"DH82 Thawing狗肾恶性组织细胞增生症细胞系
细胞背景资料：肾；Golden Retrieve
细胞形态：上皮细胞样
DH82 Thawing狗肾恶性组织细胞增生症细胞系
细胞生长：贴壁
细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提高血清浓度(最高不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
DH82 Thawing狗肾恶性组织细胞增生症细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培养基；包含１０%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%甘油的新鲜培养基或５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：５０%细胞条件无血清培养基和５０%包含有７.５%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有７.５%二甲基亚砜和１０%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约２００～４００g离心５分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以１×１０(７)到５×１０(７)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约２００g离心５分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以５×１０(６)到１×１０(６)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
细胞形态特性：详见细胞说明书
CoCL2细胞系相关产品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞、143BTK-细胞、J774A.1细胞
CHL-CL-11细胞系相关产品：AE1201细胞、H-2228细胞、H125细胞
H-2342细胞系相关产品：HCT116/L细胞、LoVo细胞、H1563细胞
SUPB-15细胞系相关产品：CCD-841-CoN细胞、HCT-8细胞、NCI-H446细胞
SBC-5细胞系相关产品：SACC-LM细胞、Soleus clone 8细胞、253J-Bladder-V细胞
ROS17/2.8细胞系相关产品：WERI细胞、HOS TE 85细胞、SKNAS细胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞系相关产品：Ketr-3细胞、HAPI细胞、C-6细胞
Hs 636 T细胞系相关产品：SNG-M细胞、Hs.27细胞、A-101D细胞
RPMI6666细胞系相关产品：CCRF/CEM-C7细胞、MPP89细胞、DH 82细胞
Sup T-1细胞系相关产品：NTERA-2 cl.D1细胞、MC116细胞、SK-MEL-MeWo细胞
M-NFS-60细胞系相关产品：ACC-2细胞、EOL1细胞、Caco-2 BBe细胞
MCF 7B细胞系相关产品：J-111细胞、CCD 1112SK细胞、Hep 2细胞
HLE细胞系相关产品：PLC细胞、D10G41细胞、NB4细胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞系相关产品：NCI-1155细胞、H-2052细胞、Panc05.04细胞
SCL-1细胞系相关产品：MDA-MB-175-VII细胞、T-ALL-1细胞、RH30SJ细胞
PC-14细胞系相关产品：SW 982细胞、8226细胞、SK-MES1细胞
624 MEL细胞系相关产品：SNUC1细胞、CCD-841CoN细胞、COLO-684细胞
MKN 45细胞系相关产品：hRPTC细胞、SK-MEL-2-LUC细胞、T2细胞
NT2-D1细胞系相关产品：Lewis Lung细胞、SK-MES细胞、A253细胞
Hs 604.T细胞系相关产品：H2073细胞、L(TK-)细胞、U266-B1细胞
Wien 133细胞系相关产品：NCI-H1404细胞、KLM-1细胞、MNNG细胞
Wien 133细胞系相关产品：NCI-H1404细胞、KLM-1细胞、MNNG细胞
Medical Research Council cell strain-9细胞系相关产品：NCIH441细胞、T24(ECV304)细胞、H4-II-E-C3细胞
MHCC97L细胞系相关产品：MESSADX5细胞、COLO 741细胞、CEM-C7细胞
MLMEC细胞系相关产品：U-266细胞、GDM-1细胞、HuT-78细胞
HS 445T细胞系相关产品：MDA.MB.435细胞、PK15细胞、L-cells细胞
DH82 Thawing狗肾恶性组织细胞增生症细胞系
H-1930细胞系相关产品：PaCa2细胞、HS-294-T细胞、253J-BV细胞
U-251_MG细胞系相关产品：SKGT4细胞、MDA-MB-134VI细胞、A673细胞
Alexander cells细胞系相关产品：HEK 293 c18细胞、M2-10B4细胞、CAL 85-1细胞
H-1793细胞系相关产品：ECC-10细胞、Swiss 3T6细胞、SCC-25细胞
KYSE 510细胞系相关产品：NCIH1105细胞、RK 13细胞、Hs737T细胞
C8D1A细胞系相关产品：NCIH1930细胞、HELA-GFP细胞、Dunn LM8细胞
Normal Rat, August 3, 1983细胞系相关产品：HL-60 clone15细胞、Rat 1细胞、HOK细胞
SW839细胞系相关产品：RC-2细胞、Kit 225 K6细胞、SNU182细胞
AtT20细胞系相关产品：U138MG细胞、HS-766T细胞、PA12细胞
WM115F细胞系相关产品：WIL2S细胞、KPL-1细胞、LLC PK1细胞
PAI细胞系相关产品：UPCISCC090细胞、MS751细胞、H1404细胞
H-157细胞系相关产品：U266 B1细胞、NCI-H1876细胞、Panc10.05细胞
Panc-1-P细胞系相关产品：NCI-H460细胞、GM03570E细胞、PLA801-95D细胞
NCI-H2591细胞系相关产品：AML 12细胞、MC38细胞、Tu 212细胞
JC细胞系相关产品：NCI H157细胞、THEECs细胞、MDCKII-WT细胞
LS513细胞系相关产品：OCI Ly1细胞、A-10细胞、NCI-H102细胞
U118MG细胞系相关产品：NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞
Ej138细胞系相关产品：Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞
LS513细胞系相关产品：OCI Ly1细胞、A-10细胞、NCI-H102细胞
MM1.S细胞系相关产品：TKB1细胞、LM8细胞、V-79细胞
M3 Clone M-3细胞系相关产品：HMy2.CIR细胞、HN-6细胞、T/G HA-VSMC细胞
NS20Y细胞系相关产品：MA-782细胞、bEnd.3[BEND3]细胞、Mc Coy细胞
Madin Darby Canine Kidney细胞系相关产品：M20 [Human melanoma]细胞、SK-MEL5细胞、TM-4细胞
BEL 7402细胞系相关产品：HTR-8/SVneo细胞、SW403细胞、NT-2细胞
WM239细胞系相关产品：GM03320D细胞、SNU-423细胞、TU 686细胞
H35细胞系相关产品：OV 2008细胞、6T-CEM细胞、OVCAR8细胞
Chang liver细胞系相关产品：COS-7细胞、IB-RS2细胞、L-6TG细胞
NTERA-2cl.D1细胞系相关产品：DHBE细胞、MDA PCa 2b细胞、KCL22S细胞
MCF7-CTRL细胞系相关产品：SK HEP-1细胞、RS411细胞、Caco-2细胞
SJ-Rh 30细胞系相关产品：LLC PK1细胞、H716细胞、RKN细胞
SUSM1细胞系相关产品：SW 527细胞、KNS-42细胞、Eca109细胞
SUDHL4细胞系相关产品：3T3-Swiss albino细胞、MPC-11细胞、GM0637细胞
GC-1spg细胞系相关产品：SK.MEL.2细胞、NCI-H1299细胞、YES 2细胞
DH82 Thawing狗肾恶性组织细胞增生症细胞系
Hep2细胞系相关产品：H-660细胞、hFOB1.19细胞、LICR-LON-HN6-R细胞
MCA205细胞系相关产品：JB-6细胞、COLO 320DM细胞、293c18细胞
MCA205细胞系相关产品：JB-6细胞、COLO 320DM细胞、293c18细胞
NCI-H526细胞系相关产品：P3-X63-Ag8.653细胞、HS-940-T细胞、MCMEC细胞
CAL33细胞系相关产品：RPMI-1846细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞、F-81细胞
WiDrTC细胞系相关产品：SNU-251细胞、H-1954细胞、CHO-K1细胞
BEND细胞系相关产品：SJ-Rh 30细胞、HBMEC细胞、MOLP-2细胞
NS1-Ag 4/1细胞系相关产品：Meat Animal Research Center-145细胞、AMO-1细胞、ESC细胞
Swiss 3T3细胞系相关产品：JROECL 19细胞、624细胞、HNE2细胞
H-2009细胞系相关产品：NTera 2细胞、SJSA-1细胞、Caco2-BBE细胞
SW-837细胞系相关产品：P3HR-1细胞、WM451Lu细胞、TCam-2细胞
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