"Ej138 Thawing人膀胱癌细胞系
细胞背景资料：膀胱癌；女性
细胞形态：上皮细胞样
Ej138 Thawing人膀胱癌细胞系
细胞生长：贴壁
常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或高过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存好了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至７０%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：５-１０% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；５-１５%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在５０%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长２４小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过１.５ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做好记录是非常非常重要的！还有一个最重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做好防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Ej138 Thawing人膀胱癌细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞培养中支原体污染的经验分享：支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞，也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长，营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到６３%，支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达，又不能通过可视法对其进行检测，而且它对细胞的生长率影响较小，不易引起注意。国内外研究表明，９５%以上是以下四种支原体：口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)，为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群，但能够污染细胞的支原体种类是很多的，国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染;严格实验操作；细胞培养基和器材要保证无菌；在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁，一般来讲，对作用于细胞壁生物合成的抗生素，如万古霉素等完全不敏感；对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小抑制作用，所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。
细胞形态特性：详见细胞说明书
639 V细胞系相关产品：CD18细胞、V-79-4细胞、FCCH1024细胞
MOVAS-1细胞系相关产品：Human Liver-7702细胞、NCI-H460细胞、WM266细胞
ZR751细胞系相关产品：PK (15)细胞、DI TNC1细胞、CHP-212细胞
TE353.SK细胞系相关产品：Calu-3细胞、P3/NSI/1-AG4-1细胞、BC-021细胞
639-V细胞系相关产品：PA-TU-8988S细胞、CAL27细胞、NCI-H1435细胞
MARC-145细胞系相关产品：MC-26细胞、HUVEC细胞、HOMEC细胞
MOLT-16细胞系相关产品：T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、HT 144细胞、NCIH1437细胞
H2023细胞系相关产品：SUPT-1细胞、Hmy.2 CIR细胞、H1651细胞
OV3121细胞系相关产品：BCP-1细胞、NCI-BL1339细胞、Hs294细胞
AR4IP细胞系相关产品：D341 Med细胞、IEC 6细胞、SUDHL-16细胞
NCI-H2291细胞系相关产品：NCI-H1299细胞、OCI-LY-19细胞、H1435细胞
PLA-802细胞系相关产品：BC-025细胞、H1930细胞、SK-ChA1细胞
HRPEpiC细胞系相关产品：HDQ-P1细胞、RSC-364细胞、QBI-HEK 293A细胞
H-1623细胞系相关产品：HOP-92细胞、Caki-2细胞、MFM-223细胞
Madin-Darby Canine Kidney细胞系相关产品：U-251细胞、CCD19-Lu细胞、Rat-2细胞
HCa/16A3-F细胞系相关产品：SHEP1细胞、NT2细胞、JURKAT E-6.1细胞
SK-RC-20细胞系相关产品：CT 26细胞、L 1210细胞、TE 32.T细胞
PC 61 5.3细胞系相关产品：NE1-E6E7细胞、ST2细胞、HT 1197细胞
TE671/RD细胞系相关产品：WB-F344细胞、NCIH345细胞、SNU739细胞
AML12细胞系相关产品：MC-3T3-E1细胞、PIG3细胞、Panc-08.13细胞
MDA-435细胞系相关产品：GA-10 (Clone 4)细胞、SK-RC-20细胞、F-36P细胞
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PK-136细胞系相关产品：NCI-H1876细胞、NCI-H295细胞、DHL-8细胞
CHP-126细胞系相关产品：OKT 3细胞、CCC-HIE-2细胞、HOC1细胞
GT39细胞系相关产品：NCI.H460细胞、RPMI8226细胞、HCC1588细胞
LO2细胞系相关产品：IOSE 29细胞、NR 8383细胞、Hs 695T细胞
Ej138 Thawing人膀胱癌细胞系
NIH3T3-L1细胞系相关产品：KE 37细胞、Hs294细胞、HCC38细胞
Nb2a细胞系相关产品：CEM clone 7细胞、PIGI细胞、Kato-III细胞
CL11细胞系相关产品：HuH6细胞、P3-X63.Ag8.653细胞、HL7702细胞
HEC251细胞系相关产品：CL1-0细胞、IHH4细胞、MDA453细胞
NIH-3T3-L1细胞系相关产品：Sup T-1细胞、B4G12细胞、RM1细胞
Sp2/0细胞系相关产品：H1623细胞、LS180细胞、NCIH187细胞
MB49细胞系相关产品：HOC细胞、SF-763细胞、Mhh-Call 2细胞
SW1417细胞系相关产品：B-16细胞、Kuramochi细胞、L细胞
P815细胞系相关产品：SKMEL2细胞、NPA'87细胞、hFOB 1.19细胞
H125细胞系相关产品：MOLM16细胞、LLC-WRC 256细胞、RPPVEC细胞
NCI-H1623细胞系相关产品：COLO 320HSR细胞、HHUA细胞、ST486细胞
OEC33细胞系相关产品：ZR-75-1细胞、HPF细胞、Wien133细胞
Tb 1 Lu细胞系相关产品：MCF.10A细胞、BEL 7402细胞、NHRF细胞
NCTC-1469细胞系相关产品：COLO-357细胞、Jeko1细胞、FRhK4细胞
H1092细胞系相关产品：MM134细胞、C166细胞、MCF/Adr细胞
WSU-DLCL2细胞系相关产品：RL-95-2细胞、MIO-M1细胞、CEM/C1细胞
Laboratory of Allergic Diseases 2细胞系相关产品：SU-DHL-1细胞、Hep 3B2_1-7细胞、GM-215细胞
KM933细胞系相关产品：Psi-2 DAP细胞、SK-Mel1细胞、BT549细胞
CPA 47细胞系相关产品：HCC1954-BL细胞、CEM T4细胞、FHL-124细胞
HNSC细胞系相关产品：HCASMC细胞、MDAMB435S细胞、HEL细胞
SK-CO-1细胞系相关产品：H-1734细胞、NCI-H1437细胞、CV 1细胞
CCC-HIE-2细胞系相关产品：HEK293EBNA细胞、293 H细胞、Gejiu Lung Carcinoma-82细胞
MUM2B细胞系相关产品：EL4细胞、H-187细胞、KP-N-RT-BM-1细胞
B958细胞系相关产品：J774A.1细胞、C4-2 Bone metastatic细胞、NCI-H2195细胞
LS 174T细胞系相关产品：HS 445T细胞、P3-NS1/1-Ag4-1细胞、L 540细胞
AML193细胞系相关产品：NCIH146细胞、MOLP2细胞、GM01232E细胞
NCI-H1573细胞系相关产品：CCD19-Lu细胞、CNE1-LUC细胞、Scott细胞
SKMEL-2细胞系相关产品：M-20细胞、GC-2spd(ts)细胞、BAC1.2F5细胞
FDCP1细胞系相关产品：RT4P细胞、CCRF/CEM细胞、COR-L23细胞
CWR22R细胞系相关产品：EAhy926细胞、A72细胞、SK_N_BE2C细胞
WERI-Rb-1细胞系相关产品：HDLM-2细胞、RT112细胞、UM-UC-1细胞
H-661细胞系相关产品：PCI-4M细胞、MKN7细胞、HCC1359细胞
HPAF-II细胞系相关产品：Reh细胞、DMS114细胞、A375-SM细胞
Ej138 Thawing人膀胱癌细胞系
3T3-Swiss细胞系相关产品：SK Mel 24细胞、LIPF155C细胞、DMS-79细胞
MOLM16细胞系相关产品：16-HBE14o细胞、CEM-CCRF细胞、HSF细胞
SK-SH-SY5Y细胞系相关产品：QGY-7701细胞、SKO007细胞、RS4;11细胞
EC-109细胞系相关产品：HRIF细胞、P3-X63Ag8.653细胞、SUDHL-1细胞
HGE细胞系相关产品：Hs343T细胞、ECGI10细胞、A-2058细胞
SL1细胞系相关产品：Cates-1B细胞、NCI-H2347细胞、TFK1细胞
HARA-B细胞系相关产品：HUCCT1细胞、MARC145细胞、DR2R1610细胞
M-1 myeloid leukemia细胞系相关产品：NCI H69细胞、H69/P细胞、RAT2细胞
UCH1细胞系相关产品：HBZY1细胞、H-650细胞、P3J HR1-K细胞
TSUpr1细胞系相关产品：SNU761细胞、UCLA NPA871细胞、KG1细胞
EVSA/T细胞系相关产品：OCI/AML-5细胞、NCI-H196细胞、A9细胞
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