"C127 Thawing小鼠乳腺肿瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
C127 Thawing小鼠乳腺肿瘤细胞系
细胞生长：贴壁
造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】１)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌３０min,酒精擦拭后直接开始试验；２)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；３)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；４)不带手套，徒手操作；５)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需１２１°C高压灭菌２０分钟后３７％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不好，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且好几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求高，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
贴壁细胞的消化方法介绍：１、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在０.２５-０.５%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。０.２５%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在３７度条件下，一般消化１-５分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-２０度。２、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在０.０２%左右。作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。因此，配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此，消化下来的细胞要洗一遍。４、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大，但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。５、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。６、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。优点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧，又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：１、用较多的４度的PBS 洗涤一遍细胞(以６孔板为例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，３、轻轻吹打，细胞即完全脱落，４、按一定比例传代。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
C127 Thawing小鼠乳腺肿瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
细胞传代的一般方法：开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-０.２%LH培养液或MEM培养液或１９９等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（１万单位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、胶塞、吸管(１０ml、１m１）、细胞吹打管（２０ml）(以上用具需经１２１℃至少１５分钟高压灭菌)、C０２ 孵箱、超净台、倒置显微镜、４℃、-２０℃冰箱；操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培养液１００ml内，加入灭活小牛血清１０m１，庆大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸钠溶液３ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS洗液冲洗细胞表面１-２次，每次１０m１，弃去洗液，向细胞瓶内加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入１０m１细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于３７±１℃孵箱培养。约２～４天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。
细胞形态特性：详见细胞说明书
SW900细胞系相关产品：NCI-H510细胞、HCA7细胞、BxPC-3细胞
C-8161细胞系相关产品：PLB-985细胞、BS-C-1细胞、SNU-423细胞
TCam 2细胞系相关产品：COLO-320-HSR细胞、OCI-Ly 7细胞、LNT-229细胞
L-5178-Y细胞系相关产品：Clone 929细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、GM03569D细胞
LC-1细胞系相关产品：NCI-H1836细胞、JB6 clone 30, subclone 7b细胞、CO115细胞
KNS-62细胞系相关产品：UMNSAH-DF-1细胞、SK-N-BE(2)细胞、MNNG/HOS细胞
OVCA5细胞系相关产品：PANC-10-05细胞、ML2细胞、MDA-MB-134-VI细胞
NCI-H1618细胞系相关产品：3396细胞、H-1417细胞、SNU-1细胞
OVCAR-433细胞系相关产品：MDA-MB-435 S细胞、BC3H1细胞、Hs578Bst细胞
AC29细胞系相关产品：HEC-1-B细胞、H8细胞、GM3190细胞
NCI-H1954细胞系相关产品：TE13细胞、HUT-226细胞、PCI:SG-231细胞
NCI-SNU-423细胞系相关产品：CNE2细胞、JKT-1细胞、PMVEC细胞
MCF-7ADR细胞系相关产品：Walker-Ca.256细胞、KASUMI1细胞、EJ 138细胞
451Lu细胞系相关产品：NS1-1 Ag4.1细胞、RPMI No. 1846细胞、HCa/16A3-F细胞
SJSA1细胞系相关产品：L2细胞、L2细胞、hRMECs细胞
OVCAR-420细胞系相关产品：LICR-HN-6细胞、Rat Fetal Lung-6细胞、AE 1201细胞
MHCCLM3细胞系相关产品：HCC0095细胞、H2110细胞、SNU-719细胞
T47D细胞系相关产品：AR-42J细胞、Hs895T细胞、Hs888T细胞
SG231细胞系相关产品：K7M2细胞、32Dc3细胞、MRMT-1细胞
BERH-2细胞系相关产品：MM1-S细胞、HL-7702细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞
NT-2细胞系相关产品：CATH.a细胞、CT 26细胞、3T3-L1细胞
Hs 27细胞系相关产品：TE-13细胞、A101D细胞、HEP-3B2细胞
Opossum Kidney细胞系相关产品：SK RC 52细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、NHA细胞
VM-CUB-I细胞系相关产品：SHIN-3细胞、HFL 1细胞、HOS(TE85)细胞
M619细胞系相关产品：H498细胞、PC-10细胞、UM-RC-2细胞
RWPE2细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞、DMS 153细胞、SCLC21H细胞
C127 Thawing小鼠乳腺肿瘤细胞系
C-33 A细胞系相关产品：ST2细胞、KRC-Y细胞、VP 229细胞
hEM15A细胞系相关产品：NCI-H2591细胞、U-251_MG细胞、M-14细胞
SW 982细胞系相关产品：Danio rerio Gill细胞、UWB1.289细胞、WERI-Rb 1细胞
OCIAML5细胞系相关产品：Leukemia 1210细胞、HS-294细胞、HEL-92-1-7细胞
MSC细胞系相关产品：CALU1细胞、GT38细胞、ARPE-19细胞
HCC-94细胞系相关产品：RPE D407细胞、8226/S细胞、H2081细胞
P3HRI细胞系相关产品：SCL I细胞、CCF-STTG1细胞、MDST8细胞
NCIH596细胞系相关产品：Tu-212细胞、NCIH2066细胞、CL1细胞
NCI-SNU-398细胞系相关产品：SCC-9细胞、MDA 231-LM2-4175细胞、SNU423细胞
BAEC细胞系相关产品：C28/I2细胞、H295细胞、LK2细胞
PA12细胞系相关产品：R-1059-D细胞、Tadarida brasiliensis 1 lung细胞、EMT-6细胞
MDA436细胞系相关产品：UMR106细胞、HCE-T细胞、Anip 973细胞
OVCA 433细胞系相关产品：Japanese Tissue Culture-28细胞、HPAF-II细胞、H-1944细胞
SVG(P12)细胞系相关产品：BPH1细胞、NCI-SNU-886细胞、COLO320-DM细胞
HuH-6细胞系相关产品：CEM-C7细胞、4-1st细胞、M-1 myeloid leukemia细胞
DR2R 1610细胞系相关产品：GNM细胞、DLD 1细胞、Panc2_03细胞
H-2452细胞系相关产品：S-16细胞、hOMF细胞、BCaP 37细胞
MDA-MB-175细胞系相关产品：293T/17细胞、MDA-MB-453细胞、UCH-1细胞
NCI-H292细胞系相关产品：FC33细胞、GM04671细胞、Eca-109细胞
RPE1-hTERT细胞系相关产品：H1993细胞、FRTL 5细胞、A2780S细胞
OCILY10细胞系相关产品：HLF-a细胞、RSMC细胞、C3H10T1/2 clone8细胞
NCIH1650细胞系相关产品：MUTZ1细胞、Anip973细胞、32Dc3细胞
RS 4;11细胞系相关产品：MPC5细胞、H-1404细胞、D-341 Med细胞
IGROV细胞系相关产品：HCT8细胞、NFHIOSE-80细胞、PA-1细胞
Lu-165细胞系相关产品：HEY A8细胞、HuO9细胞、HCC 70细胞
NKL细胞系相关产品：Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞、C4-2 B细胞、SW 1222细胞
KM.12细胞系相关产品：HFLS细胞、GM02131细胞、SK HEP 01细胞
CX1细胞系相关产品：RH7777细胞、SW 1417细胞、H-716细胞
H1648细胞系相关产品：HFSF细胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞、HBE细胞
HIT-T15细胞系相关产品：SMA560细胞、H747细胞、SNU886细胞
H748细胞系相关产品：MJ细胞、H-2009细胞、CAL 27细胞
M-07e细胞系相关产品：KP-2细胞、TGW-nu-1细胞、NCI-H2108细胞
A-375SM细胞系相关产品：HCa/16A3-F细胞、NCIH1355细胞、NR8383细胞
C127 Thawing小鼠乳腺肿瘤细胞系
HCC-202细胞系相关产品：RT4细胞、NB1-RGB细胞、ND7/23细胞
293A细胞系相关产品：WC00044细胞、A-2058细胞、4175细胞
UCLA SO M14细胞系相关产品：H-220细胞、CEF细胞、C2BBe 1细胞
CAKI.1细胞系相关产品：SK-ChA1细胞、NKM1细胞、HGMC细胞
3D4/21细胞系相关产品：32D CL3细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞、TFH细胞
U118细胞系相关产品：HNE-2细胞、GM17346细胞、MRAEC细胞
NCI-H64细胞系相关产品：HepaRG细胞、D-324 Med细胞、McA-RH7777细胞
AMO-1细胞系相关产品：Th17细胞、SSP-25细胞、VP303细胞
UACC812细胞系相关产品：SNU-719细胞、HAEC细胞、SW1990细胞
C-Lu-65细胞系相关产品：CMT-167细胞、AU565细胞、RH7777细胞
Buffalo Rat Liver-3A细胞系相关产品：VMRCLCD细胞、Hs940.T细胞、Verda reno细胞
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