"RM-1 Thawing小鼠前列腺癌细胞系
细胞背景资料：前列腺癌；C５７BL/６
细胞形态：上皮细胞样
RM-1 Thawing小鼠前列腺癌细胞系
细胞生长：贴壁
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
RM-1 Thawing小鼠前列腺癌细胞系
细胞生长特性：贴壁
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞形态特性：详见细胞说明书
PanC1细胞系相关产品：TB1 Lu细胞、OLN-93细胞、M-20细胞
AC29细胞系相关产品：HEC-1-B细胞、H8细胞、GM3190细胞
PL-5细胞系相关产品：CCRF-CEM细胞、UACC-893细胞、NTera2 cl.D1细胞
MIN6细胞系相关产品：NCIH1568细胞、10RGB细胞、LS 123细胞
CNE-2细胞系相关产品：HCT15细胞、RMC-1细胞、MDA-330细胞
LN382细胞系相关产品：526mel细胞、PL5细胞、GC1-SPG细胞
GC9811-P细胞系相关产品：Anip973细胞、HNE-3细胞、BE2_C细胞
MC116细胞系相关产品：Hs839.T细胞、SCaBER细胞、IHHA-1细胞
huH 1细胞系相关产品：Lewis lung carcinoma细胞、D283 Med细胞、343MG细胞
NB1-RGB细胞系相关产品：D10.G4.1细胞、SW 1116细胞、C-4 I细胞
IPLB-Sf21AE细胞系相关产品：NCI-H378细胞、NCI-SNU-520细胞、hFOB细胞
NCIN87细胞系相关产品：H1876细胞、NCIH841细胞、NCI-H2405细胞
SUM102细胞系相关产品：CPAE细胞、GS9L细胞、H2.35细胞
OVCAR-8细胞系相关产品：578T细胞、Epstein-Barr-1细胞、BJA-B1细胞
L 363细胞系相关产品：WEHI 3B细胞、P-388D1细胞、BHK21细胞
COLO 824细胞系相关产品：KY-270细胞、PK 15细胞、H2085细胞
B16F1细胞系相关产品：870细胞、IPLB-Sf21细胞、BALB/3T3 cl. A31细胞
HN4细胞系相关产品：LA4细胞、MDA361细胞、H-1618细胞
SNU-368细胞系相关产品：AML12细胞、MS 751细胞、5-8F细胞
MN9D细胞系相关产品：U251n细胞、Vero from pool #76细胞、HAPI细胞
OCILY7细胞系相关产品：SNU-520细胞、PT-67细胞、Hs839T细胞
SW 900细胞系相关产品：H295R-S1细胞、H1563细胞、Tb1.Lu细胞
NCTC clone 929细胞系相关产品：MDAMB157细胞、SU-DHL-1细胞、CCD19Lu细胞
C2A细胞系相关产品：HaCaT细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞、Hs445细胞
HeLa细胞系相关产品：Panc2_03细胞、SK-N-SH细胞、PC-9S1细胞
ME16C细胞系相关产品：NCI-H250细胞、Hs-611-T细胞、3T3J2细胞
RM-1 Thawing小鼠前列腺癌细胞系
EAhy 926细胞系相关产品：SU86_86细胞、SK-MES-1细胞、huH 1细胞
Hi-5细胞系相关产品：HCC1438细胞、SNU-C2A细胞、As-PC1细胞
NIH:OVCAR-10细胞系相关产品：RPTEC TERT1细胞、HONE-1细胞、MDA MB 175 VII细胞
NCIH460细胞系相关产品：Panc02-H0细胞、COLO-357细胞、NCIH292细胞
IFRS1细胞系相关产品：SNU-423细胞、GM06141细胞、TE13细胞
SKCol1细胞系相关产品：AtT 20细胞、NCIH250细胞、OVCAR-8/ADR细胞
RTMC细胞系相关产品：PL 45细胞、J-111细胞、KMH-2细胞
EoL-1-cell细胞系相关产品：BRL细胞、H-1048细胞、SPCA-1细胞
KMS18细胞系相关产品：NS20-Y细胞、UCLA NPA-87-1细胞、JHH-7细胞
U-266 AR1细胞系相关产品：DI TNC1细胞、SU86.86细胞、H1819细胞
AU-Mel细胞系相关产品：RKO-AS45-1细胞、B 95-8细胞、NCI-157细胞
HUT 125细胞系相关产品：LTEP a2细胞、TPC1细胞、SW260细胞
DI-TNC1细胞系相关产品：SN12CPM6细胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞、hEM15A细胞
PANC 813细胞系相关产品：HCT GEO细胞、MESSADX5细胞、PM6细胞
P30/Ohkubo细胞系相关产品：OVCAR 433细胞、SUM 149细胞、CEM T4细胞
IMR32细胞系相关产品：Tu686细胞、TE8细胞、266 Bl细胞
NCI-H865细胞系相关产品：SU-DHL-6细胞、AZ-521细胞、SU-DHL-2细胞
HOS-143B细胞系相关产品：DSL6A/C1细胞、SK_N_FI细胞、RCCJF细胞
Roswell Park Memorial Institute 7666细胞系相关产品：G-Olig2细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、Wistar Institute-38细胞
T47D细胞系相关产品：AR-42J细胞、Hs895T细胞、Hs888T细胞
SNU-C2B细胞系相关产品：MDA-MB-435细胞、H-82细胞、HuLEC-5a细胞
HCC-1143细胞系相关产品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞、VMCUB-1细胞、M-07e细胞
3AO细胞系相关产品：TH1细胞、H711细胞、RN细胞
CAL-33细胞系相关产品：COLO 678细胞、WM451细胞、hTERT-HPNE细胞
A-101D细胞系相关产品：OCI/AML-3细胞、FRTL-5 Cl 2细胞、TE-15细胞
H-1838细胞系相关产品：SVG p12细胞、H1734细胞、WM-239A细胞
HEMCSS细胞系相关产品：STTG1细胞、SKCO 1细胞、RL95细胞
KMB 17细胞系相关产品：MCF10A细胞、COV362细胞、SNU216细胞
KP2细胞系相关产品：Hs832.Tc细胞、PAa细胞、NRCC细胞
OSK-1细胞系相关产品：REC-1细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞、A-549细胞
Huh7.5细胞系相关产品：Hs819.T细胞、L-WRN细胞、Mono Mac6细胞
ECV-304细胞系相关产品：National Medical Center-Glioma 1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞、SDBMSC细胞
Capan-1细胞系相关产品：COLO-1细胞、SNU-520细胞、RPMI1846细胞
RM-1 Thawing小鼠前列腺癌细胞系
FL83B细胞系相关产品：H847细胞、SW 837细胞、WM266-4细胞
SF763细胞系相关产品：H510A细胞、MONO-MAC 6细胞、PBMC细胞
JHH-7细胞系相关产品：GM03671细胞、Hs_578t细胞、HBE 135-E6E7细胞
H2108细胞系相关产品：MES-13细胞、H-2405细胞、NCIH69细胞
SF-126细胞系相关产品：HGSMC细胞、OCIAML2细胞、Lu-99A细胞
H889细胞系相关产品：MDAMB415细胞、MDA.MB.435细胞、Ramos 2G6 4C10细胞
X63-AG 8.653细胞系相关产品：LAN-5细胞、OVCAR433细胞、H-157细胞
293 EBNA细胞系相关产品：Calu 3细胞、SUM159细胞、B 95-8细胞
LPC-H12细胞系相关产品：SK-RC 42细胞、MCF7/WT细胞、Kuramochi细胞
BEND细胞系相关产品：SJ-Rh 30细胞、HBMEC细胞、MOLP-2细胞
T 84细胞系相关产品：SACC83细胞、Strain L-929细胞、BCP1细胞
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