"RAG Thawing小鼠肾腺癌细胞系
细胞背景资料：肾癌；BALB/c
细胞形态：上皮细胞样
RAG Thawing小鼠肾腺癌细胞系
细胞生长：贴壁
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
RAG Thawing小鼠肾腺癌细胞系
细胞生长特性：贴壁
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞形态特性：详见细胞说明书
SK-MEL-31细胞系相关产品：CHO cell clone K1细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞、PC 61.5.3细胞
WRL68细胞系相关产品：D-283细胞、H-2107细胞、LC-2/ad细胞
RH30SJ细胞系相关产品：End1/E6E7细胞、TCC-SUP细胞、HT22细胞
alpha-TC1-6细胞系相关产品：SW-527细胞、CTV-1细胞、SLK细胞
U-251 MG细胞系相关产品：AML-EOL-1细胞、AMO1细胞、PC615.3细胞
National Medical Center-Glioma 1细胞系相关产品：HBE 135-E6E7细胞、HSCT6细胞、KYSE 410细胞
Jijoye细胞系相关产品：D283细胞、SRA 01/04细胞、Mo 59J细胞
HUASMC细胞系相关产品：HC11细胞、SKLU01细胞、hTERT-HME1细胞
SNU-739细胞系相关产品：A-498细胞、HGBEC细胞、AM-38细胞
N-9细胞系相关产品：PK15细胞、MSF细胞、CG4细胞
U20-S细胞系相关产品：MCF-12F细胞、OPM-2细胞、HuT-102细胞
3 LL细胞系相关产品：UM-UC14细胞、NCI-H1954细胞、GM03671细胞
MPC5细胞系相关产品：COLO-HSR细胞、CCRF.CEM细胞、H-2052细胞
MDA-MB-231 #4175细胞系相关产品：REC 1细胞、EBNA293细胞、ROS17/28细胞
SW1783细胞系相关产品：HCT-GEO细胞、FaDu细胞、Karpas422细胞
NUGC4细胞系相关产品：HCEpiC细胞、PCI-04B细胞、HUT 125细胞
YAC-1细胞系相关产品：THLE-3细胞、Hu-P-T3细胞、THP 1细胞
Lu-99A细胞系相关产品：P3X63 Ag8细胞、HPAF II细胞、CHO K1细胞
NRCC细胞系相关产品：Fu97细胞、8505C细胞、COLO320HSR细胞
MDA 435细胞系相关产品：SP2细胞、A-375.S2细胞、T47D细胞
Hs863T细胞系相关产品：NCIH1836细胞、LC-1细胞、RDES-1细胞
Hs863T细胞系相关产品：NCIH1836细胞、LC-1细胞、RDES-1细胞
OCI AML5细胞系相关产品：H-1693细胞、Hs-688A-T细胞、X63Ag8.653细胞
WTRL1细胞系相关产品：AAV-293细胞、H-920细胞、DanG细胞
SW-900细胞系相关产品：HD11细胞、Hs68细胞、AMO1细胞
Capan-1细胞系相关产品：COLO-1细胞、SNU-520细胞、RPMI1846细胞
RAG Thawing小鼠肾腺癌细胞系
373MG细胞系相关产品：624 MEL细胞、ARPE19细胞、HMEL细胞
H-322细胞系相关产品：LOU-NH91细胞、NCI-H125细胞、KLM1细胞
870细胞系相关产品：H1650细胞、BTI-Tn5B14细胞、EFO 27细胞
A2780S细胞系相关产品：OE-33细胞、3T3 clone A31细胞、WSU-DLCL2细胞
Vero 76 clone E-6细胞系相关产品：SK HEP 01细胞、JEKO细胞、SKNSH细胞
NK62a细胞系相关产品：OV-1063细胞、ZYM-SVEC01细胞、PG-LH7细胞
MOVAS细胞系相关产品：SUM159PT细胞、KHYG细胞、M-O7e细胞
B16BL6细胞系相关产品：HEI193细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞、MSF细胞
Med 283细胞系相关产品：MeT5A细胞、CHO-Lec1细胞、MS751细胞
NCI-H2452细胞系相关产品：SKMEL28细胞、L1210细胞、SCC-4细胞
Psi-2-DAP细胞系相关产品：EAC-E2G8细胞、IEC-6细胞、OKa-C-1细胞
C12细胞系相关产品：DLM8细胞、TE13细胞、RPMI-8226细胞
GM04154B细胞系相关产品：CG-4细胞、HCV-29细胞、SNU-354细胞
SK-OV-433细胞系相关产品：KYSE-450细胞、WIL2S细胞、DMS 273细胞
A-427细胞系相关产品：D407细胞、Centre Antoine Lacassagne-62细胞、SL-1细胞
HT细胞系相关产品：WM35细胞、MIHA细胞、SNU1细胞
GM17219细胞系相关产品：SUM159细胞、BT483细胞、Hs-852-T细胞
A375-SM细胞系相关产品：RT4-D6-P2T细胞、HepG2细胞、NCI-H165细胞
Caki2细胞系相关产品：BE2C细胞、OKT 3细胞、CAL-78细胞
H-1648细胞系相关产品：OVCAR-3细胞、MLMEC细胞、CPA47细胞
bEnd3细胞系相关产品：OCI-LY-7细胞、T 98 G细胞、HEL9217细胞
OVCAR-432细胞系相关产品：SK-N-BE细胞、SKMEL24细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞
QG-56细胞系相关产品：SY5Y细胞、Tu-686细胞、SB细胞
NB9细胞系相关产品：WM451细胞、A-9细胞、MPC11细胞
McCoy细胞系相关产品：NCIH1373细胞、HAVSMC细胞、CA-46细胞
BT483细胞系相关产品：SN-12C细胞、RPMI8226/S细胞、NCI-H1648细胞
Granta 519细胞系相关产品：HET-1A细胞、J 774A.1细胞、Central Adrenergic TH-expressing a细胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞系相关产品：1E8-H细胞、H548细胞、Panc-03.27细胞
S180细胞系相关产品：SK-N-BE(2)细胞、HT clone H9细胞、NCI-H1975细胞
HCT116细胞系相关产品：Rat podocyte细胞、MKN 45细胞、SK-N-BE(2)C细胞
JB6Cl30细胞系相关产品：MLO-Y4细胞、H661细胞、DHL4细胞
U2OS细胞系相关产品：Hela-Ap-1细胞、BIU-87细胞、KLN-205细胞
SNU5细胞系相关产品：NCI-SNU-C2B细胞、Hela-Ap-1细胞、HEK 293-EBNA细胞
RAG Thawing小鼠肾腺癌细胞系
CAL51细胞系相关产品：MDA-MB231细胞、HEK/293细胞、HSC细胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞系相关产品：OCLY8细胞、HCC-15细胞、HPAF细胞
NTERA2-cloneD1细胞系相关产品：GL-261细胞、MB49细胞、SUNE 1细胞
KCL22S细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、SHG-44细胞、SK UT 1细胞
SNU-869细胞系相关产品：P 3 HR 1细胞、Uhth-74细胞、T-98细胞
HaCaT细胞系相关产品：HO-1-N-1细胞、Be Wo细胞、MGSMC细胞
MDA-MB453细胞系相关产品：CCD966SK细胞、NCI-H1734细胞、NCIH2135细胞
BC-3-H-I细胞系相关产品：CHP126细胞、Lewis Lung细胞、NBL-3细胞
SK_N_BE2C细胞系相关产品：MSTO-211 H细胞、NCI-H865细胞、NCIH2126细胞
SEG-1细胞系相关产品：H-1522细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞、AR4-2J细胞
SW-620细胞系相关产品：COR-L51细胞、CHO/dhFr-细胞、SW1088细胞
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