"MARC-145 Thawing猴胚胎肾上皮细胞系
细胞背景资料：胚肾；自发永生
细胞形态：上皮细胞样
MARC-145 Thawing猴胚胎肾上皮细胞系
细胞生长：贴壁
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MARC-145 Thawing猴胚胎肾上皮细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞培养中支原体污染的经验分享：支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞，也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长，营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到６３%，支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达，又不能通过可视法对其进行检测，而且它对细胞的生长率影响较小，不易引起注意。国内外研究表明，９５%以上是以下四种支原体：口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)，为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群，但能够污染细胞的支原体种类是很多的，国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染;严格实验操作；细胞培养基和器材要保证无菌；在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁，一般来讲，对作用于细胞壁生物合成的抗生素，如万古霉素等完全不敏感；对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小抑制作用，所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。
细胞形态特性：详见细胞说明书
OCI Ly3细胞系相关产品：Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDAMB436细胞、CESS细胞
MDAPCa2b细胞系相关产品：TE3细胞、JM1细胞、Lieming Xu-2细胞
RAW 264.7细胞系相关产品：NCI-H2172细胞、MFM-223细胞、SK-GT-4细胞
HCC-827细胞系相关产品：MCF-7B细胞、NCI-H1341细胞、SW 527细胞
D10细胞系相关产品：HDLM2细胞、ACC-2细胞、AAV293细胞
Case 3细胞系相关产品：NCIH2106细胞、BGC823细胞、H1666细胞
TGBC11TKB细胞系相关产品：NCIH2085细胞、NCTC-3960细胞、OVCAR-433细胞
P3-X63-Ag8细胞系相关产品：Colo-678细胞、Sp2/mIL-6细胞、HEY A8细胞
CV-1 in Origin Simian-7细胞系相关产品：MCF-7/ADR细胞、U937细胞、Vero C1008细胞
Epstein-Barr-3细胞系相关产品：SHG44细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞、NEC-8细胞
C22细胞系相关产品：OVCAR 420细胞、Ca759细胞、NCIH1417细胞
KYSE-270细胞系相关产品：MCA 38细胞、NCI-H2108细胞、GM02132C细胞
SK-N-BE(2)-C细胞系相关产品：HOS (TE85)细胞、HCC 2185细胞、PL9细胞
H28细胞系相关产品：H1618细胞、HOK细胞、V79-GalK1细胞
RPMI1846细胞系相关产品：KYSE50细胞、WEHI3细胞、Panc5.04细胞
AE 1201细胞系相关产品：Ly10细胞、Caco2-BBE细胞、LK-2细胞
Sp2/0细胞系相关产品：H1623细胞、LS180细胞、NCIH187细胞
NCIH510细胞系相关产品：N-9细胞、HCT GEO细胞、SNU-886细胞
QGY-7701细胞系相关产品：CMT 93细胞、CAL 12T细胞、U20S细胞
LU165细胞系相关产品：WIL2-S细胞、hMSC-BM细胞、HCT 116细胞
Ly8细胞系相关产品：Vx-2细胞、LU451细胞、CWR22-Rv1细胞
Ly8细胞系相关产品：Vx-2细胞、LU451细胞、CWR22-Rv1细胞
NCI-H1836细胞系相关产品：GRSL细胞、WM 266-4细胞、Jurkat 77细胞
1E8-H细胞系相关产品：RPMI 7666细胞、RBSMC细胞、LNCaP细胞
F9细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、NCI-H2052细胞、A-1847细胞
253J-BV细胞系相关产品：VK2/E6E7细胞、RPE-1细胞、Michigan Cancer Foundation-7细胞
MARC-145 Thawing猴胚胎肾上皮细胞系
BT 325细胞系相关产品：BCaP-37细胞、KNS-62细胞、DU-4475细胞
BE2-M17细胞系相关产品：COLO680N细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞、SW1222细胞
Calu-6细胞系相关产品：GTL-16细胞、SW-13细胞、GM06141细胞
T9细胞系相关产品：PLA801D细胞、CWR22-R1细胞、NCIH250细胞
Hs 739.T细胞系相关产品：U138-MG细胞、HUVSMC细胞、OVCA 432细胞
NCI-H211细胞系相关产品：H22细胞、JG细胞、P3 (Jiyoye)细胞
Roswell Park Memorial Institute 8402细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-39细胞、NCI-H378细胞、CAL-33细胞
H-929细胞系相关产品：C3H/10T1/2 CL8细胞、ZR751细胞、NCI-H661细胞
RT-BM细胞系相关产品：DHL6细胞、H-740细胞、OKAC1细胞
CF Pac1细胞系相关产品：bEND.3细胞、32D-Cl3细胞、HCC-1588细胞
SuDHL 8细胞系相关产品：ACC-M细胞、Duck embryo细胞、SK-MEL-28细胞
NCIH64细胞系相关产品：Colo-201细胞、HL-1细胞、HOP62细胞
T98G细胞系相关产品：RS4:11细胞、130T细胞、NSI/1-Ag4-1细胞
HFT-8810细胞系相关产品：NCI-H1155细胞、TJ905细胞、Capan2细胞
H3255_DA细胞系相关产品：HCS2/8细胞、KPL-4细胞、OCI Ly3细胞
SF 767细胞系相关产品：TSUpr1细胞、ESC细胞、PE/CA-PJ-34细胞
NCIH2052细胞系相关产品：G361mel细胞、A10细胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞
NKM-1细胞系相关产品：ZYM-SVEC01细胞、SCL-1细胞、Roswell Park Memorial Institute 1788细胞
H1385细胞系相关产品：MM.1S细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、HeLa229细胞
OVCAR-433细胞系相关产品：MDA-MB-435 S细胞、BC3H1细胞、Hs578Bst细胞
MeT 5A细胞系相关产品：SW1783细胞、IPI-2I细胞、Panc 02.03细胞
2BS细胞系相关产品：alphaTC1 Clone 6细胞、NCI-H2030细胞、H69细胞
SJRH-30细胞系相关产品：MC3T3-E1 Subclone 14细胞、746T细胞、SuDHL 4细胞
HBdSMC细胞系相关产品：SUM 52细胞、IHH细胞、H526细胞
PBL细胞系相关产品：H35细胞、RAW 264.7细胞、MA-782细胞
LNCaP clone FGC细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-51细胞、H2330细胞、JKT-1细胞
MHCC-LM3细胞系相关产品：C-28I2细胞、JROECL19细胞、Hs934T细胞
HS0578T细胞系相关产品：L cells (TK-)细胞、TK 10细胞、MGc80-3细胞
HCC 94细胞系相关产品：624mel细胞、SK-MEL 28细胞、hTERT RPE-1细胞
TMK1细胞系相关产品：HMEC细胞、NCIH1819细胞、RSC-96细胞
CAL62细胞系相关产品：H-2405细胞、NCI-H-82细胞、AgC11x3A细胞
LS174T细胞系相关产品：Rat Lung-65细胞、Ra #1细胞、P3/X63/Ag8细胞
MGECs细胞系相关产品：SKBR-3细胞、Hs 611.T细胞、QBC(939)细胞
MARC-145 Thawing猴胚胎肾上皮细胞系
CEM/C1细胞系相关产品：H-2106细胞、DH-82细胞、NK-92.05细胞
KU 812F细胞系相关产品：RPMI-8226S细胞、MRC-9细胞、HCC1171细胞
OCI-Ly1细胞系相关产品：THPI细胞、Mahlavu细胞、HCC1500细胞
CEK细胞系相关产品：BEAS 2B细胞、HS 445T细胞、Calu-1细胞
KYSE0520细胞系相关产品：Caki-1细胞、RM-1细胞、S16细胞
CHP 100细胞系相关产品：PANC3.27细胞、RWPE-1细胞、Hs-611-T细胞
SCC7细胞系相关产品：Douglas Foster-1细胞、ASH3细胞、Balb/3T3-4-Cl31细胞
L-6细胞系相关产品：L02细胞、ATN-1细胞、HOS-143B细胞
Embryonic Bovine Tracheal cells细胞系相关产品：NCM460细胞、HNE2细胞、DMS 153细胞
MPASMC细胞系相关产品：Panc_03_27细胞、H-1672细胞、T-HSC细胞
SRA01/04细胞系相关产品：SUM-149PT细胞、MAEC细胞、Colo-201细胞
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