"RKO-E6 Thawing人结肠癌转基因细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
RKO-E6 Thawing人结肠癌转基因细胞系
细胞生长：贴壁
常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或高过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存好了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至７０%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：５-１０% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；５-１５%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在５０%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长２４小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过１.５ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做好记录是非常非常重要的！还有一个最重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做好防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
RKO-E6 Thawing人结肠癌转基因细胞系
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞形态特性：详见细胞说明书
SKCO1细胞系相关产品：PC3M-1E8细胞、NG108-15细胞、RBVEC细胞
SK-MEL-3细胞系相关产品：HBZY-1细胞、GM07404D细胞、Strain L-929细胞
ACC3细胞系相关产品：SU.86细胞、Detroit562细胞、OC-316细胞
CL-11细胞系相关产品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞、MGH-U3 (RN)细胞、RC13细胞
Jurkat 77细胞系相关产品：QBI-293A细胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞、Kupffer细胞
HTR8细胞系相关产品：JHH2细胞、Farage OL细胞、HDQP1细胞
U343细胞系相关产品：HEK AD293细胞、FO [Mouse myeloma]细胞、SKNBE(2)细胞
SK-MEL-3细胞系相关产品：HBZY-1细胞、GM07404D细胞、Strain L-929细胞
NCIH1048细胞系相关产品：SW-1573细胞、OCIAML5细胞、MDCC-MSB1细胞
K 562细胞系相关产品：Walker/LLC-WRC 256细胞、RPMI2650细胞、H-1568细胞
H920细胞系相关产品：HG2855细胞、SPCA-1细胞、MA-c细胞
COLO 16细胞系相关产品：EFM192C细胞、MSTO-211H细胞、MES23.5细胞
BE(2)M-17细胞系相关产品：P3X63 AG8-653细胞、GM00637B细胞、50.B1细胞
AN3CA细胞系相关产品：MB 157细胞、C6661细胞、Rat podocyte细胞
PA1细胞系相关产品：Nb2a细胞、4T1.2细胞、KMS11细胞
CPA 47细胞系相关产品：HCC1954-BL细胞、PLC/PRF/5细胞、SACC-LM细胞
HeLa/DDP细胞系相关产品：COLO 320细胞、KATO 3细胞、L-6 myoblast细胞
NCIH128细胞系相关产品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、EBTr (NBL-4)细胞、G361mel细胞
HBdSMC细胞系相关产品：SUM 52细胞、IHH细胞、H526细胞
HeLa S 3细胞系相关产品：YD-38细胞、C2BBe 1细胞、L-363细胞
BHT-101细胞系相关产品：MSTO211H细胞、DV-90细胞、JeKo 1细胞
BHT-101细胞系相关产品：MSTO211H细胞、DV-90细胞、JeKo 1细胞
HOS (TE85)细胞系相关产品：H4-IIE-C3细胞、HT-1080细胞、PANC-08-13细胞
Jurkat77细胞系相关产品：HCEC细胞、P3.times.63 Ag8.653细胞、H766T细胞
RS1细胞系相关产品：HT 144细胞、MSTO-211细胞、Namalwa细胞
BALB 3T3 clone A31细胞系相关产品：MG-63细胞、PL45细胞、TM-3细胞
RKO-E6 Thawing人结肠癌转基因细胞系
HEL-92.1.7细胞系相关产品：H-35 Reuber细胞、SW620细胞、H-1836细胞
Hs746-T细胞系相关产品：DU 4475细胞、NCI-H2126细胞、KY-270细胞
BHP 10-3细胞系相关产品：W133细胞、Jurkat clone A3细胞、RPMI 1788细胞
CCRF-CEM/S细胞系相关产品：Panc05.04细胞、PANC0403细胞、MLOY4细胞
SUPM2细胞系相关产品：GM05887A细胞、JAR细胞、Tu177细胞
HCT116细胞系相关产品：Rat podocyte细胞、MKN 45细胞、SK-N-BE(2)C细胞
DMS-53细胞系相关产品：HPDEC细胞、Hs 695.T细胞、HL-7702细胞
OKT3细胞系相关产品：TNC-1B12B4细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞、343 MG细胞
ZR-75-1细胞系相关产品：H-522细胞、G-Olig2细胞、DMS-114细胞
ACT-1细胞系相关产品：LC-2-Ad细胞、SW1990细胞、H1688细胞
HuT78细胞系相关产品：P3J HR1-K细胞、MHCC 97细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞
Hs-27细胞系相关产品：SKNBE2细胞、NTERA2-D1细胞、SNU5细胞
H-920细胞系相关产品：JVM3细胞、SNU475细胞、NCIH2052细胞
QBC-939细胞系相关产品：RC13细胞、TSUpr1细胞、P31/Fujioka细胞
P30/OHK细胞系相关产品：WSU-HN13细胞、LCD细胞、PAEC细胞
GM-346细胞系相关产品：OVHM细胞、KM H-2细胞、NBLS细胞
Reuber H35细胞系相关产品：TC-1[JHU-1]细胞、M-1 myeloid leukemia细胞、JM细胞
Hs 895 T细胞系相关产品：CP-70细胞、THP-1细胞、MLTC-1细胞
FHCRC subclone 11细胞系相关产品：3T3细胞、OCM-1A细胞、ARO81细胞
HEC-1A细胞系相关产品：Oka-C1细胞、SK Col 1细胞、OEC33细胞
SGC7901细胞系相关产品：Daoy细胞、Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDA-415细胞
HCC-1833细胞系相关产品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞、Panc 5.04细胞、HOCF细胞
Roswell Park Memorial Institute 6666细胞系相关产品：BC-019细胞、UM2细胞、LU-65M细胞
H727细胞系相关产品：OCM-1细胞、A2780/CP70细胞、NCI-H358细胞
SF295细胞系相关产品：H-2081细胞、Lu-165细胞、PK136细胞
CATH-a细胞系相关产品：M210B4细胞、HCFB（HCF）细胞、Hs-688A-T细胞
SCLC21H细胞系相关产品：OCM-1A细胞、Balb/c3T3细胞、MDA-MB-231 #4175细胞
MDA-MB-231-GFP细胞系相关产品：EJ细胞、LuCL4细胞、BTI-Tn-5B1-4细胞
RA细胞系相关产品：T47D细胞、NCIH2291细胞、MV522细胞
GM03570E细胞系相关产品：SU-DHL-2细胞、WM-239A细胞、Lu-165细胞
SNU-C2A细胞系相关产品：AAV293细胞、SNU-354细胞、SNU-5细胞
GP5d细胞系相关产品：SKES-1细胞、OCI-AML2细胞、Vero细胞
P3HR1细胞系相关产品：SNU119细胞、KYSE 450细胞、Clone 166细胞
RKO-E6 Thawing人结肠癌转基因细胞系
JKT1细胞系相关产品：Hi-5细胞、PC3M-1E8细胞、CAL 120细胞
GOTO细胞系相关产品：MTC-TT细胞、OV 1063细胞、KRC-Y细胞
HCC-2218细胞系相关产品：WRL 68细胞、SCC4细胞、RT-BM 1细胞
AtT-20细胞系相关产品：H-1436细胞、HConEpic细胞、A-253细胞
LC1sq细胞系相关产品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞、RPMI-8226S细胞、RenCa细胞
SW 1990细胞系相关产品：MLE12细胞、NB19细胞、R2C细胞
E.G7-OVA细胞系相关产品：EOC20细胞、CAKI 1细胞、AD-293细胞
NIH 3T6细胞系相关产品：CP70细胞、H1373细胞、SKNBE(2c)细胞
SW-1088细胞系相关产品：CEMO-1细胞、C17细胞、PL45细胞
CSQT-2细胞系相关产品：Blotchy fibroblast-11细胞、COR-L88细胞、BT-474细胞
SNU-620细胞系相关产品：DoHH2细胞、NPC-TW01细胞、NCIH1435细胞
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