"NRK Thawing大鼠肾细胞系
细胞背景资料:肾;自发永生;Osborne-Mendel
细胞形态:上皮细胞样
NRK Thawing大鼠肾细胞系
细胞生长:贴壁
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NRK Thawing大鼠肾细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
细胞形态特性:详见细胞说明书
RBL.2H3细胞系相关产品:BT20细胞、HCC 70细胞、GM346细胞
H23细胞系相关产品:EC-GI细胞、HUSMC细胞、2T细胞
TGBC11TKB细胞系相关产品:NCIH2085细胞、NCTC-3960细胞、OVCAR-433细胞
McArdle RH-7777细胞系相关产品:WB F344细胞、786.O细胞、OVCAR-420细胞
UMC11细胞系相关产品:U-373-MG细胞、KRC/Y细胞、NTERA-2 cl.D1细胞
KM H-2细胞系相关产品:NCI-H1838细胞、Kit 225细胞、AZ521细胞
H-9细胞系相关产品:NCI-H1648细胞、NALM6细胞、H4IIE细胞
BNL 1ME A.7R.1细胞系相关产品:HCC2218细胞、SW 1573细胞、COLO 684细胞
PC-3M IE8细胞系相关产品:Vertebral Cancer of the Prostate细胞、MRC-V细胞、AML-12细胞
KTCTL-140细胞系相关产品:C518细胞、COLO 684细胞、H-1954细胞
PGBE1细胞系相关产品:Simpson细胞、Clone 15 HL-60细胞、C6661细胞
624 MEL细胞系相关产品:SNUC1细胞、CCD-841CoN细胞、COLO-684细胞
B16-F10细胞系相关产品:Sp2/mIL-6细胞、HEK293-A细胞、EU-4细胞
H1993细胞系相关产品:Calu-1细胞、U20-S细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞
DK-MG细胞系相关产品:CAL-12T细胞、BE(2)-M17细胞、GM637A细胞
TE-671细胞系相关产品:LM8细胞、TGW-I-nu细胞、BC-025细胞
H-1836细胞系相关产品:Colo699细胞、BJ [Human fibroblast]细胞、SK-N-AS细胞
SW1116细胞系相关产品:KYSE0520细胞、HT-1197细胞、NCI-H719细胞
UMUC1细胞系相关产品:HLE细胞、HFL-1细胞、H-2029细胞
HUCCT1细胞系相关产品:Hs-343-T细胞、MT-3 [Human leukocytes]细胞、Bx-PC3细胞
MFD-1细胞系相关产品:LAPC-4细胞、JHH-7细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞
GOS-3细胞系相关产品:SW-837细胞、8305C_1细胞、OV-90细胞
GC-2spd(ts)细胞系相关产品:Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、TMD8细胞、SKNBE-1细胞
Centre Antoine Lacassagne-62细胞系相关产品:MESSA细胞、IHC-ST1细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞
143B TK-细胞系相关产品:GM03571细胞、MH-22a细胞、SK RC 52细胞
MDA-157细胞系相关产品:SJ-RH30细胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞、NCIH820细胞
NRK Thawing大鼠肾细胞系
SF767细胞系相关产品:A2780CP70细胞、TE14细胞、KE 37细胞
CL1-5细胞系相关产品:HuH-1细胞、HEp-2细胞、SW 626细胞
RS(4;11)细胞系相关产品:Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞、MUTZ1细胞、THLE2细胞
AMJ2C8细胞系相关产品:Capan 2细胞、BE2C细胞、X63-Ag 8.6.5.3细胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞系相关产品:GH3细胞、DrG细胞、Hs 819.T细胞
X63Ag8.653细胞系相关产品:HT144mel细胞、Leydig细胞、SW-962细胞
SK Mel 24细胞系相关产品:Earle's L cells细胞、SNK-6细胞、Mono Mac 6细胞
SK 1细胞系相关产品:Colo-206F细胞、SW 756细胞、Hep 3B2细胞
CAL-120细胞系相关产品:Ishikawa细胞、RAT2细胞、MBT-2细胞
C3H-10T1/2细胞系相关产品:MUTZ-3细胞、ATN1细胞、Hs 281.T细胞
SKMES-1细胞系相关产品:PCI-04B细胞、MDBK细胞、GES1细胞
JM-1细胞系相关产品:RPMI No. 1846细胞、Clone Y-1细胞、H7721细胞
CT 26细胞系相关产品:NCI/ADR-RES细胞、CMT 64细胞、GM-346细胞
DR2R1610细胞系相关产品:253J细胞、50.B1细胞、Tregs细胞
Colo-206F细胞系相关产品:Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞、V-79细胞、NCI-H1930细胞
KMS11细胞系相关产品:B 95-8细胞、HCA-7细胞、RBMEC细胞
OVCA5细胞系相关产品:PANC-10-05细胞、ML2细胞、MDA-MB-134-VI细胞
S3 HeLa细胞系相关产品:MDA-MB 231细胞、MPVECs细胞、Melan-a细胞
HELF细胞系相关产品:BAR-T细胞、MBT-2细胞、CAL-120细胞
EB-2细胞系相关产品:Rainbow Trout Embryo细胞、U251n细胞、CHO-S细胞
MC38细胞系相关产品:QG56细胞、H-1238细胞、OCM1A细胞
HCC1395细胞系相关产品:COLO-829细胞、3T6细胞、Human Fetal Thymocyte-8810细胞
Sp2/0-Ag-14细胞系相关产品:H1404细胞、SW 1463细胞、MCAEC细胞
U-138-MG细胞系相关产品:SK-GT-2细胞、HNSC细胞、RIN-m5F细胞
H-548细胞系相关产品:HHL-5细胞、BMSC/hBMSCs细胞、HR8348细胞
CAL78细胞系相关产品:MFE-296细胞、Hs 737.T细胞、OEC19细胞
NPA'87细胞系相关产品:Lewis-Lung细胞、HBZY1细胞、87 MG细胞
NEC细胞系相关产品:U14细胞、H1355细胞、Clone M-3细胞
PC-9/GR细胞系相关产品:PC 61-5-3细胞、NCI-H2172细胞、MDA MB 134VI细胞
H64细胞系相关产品:EC109细胞、NCI H82细胞、PLC PRF 5细胞
HLEB-3细胞系相关产品:MM1细胞、Ramos-2G6-4C10细胞、U266B1细胞
PA-1细胞系相关产品:Becker细胞、NUGC-2细胞、NCIH1819细胞
HCC70细胞系相关产品:NCIH1819细胞、KHYG-1细胞、MCF-10 Attached细胞
NRK Thawing大鼠肾细胞系
PBL细胞系相关产品:H35细胞、RAW 264.7细胞、MA-782细胞
OCM1细胞系相关产品:CTV-1细胞、hTERTHME1细胞、CL-11细胞
CCD 1112SK细胞系相关产品:OVCAR-432细胞、OV1-P细胞、H-1650细胞
293A细胞系相关产品:WC00044细胞、A-2058细胞、4175细胞
K-1735细胞系相关产品:786.O细胞、Calu 6细胞、HSAS3细胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞系相关产品:H-810细胞、KAT-5细胞、MB39细胞
NS1-1 Ag4.1细胞系相关产品:H-1238细胞、PANC1005细胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞
H128细胞系相关产品:Caco2BBe细胞、MBVP细胞、MGH-U3 (RN)细胞
Institute for Medical Research-90细胞系相关产品:CACO2细胞、NCIH2009细胞、NCI-H322T细胞
Hs 683.T细胞系相关产品:TPC1细胞、RPTC细胞、HS5细胞
Ca9-22细胞系相关产品:C643细胞、MV-4-11细胞、NCIH128细胞
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