"SSP-25 Thawing人肝胆管癌细胞系
细胞背景资料：肝内胆管癌；女性
细胞形态：上皮细胞样
SSP-25 Thawing人肝胆管癌细胞系
细胞生长：贴壁
细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SSP-25 Thawing人肝胆管癌细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞传代的一般方法：开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-０.２%LH培养液或MEM培养液或１９９等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（１万单位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、胶塞、吸管(１０ml、１m１）、细胞吹打管（２０ml）(以上用具需经１２１℃至少１５分钟高压灭菌)、C０２ 孵箱、超净台、倒置显微镜、４℃、-２０℃冰箱；操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培养液１００ml内，加入灭活小牛血清１０m１，庆大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸钠溶液３ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS洗液冲洗细胞表面１-２次，每次１０m１，弃去洗液，向细胞瓶内加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入１０m１细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于３７±１℃孵箱培养。约２～４天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。
细胞形态特性：详见细胞说明书
LAC细胞系相关产品：SGC 7901细胞、CFSC-8B细胞、Panc 5.04细胞
GM07404A细胞系相关产品：SNU407细胞、HTori-3细胞、CTLL(2)细胞
HCC78细胞系相关产品：SK-N-SH细胞、SK-MEL2细胞、SW-837细胞
T24细胞系相关产品：KCL22S细胞、GA-10细胞、UCLA-RO 81细胞
Nthy ori 3.1细胞系相关产品：SKOV-3细胞、CAMA1细胞、RDES细胞
HN 4细胞系相关产品：NTERA2细胞、EFM-192A细胞、NCI-H1915细胞
Rat Chondrosarcoma Swarm细胞系相关产品：HL1细胞、HEK-293A细胞、MES 23.5细胞
A2780CP70细胞系相关产品：P3 NS1 Ag4/1细胞、THLE2细胞、B16 melanoma细胞
LTEP-a2细胞系相关产品：S37细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞、WRL68细胞
U20S细胞系相关产品：GP-293细胞、HNE-1细胞、GA-10(Clone 4)细胞
MUTZ3细胞系相关产品：Vero-76细胞、HCC202细胞、HUCCT1细胞
RBL细胞系相关产品：MMAc.SF细胞、NK92MI细胞、H747细胞
KYSE-180细胞系相关产品：SUM190细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、SKNBE(1)细胞
A101D细胞系相关产品：SNU-C2B细胞、NCI-A549细胞、B6Tert-1细胞
NCI-SNU-119细胞系相关产品：NRK clone 49F细胞、TE6细胞、OCI AML4细胞
NOZ细胞系相关产品：H196细胞、RCC10RGB细胞、AMO-1细胞
PANC 203细胞系相关产品：TE4细胞、WEHI-3细胞、L-WRN细胞
HTori:3细胞系相关产品：KBM-7/Hap8细胞、H4-II-E细胞、SCC7细胞
SW 1222细胞系相关产品：H-2029细胞、T. T细胞、CAL 51细胞
GM04678细胞系相关产品：P388细胞、L cells (TK-)细胞、GCT细胞
GM03571细胞系相关产品：Fetal Rhesus Kidney-4细胞、HCC-1395细胞、SU86.86细胞
GM03571细胞系相关产品：Fetal Rhesus Kidney-4细胞、HCC-1395细胞、SU86.86细胞
751-NA细胞系相关产品：EFO27细胞、HeLa.S3细胞、138MG细胞
H676B细胞系相关产品：CEM T4细胞、AN3细胞、ROS1728细胞
BT325细胞系相关产品：QGY细胞、J82细胞、HuH7细胞
Roswell Park Memorial Institute 7666细胞系相关产品：G-Olig2细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、Wistar Institute-38细胞
SSP-25 Thawing人肝胆管癌细胞系
H1048细胞系相关产品：IGROV1细胞、HT55细胞、NL20细胞
SCL II细胞系相关产品：IBRS-2细胞、HO-8910细胞、J774.A1细胞
WERI细胞系相关产品：OV3121细胞、AHH1细胞、HAC-84细胞
Fetal Human Lens-124细胞系相关产品：bEnd.3[BEND3]细胞、A375-S2细胞、A-431细胞
KU 812细胞系相关产品：A9 (Hamprecht)细胞、SK-MEL-28细胞、SKUT-1细胞
Strain V细胞系相关产品：NeHepLxHT细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞、SUDHL6细胞
GTL 16细胞系相关产品：FO [Mouse myeloma]细胞、UPCISCC154细胞、MDAMB436细胞
MES 13细胞系相关产品：MCA38细胞、HLEB-3细胞、SUM 149PT细胞
RBL2H3细胞系相关产品：b.End3细胞、NCTC 929细胞、NCI-SNU-449细胞
IEC6细胞系相关产品：HEK 293-EBNA细胞、COR-L23细胞、ME-180细胞
AK细胞系相关产品：Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞、HGMC细胞、TE-13细胞
NCI-H1436细胞系相关产品：LNCaP FGC细胞、V79细胞、H2087细胞
BALB 3T3 clone A31细胞系相关产品：MG-63细胞、PL45细胞、TM-3细胞
DH82细胞系相关产品：IM-95细胞、J774 A1细胞、NCIH1793细胞
NCl-H157细胞系相关产品：BC-027细胞、HITT15细胞、MDA-134细胞
AU-565细胞系相关产品：LCLC-103H细胞、Clone 166细胞、Panc04.03细胞
AD-293细胞系相关产品：C4-2 Bone metastatic细胞、KYSE 150
