"HeLa 229 Thawing人宫颈癌细胞系
细胞背景资料：宫颈癌；女性
细胞形态：上皮细胞样
HeLa 229 Thawing人宫颈癌细胞系
细胞生长：贴壁
细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HeLa 229 Thawing人宫颈癌细胞系
细胞生长特性：贴壁
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞形态特性：详见细胞说明书
253J-BV细胞系相关产品：VK2/E6E7细胞、RPE-1细胞、Michigan Cancer Foundation-7细胞
WB F344细胞系相关产品：T-HSC细胞、LS-174T细胞、RPMI8226/S细胞
HCEC-12细胞系相关产品：GM-637细胞、HSF2细胞、Normal Rat Kidney-49F细胞
NL20SV细胞系相关产品：MA-c细胞、NCI-SNU-398细胞、Jiyoye细胞
PLB 985细胞系相关产品：SHI1细胞、OEC33细胞、FRH-0201细胞
U373-MG细胞系相关产品：Human Melanoma Cell Bowes细胞、HCC1954细胞、Me-Wo细胞
NCI-H295细胞系相关产品：NCIH2141细胞、HUC-1细胞、Keio University-19-19细胞
RPTC细胞系相关产品：MES13细胞、293A细胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞
VeroC1008细胞系相关产品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、CEMO-1细胞、EST81细胞
HT144mel细胞系相关产品：MDAMB435细胞、HPAF细胞、CHL1细胞
HPAEpiC细胞系相关产品：Colon-38细胞、IMR-90细胞、hRPTC细胞
SK Col 1细胞系相关产品：KOSC-2细胞、NCIH2228细胞、NCI H929细胞
VSMC细胞系相关产品：Hce8693细胞、Calu3细胞、IGROV 1细胞
hTERT-HPNE细胞系相关产品：OVCAR-8/ADR细胞、LUDLU1细胞、Lewis lung carcinoma细胞
CAL851细胞系相关产品：CPA 47细胞、751-NA-15细胞、WM-451Lu细胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞系相关产品：Y3M细胞、WM266mel细胞、VMCUB-1细胞
L-1210细胞系相关产品：Cattle chondrocytes细胞、3T3J2细胞、MJ细胞
CACO2细胞系相关产品：PCI:SG231细胞、HFB细胞、GBCSD细胞
B-16细胞系相关产品：SU-86-86细胞、U-2 OS细胞、H1975细胞
H82细胞系相关产品：FRTL-5细胞、H596细胞、OCM-1细胞
207细胞系相关产品：CHOS细胞、Panc-03.27细胞、HEC1-A细胞
KP4细胞系相关产品：NS653细胞、F9细胞、VP229细胞
FL-83B细胞系相关产品：SW954细胞、Hi-5细胞、MDA175细胞
KMST6细胞系相关产品：MH7A细胞、SUM102PT细胞、NB19-RIKEN细胞
H2085细胞系相关产品：Epstein-Barr-1细胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、H1618细胞
MCF-12F细胞系相关产品：COLO-741细胞、FHL 124细胞、GRSL细胞
HeLa 229 Thawing人宫颈癌细胞系
SUD6细胞系相关产品：NCI-H1623细胞、RCS细胞、Walker-256-TC细胞
L细胞系相关产品：PMVEC细胞、DU-4475细胞、NCI-SNU-668细胞
SW 620细胞系相关产品：H-650细胞、SKMEL2细胞、Hs695细胞
NG108-15细胞系相关产品：MRAEC细胞、Centre Antoine Lacassagne-78细胞、AA-Mel细胞
CEM T4细胞系相关产品：DHL5细胞、Douglas Foster-1细胞、NPA 87细胞
WBF344细胞系相关产品：HCC1428细胞、TF-1细胞、WRL 68细胞
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HeLa 229 Thawing人宫颈癌细胞系
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