"FRTL-5 Thawing大鼠甲状腺细胞系
细胞背景资料：甲状腺；自发永生；Fischer
细胞形态：上皮细胞样
FRTL-5 Thawing大鼠甲状腺细胞系
细胞生长：贴壁
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
FRTL-5 Thawing大鼠甲状腺细胞系
细胞生长特性：贴壁
冷冻细胞解冻程序：依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例，制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类，若因实验需要，必须有所不同时，务必以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行所需之实验。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,马血清)，对细胞而言差异极大，请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于３７°C水槽中回温，回温后喷以７０%酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。取出冷冻管，立即放入３７°C水槽中快速解冻，水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿，否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在１分钟内全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷冻管外部，移入无菌操作台内。依据细胞种类和浓度，于无菌操作台内取１０ml培养基加至T２５或T７５flask中。取出已解冻之细胞悬浮液，缓缓加入T２５或T７５flask内之培养基，混合均匀，放入３７°C，５%CO２培养箱培养。对绝大多数细胞而言，１%以下之冷冻保护剂DMSO，不会对细胞之贴附或活化有不良影响，不需立刻由解冻细胞中去除，待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO敏感或会造成细胞分化之细胞，需立即去除DMSO者，则可将解冻后之细胞悬浮液放入５-１０ml培养基中，离心３００xg(约１０００rpm)，５分钟，小心移去上清液，加入适量新鲜培养基，将细胞均匀混合后，转移至培养瓶中，再放入３７°C，５%CO２培养箱培养。
细胞形态特性：详见细胞说明书
HMO6细胞系相关产品：NG 108-15细胞、CNE2Z细胞、H-378细胞
SK-NM-C细胞系相关产品：HUVSMC细胞、WM 2664细胞、SO-Rb 50细胞
MDA231-LM2-4175细胞系相关产品：CSQT-2细胞、Leukemia L1210细胞、HCT-FET细胞
DMS-53细胞系相关产品：HPDEC细胞、Hs 695.T细胞、HL-7702细胞
SNU-475细胞系相关产品：SuDHL 10细胞、TF-1a细胞、SuDHL 10细胞
SK-N-BE2C细胞系相关产品：MDA-MB468细胞、TE 32.T细胞、OVCAR-432细胞
HT115细胞系相关产品：OCI-AML-5细胞、SNU5细胞、SKMEL3细胞
SN12C细胞系相关产品：H727细胞、D283-MED细胞、TJ905细胞
EM3细胞系相关产品：WISH细胞、BRL3A细胞、Mino细胞
KBM-7/Hap8细胞系相关产品：HEP3B2细胞、GCT0404细胞、4T1-A细胞
NIH/3T3细胞系相关产品：MDAPC2B细胞、MDA-MB 468细胞、MX-1细胞
Institute for Medical Research-90细胞系相关产品：CACO2细胞、NCIH2009细胞、NCI-H322T细胞
ZR7530细胞系相关产品：Caco2-BBE细胞、293-F细胞、H-1092细胞
Rat Chondrosarcoma Swarm细胞系相关产品：HL1细胞、HEK-293A细胞、MES 23.5细胞
RT-4细胞系相关产品：CCRFCEM细胞、RPMI 2650细胞、GM03569细胞
ZR75-30细胞系相关产品：NCI-H1522细胞、H1573细胞、KMH2细胞
NEC-8细胞系相关产品：TE-10细胞、Panc2_03细胞、KTA7细胞
MV-1-Lu细胞系相关产品：BIU-87/Adr细胞、NOZC-1细胞、T 98 G细胞
CRFK细胞系相关产品：TCC-PAN2细胞、JVM3细胞、NCI.H522细胞
4-1st细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞、HL 60细胞、NCI H548细胞
CMECs细胞系相关产品：H-1573细胞、JHH2细胞、mREC细胞
CMECs细胞系相关产品：H-1573细胞、JHH2细胞、mREC细胞
H1238细胞系相关产品：Dysplastic Oral Keratinocyte细胞、PC-3M-IE8细胞、A549-Taxol细胞
E.G7-OVA细胞系相关产品：EOC20细胞、CAKI 1细胞、AD-293细胞
MDA2B细胞系相关产品：WC00079细胞、LC1/Sq细胞、NCTC clone 1469细胞
MCFs细胞系相关产品：HEK (AD293)细胞、PG-4 S+L-细胞、Ramos.G6.C10细胞
FRTL-5 Thawing大鼠甲状腺细胞系
WM266mel细胞系相关产品：Hepatoma-22细胞、HEK-293细胞、CEMC1细胞
WTRL1细胞系相关产品：AAV-293细胞、H-920细胞、DanG细胞
SW-1990细胞系相关产品：H-2342细胞、NB19-RIKEN细胞、SKNEP细胞
HuT-78细胞系相关产品：LLC-PK1细胞、University of Arizona Cell Culture-812细胞、LS-513细胞
CF-1 MEF细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-62细胞、RM1细胞、NCI-H-82细胞
SUM149细胞系相关产品：KBM7细胞、PA317细胞、SP-2/0-AG14细胞
EM3细胞系相关产品：WISH细胞、BRL3A细胞、Mino细胞
CAL 62细胞系相关产品：NTC200细胞、TB1 Lu细胞、SP2-0-Ag14细胞
MonoMac1细胞系相关产品：HSC-3细胞、95C细胞、C38细胞
RAG细胞系相关产品：HFTF细胞、OSRC2细胞、CD18细胞
IBRS-2细胞系相关产品：Lewis Lung Cancer细胞、OV2008细胞、NCIH1092细胞
SW260细胞系相关产品：OVCAR-10细胞、PLMVEC细胞、PG-4(S+L-)细胞
NCI-H661细胞系相关产品：MDA-MB-231细胞、NCI H295R细胞、RetroPack PT67细胞
AMO-1细胞系相关产品：Th17细胞、SSP-25细胞、VP303细胞
G361-mel细胞系相关产品：KBM-5细胞、TK-1细胞、REC 1细胞
MM1.S细胞系相关产品：TKB1细胞、LM8细胞、V-79细胞
A9(Hamprecht)细胞系相关产品：SCC-15细胞、HCC-1359细胞、PC-14细胞
SW 1417细胞系相关产品：OB2细胞、SKMEL1细胞、U-2 OS细胞
NCI/ADR-RES细胞系相关产品：FM-88细胞、DC 2.4细胞、L-cell细胞
NCI-H1522细胞系相关产品：H441细胞、GM03671细胞、SK-HEP-1细胞
GM04680细胞系相关产品：PL11细胞、KYSE270细胞、WSU-HN13细胞
NCIH841细胞系相关产品：C33-A细胞、HARAB细胞、NCI-SNU-761细胞
H2141细胞系相关产品：Reuber H-35细胞、LP-1细胞、NCI-Hut 125细胞
G 292 Clone A 141B1细胞系相关产品：T-HEECs细胞、COV504细胞、X63-AG 8.653细胞
FL83B细胞系相关产品：H847细胞、SW 837细胞、WM266-4细胞
J774细胞系相关产品：LuCL4细胞、SKM1细胞、H-2066细胞
NSH细胞系相关产品：THC-8307细胞、LA-N-6细胞、HEK 293 EBNA细胞
BT细胞系相关产品：OCI-Ly 19细胞、SHP-77细胞、SCC25细胞
JG细胞系相关产品：SCC9细胞、High5细胞、MFE-296细胞
NCI-H1563细胞系相关产品：HO-8910PM细胞、U87MG细胞、FHCRC-11细胞
Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞系相关产品：NCIH2107细胞、NCI-H1581细胞、NFS-60细胞
UPCI:SCC090细胞系相关产品：alpha-TC1.6细胞、HP615细胞、EFM-19细胞
HR-8348细胞系相关产品：MV(4;11)细胞、NCI-H441细胞、PLC/PRF5细胞
FRTL-5 Thawing大鼠甲状腺细胞系
624mel细胞系相关产品：COLO206细胞、K-562细胞、HUT-28细胞
SUDHL-6细胞系相关产品：MCF-10 Attached细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、RGC-5细胞
H-847细胞系相关产品：Li-7细胞、ATDC-5细胞、CMECs细胞
BNL 1ME A.7R.1细胞系相关产品：HCC2218细胞、SW 1573细胞、COLO 684细胞
MUTZ-3细胞系相关产品：H1915细胞、NCIH1734细胞、DV-90细胞
NCI-SNU-761细胞系相关产品：293细胞、KM12细胞、SNU-182细胞
P3.653细胞系相关产品：Ect1/E6E7细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞、H446细胞
LIPF155C细胞系相关产品：DMS-114细胞、MonoMac6细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞
IPLB-Sf21AE细胞系相关产品：NCI-H378细胞、NCI-SNU-520细胞、hFOB细胞
Farage Original Line细胞系相关产品：IOSE-Van细胞、HO1N1细胞、HEL 299细胞
G-361细胞系相关产品：U-118MG细胞、U-87MG细胞、HCMEC细胞
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