993细胞系相关产品:Panc02细胞、Wistar Institute, Susan Hayflick细胞、293A细胞
HCC1171细胞系相关产品:Wistar Institute-38细胞、MiaPaCa-2细胞、DSL-6A/C1细胞
NCI-H28细胞系相关产品:Nittby-Salford 1细胞、L929(NCTC)细胞、H774细胞
NCIH1563细胞系相关产品:GM03570E细胞、COLO-738细胞、TOV112D细胞
MM96L细胞系相关产品:SF-767细胞、DoHH2细胞、IEC18细胞
BBE细胞系相关产品:Kupffer细胞、Y1细胞、HuCCT-1细胞
HepG2/C3A细胞系相关产品:SUM-102PT细胞、HUCCT1细胞、LS411细胞
SHI1细胞系相关产品:RAG细胞、U266 Bl细胞、LIM1215细胞
MGH-U3 (RN)细胞系相关产品:P3X63Ag8细胞、MCF-10 Attached细胞、BV-173细胞
SK-N-BE-2c细胞系相关产品:H-1915细胞、Human Foreskin Fibroblast细胞、ABC-1细胞
BE2C细胞系相关产品:H.Ep.-2细胞、DLD1细胞、LA4细胞
EC9706细胞系相关产品:EA hy 926细胞、COR-L 105细胞、McA-RH 8994细胞
SN12C-PM6细胞系相关产品:NBL-5细胞、SK-N-FI细胞、Strain KB细胞
MCF7细胞系相关产品:CHG5细胞、GES-1细胞、L132细胞
LA4细胞系相关产品:293/EBNA-1细胞、NS1细胞、T HEECs细胞
LC-1/sq细胞系相关产品:Panc 10.05细胞、Scott细胞、EC-GI细胞
HFT8810细胞系相关产品:MV 3细胞、Bac12F5细胞、CCD1095Sk细胞
D283-MED细胞系相关产品:MBVP细胞、CAL 78细胞、WM115-mel细胞
BLO-11细胞系相关产品:3T3-Swiss细胞、MCF 7B细胞、16HBE细胞
HCE-T Thawing人角膜上皮细胞系
KMB 17细胞系相关产品:MCF10A细胞、COV362细胞、SNU216细胞
PT-67细胞系相关产品:Sp 2/0-Ag 14细胞、C666-1细胞、NCI-SNU-620细胞
PT-67细胞系相关产品:Sp 2/0-Ag 14细胞、C666-1细胞、NCI-SNU-620细胞
SNK6细胞系相关产品:BJA-B1细胞、H69C细胞、CCC-HPF-1细胞
NCIH2029细胞系相关产品:16-HBE细胞、CFPAC1细胞、Transformed Human Liver Epithelial-3细胞
NH-6细胞系相关产品:SKNBE-2细胞、HS0578T细胞、SK-MES1细胞
RN-c细胞系相关产品:BSC-1细胞、X63细胞、NTERA-2细胞
3T6细胞系相关产品:L cells细胞、alpha TC1-6细胞、OV 1063细胞
CESS细胞系相关产品:EFM-19细胞、B16 melanoma细胞、CaSki细胞
Human Kidney-2细胞系相关产品:NCI-H1975细胞、B16-F10细胞、H-1876细胞
IHH4细胞系相关产品:NCTC929细胞、NCI-H1836细胞、VP267细胞
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公司简介

上海宾穗生物科技有限公司 是一家集研发、生产、销售与服务于一体的专业生物制品和化学品供应商。公司总部位于上海市莘庄工业区,拥有现代化办公大楼、标准实验室与生产厂房。上海宾穗生物科技有限公司拥有一支由教授和博士为核心的技术团队,提供超过100000的生物、化学产品,产品涵盖化学、医药、材料、能源、生物等科研领域。公司秉承“客户至上、服务一流”的发展理念,致力于将优质的产品和服务提供给客户。上海宾穗生物科技有限公司整合众多的优势市场资源,以匠心服务广大客户,我们可以为客户提供Binsui、TCI等国内外各种品牌的高品质试剂产品,充分满足客户的试剂需求。

成立日期 (7年)
注册资本 635万元人民币
员工人数 50-100人
年营业额 ¥ 500万-1000万
经营模式 试剂
主营行业 通用试剂,高纯试剂,催化试剂,基础无机试剂

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