"HCT 116 Thawing人结肠癌细胞系
细胞背景资料：结肠腺癌；男性
细胞形态：上皮细胞样
HCT 116 Thawing人结肠癌细胞系
细胞生长：贴壁
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCT 116 Thawing人结肠癌细胞系
细胞生长特性：贴壁
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞形态特性：详见细胞说明书
PK-136细胞系相关产品：NCI-H1876细胞、NCI-H295细胞、DHL-8细胞
Hs742T细胞系相关产品：Colo741细胞、CEM-C7细胞、SUM190PT细胞
Caco-2细胞系相关产品：M-1 myeloid leukemia细胞、HLF细胞、J774细胞
P388D1细胞系相关产品：MCF7ADR细胞、LTEP-sm细胞、HCC-70细胞
NFHIOSE-29细胞系相关产品：NCM356细胞、NCI-H2029细胞、NCIH1341细胞
H2087细胞系相关产品：MIN6细胞、HCC0827细胞、CCD-33Co细胞
OLN 93细胞系相关产品：Co320细胞、NCI-H2452细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞
1301细胞系相关产品：L cell line细胞、CoCL2细胞、PSN-1细胞
NCI-H157细胞系相关产品：Tu 212细胞、SUD4细胞、CAL 12T细胞
Hep G2细胞系相关产品：SKLU1细胞、NCI-H187细胞、C8166-CD4细胞
Hs27细胞系相关产品：K299细胞、OS-732细胞、HCC-44细胞
CA46细胞系相关产品：H-69细胞、C22 (Clara)细胞、Kasumi-6细胞
HCC1937细胞系相关产品：JROECL 21细胞、SHSY-5Y细胞、DMS53细胞
H446细胞系相关产品：SUIT 2细胞、OV-CA 432细胞、SF 767细胞
PAMC82细胞系相关产品：mousepodocyte细胞、HS-729细胞、HEK-EBNA细胞
NCIH128细胞系相关产品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、OCI/AML3细胞、IEC 18细胞
Rat Basophilic Leukemia-1细胞系相关产品：Sp2/O-Ag14细胞、PG-LH7细胞、CAL-27细胞
LL/2(LLc1)细胞系相关产品：CHL/IU细胞、MDA-MB-361细胞、SW 1463细胞
2V6.11细胞系相关产品：IPLB-Sf21AE细胞、NCIH1299细胞、WC00044细胞
38C13细胞系相关产品：YH细胞、P31-FUJ细胞、Tn5 B1-4细胞
M059J细胞系相关产品：Reuber-H-35 hepatoma细胞、RPE D407细胞、CFSC-8B细胞
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Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞系相关产品：H-676B细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞、RIN-m 14B细胞
C-Lu65细胞系相关产品：MOLP-2细胞、RCC10细胞、NCIH2009细胞
HCC1599细胞系相关产品：ARO 81-1细胞、ChaGo-K-1细胞、HCC95细胞
CAL 51细胞系相关产品：Bac 1.2F5细胞、Hs27细胞、L540细胞
HCT 116 Thawing人结肠癌细胞系
Normal Rat Kidney-49F细胞系相关产品：A-172MG细胞、Tu177细胞、HCC-1419细胞
RBL-2H3细胞系相关产品：EFM192B细胞、KB细胞、C4-2 Bone metastatic细胞
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H2085细胞系相关产品：Epstein-Barr-1细胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、H1618细胞
Panc_02_03细胞系相关产品：OCI-LY-19细胞、HCC1954-BL细胞、KU1919细胞
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L-5178-Y-R细胞系相关产品：WPE-int细胞、SW260细胞、OUMS23细胞
P3 (Jiyoye)细胞系相关产品：hMSC-BM细胞、CCD-1095Sk细胞、B-95-8细胞
M059K细胞系相关产品：NMCG1细胞、C-Lu65细胞、M07e细胞
U-118MG细胞系相关产品：PK-15细胞、293EBNA细胞、HPDEC细胞
C81-61细胞系相关产品：JB 6细胞、Hs 445细胞、Panc8.13细胞
HEK-293-FT细胞系相关产品：NP-69细胞、32D:cl3细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞
A9细胞系相关产品：NCIH1688细胞、H-1573细胞、A-10细胞
LM-TK-细胞系相关产品：RPTC细胞、ID8细胞、GC-2spd(ts)细胞
HCC-1187细胞系相关产品：High 5细胞、Wistar Institute-38细胞、OCI-Ly8细胞
CTX TNA2细胞系相关产品：JB-6 Cl 30细胞、USMC细胞、C-32细胞
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Roswell Park Memorial Institute 1846细胞系相关产品：PLC PRF 5细胞、HuT-102细胞、GM02219细胞
SuDHL 10细胞系相关产品：Madin-Darby Canine Kidney细胞、CATHa细胞、SK-MEL 28细胞
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RSC-96细胞系相关产品：SKRC-52细胞、769-P细胞、SUM 52PE细胞
RPMI 1788细胞系相关产品：Ca Ski细胞、BIU-87/Adr细胞、GM637A细胞
SUDHL-2细胞系相关产品：LP-1细胞、SK-N-BE-2细胞、8226细胞
N-2a细胞系相关产品：SUDHL16细胞、B16-BL6细胞、NCI.H226细胞
COLO320/DM细胞系相关产品：Pro-Lec1.3C细胞、Jurkat-FHCRC细胞、GOTO细胞
HCT-15细胞系相关产品：HEK293E细胞、J-82细胞、U373 MG细胞
CEMC7细胞系相关产品：HPDLF细胞、Jijoye细胞、H.Ep. #2细胞
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TCCSUP细胞系相关产品：DiFi细胞、FOX-NY细胞、KYSE-70细胞
KMB 17细胞系相关产品：MCF10A细胞、COV362细胞、SNU216细胞
HPBALL细胞系相关产品：HBL100细胞、FDCP1细胞、3T3-F442A细胞
HCT 116 Thawing人结肠癌细胞系
MGHU1细胞系相关产品：WM2664细胞、MDA-MB-415细胞、RC-K8细胞
TO 175.T细胞系相关产品：RAW264.7细胞、HCC70细胞、SCL2细胞
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FaDu细胞系相关产品：Farage细胞、D-407细胞、SK-MES-1细胞
SNU869细胞系相关产品：Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、MNNG/HOS细胞、A2780CP70细胞
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OSC-19细胞系相关产品：BE2_C细胞、MDA 1386细胞、CL 1-0细胞
HNE1细胞系相关产品：RINm5F细胞、TE-14细胞、AX-Mel细胞
SK-N-BE2细胞系相关产品：SNT8细胞、NCI-H676B细胞、SUM159细胞
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