"Super Tube Thawing狗肾细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
Super Tube Thawing狗肾细胞系
细胞生长：贴壁
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气高压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
细胞传代的一般方法：开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-０.２%LH培养液或MEM培养液或１９９等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（１万单位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、胶塞、吸管(１０ml、１m１）、细胞吹打管（２０ml）(以上用具需经１２１℃至少１５分钟高压灭菌)、C０２ 孵箱、超净台、倒置显微镜、４℃、-２０℃冰箱；操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培养液１００ml内，加入灭活小牛血清１０m１，庆大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸钠溶液３ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS洗液冲洗细胞表面１-２次，每次１０m１，弃去洗液，向细胞瓶内加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入１０m１细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于３７±１℃孵箱培养。约２～４天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。
细胞形态特性：详见细胞说明书
DiFi细胞系相关产品：SUDHL10细胞、MLM细胞、8305C细胞
NK92MI细胞系相关产品：KYSE 450细胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞、Lu99A细胞
Lu-165细胞系相关产品：HEY A8细胞、HuO9细胞、HCC 70细胞
U-87 MG细胞系相关产品：LAC细胞、L-6TG细胞、ST 486细胞
P3-X63-Ag8-653细胞系相关产品：H250细胞、JKT1细胞、SJSA细胞
SNU-739细胞系相关产品：A-498细胞、HGBEC细胞、AM-38细胞
PL-12细胞系相关产品：MOLT-3细胞、NCIH747细胞、NIE-115细胞
SNU-668细胞系相关产品：Mac-1细胞、EU-4细胞、NCI-H660细胞
P19细胞系相关产品：KYSE140细胞、LN-18细胞、L 363细胞
L-5178-Y细胞系相关产品：Clone 929细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、GM03569D细胞
Hs-600-T细胞系相关产品：H-1781细胞、TMK1细胞、FM88细胞
COR-L 105细胞系相关产品：CHP212细胞、MDCKII细胞、HCCLM3细胞
AML193细胞系相关产品：NCIH146细胞、MOLP2细胞、GM01232E细胞
CL 1-5细胞系相关产品：PANC-1细胞、H-1563细胞、IBMF-7细胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞系相关产品：Hs 766细胞、WPE-int细胞、CCD966SK细胞
3T3-442A细胞系相关产品：SK-MEL-MeWo细胞、H-4-II-E细胞、MN 60细胞
ACC-3细胞系相关产品：4T1-LUC细胞、HRA 19细胞、SUM-149细胞
SKG3A细胞系相关产品：IOSE29细胞、B-3细胞、SW-48细胞
NCI-H676B细胞系相关产品：J82细胞、CPAE细胞、A-427细胞
U118MG细胞系相关产品：NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞
Colo-678细胞系相关产品：SupB15WT细胞、Hela-mock细胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞
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A7r5细胞系相关产品：SKCol1细胞、HuH6细胞、NCI-H64细胞
PLC/PRF5细胞系相关产品：KYSE 510细胞、SUPB15细胞、LC1sq细胞
RCC4细胞系相关产品：KM933细胞、NCI-SNU-423细胞、HEK 293-F细胞
MDA-MB-436细胞系相关产品：CCRF/CEM/0细胞、MRASMC细胞、SCC090细胞
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MC-3T3细胞系相关产品：CESS细胞、A-172MG细胞、RFL 6细胞
Mono Mac 6细胞系相关产品：CCD-841CoN细胞、Walker-Ca.256细胞、Hs 578Bst细胞
CHL-IU细胞系相关产品：KU-812-F细胞、SK-BR3细胞、QGY-7703细胞
HS-294-T细胞系相关产品：HSAEC1-KT细胞、TC-1[JHU-1]细胞、TALL1细胞
UMUC14细胞系相关产品：Mono Mac 1细胞、CT26-clone 25细胞、MNNG-HOS细胞
GM05887A细胞系相关产品：MDCK Type II细胞、H2196细胞、CORL51细胞
B16/F1细胞系相关产品：H345细胞、HEK293E细胞、NCIH1648细胞
SK N SH细胞系相关产品：MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞
HPAF2细胞系相关产品：EB-2细胞、NCI-H1373细胞、NCIH358细胞
JB6 Cl 30-7b细胞系相关产品：T-ALL-1细胞、Jurkat-77细胞、NCI-H2030细胞
HCC4006细胞系相关产品：KAT-5细胞、HCC-94细胞、H-1184细胞
KLN205细胞系相关产品：HeLa S 3细胞、ES-2细胞、H9c2 (2-1)细胞
SW-954细胞系相关产品：HB 611细胞、KG1细胞、PC 12细胞
SHEE细胞系相关产品：COLO320/DM细胞、SBC5细胞、Jurkat (clone E6-1)细胞
RFL6细胞系相关产品：HT-1197细胞、CAKI.1细胞、COLO 738细胞
MC38细胞系相关产品：QG56细胞、H-1238细胞、OCM1A细胞
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Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞系相关产品：SHEE细胞、NCI-H660细胞、NS-1-Ag4-1细胞
SNU-878细胞系相关产品：HR8348细胞、OCI-Ly 1细胞、NCI-SNU-878细胞
NCIH1568细胞系相关产品：THEECs细胞、118 MG细胞、RPMC细胞
OV2008细胞系相关产品：NS1-Ag4/1细胞、HRC-99细胞、NCI-H727细胞
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UMRC-2细胞系相关产品：RBL细胞、NCI-H740细胞、CMT-93细胞
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GM06141细胞系相关产品：RBL-I细胞、THP 1细胞、NCI N87细胞
CNLMG-B5537SKIN细胞系相关产品：UPCI:SCC90细胞、L 540细胞、SK-N-BE2细胞
MC3T3-E1(C4)细胞系相关产品：FHCRC subclone 11细胞、PC 61.5.3细胞、P388D1细胞
MDAMB134细胞系相关产品：HIT.T15细胞、Panc-10.05细胞、Nittby-Salford 1细胞
Kit-225细胞系相关产品：PLC8024细胞、ST486细胞、NCIH209细胞
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B16 F10细胞系相关产品：A-704细胞、253JBV细胞、LNCaP subline C4-2细胞
Hs27F细胞系相关产品：LWnt3A细胞、IPLB-Sf21-AE细胞、HLEpiC细胞
UPCI-SCC090细胞系相关产品：L M (TK-)细胞、Panc 1细胞、NCI.H460细胞
National Medical Center-Glioma 1细胞系相关产品：HBE 135-E6E7细胞、HSCT6细胞、KYSE 410细胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞系相关产品：FU-97细胞、OCM-1细胞、WM-451Lu细胞
NCIH226细胞系相关产品：H-524细胞、LTPA细胞、COLO320DM细胞
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C643细胞系相关产品：VCaP细胞、CL1细胞、Hepa1-6细胞
SUM-159-PT细胞系相关产品：Sp2/0-Ag-14细胞、SW1271细胞、OVCAR4细胞
3 LL细胞系相关产品：UM-UC14细胞、NCI-H1954细胞、GM03671细胞
GB1细胞系相关产品：COLO 680N细胞、HL1细胞、rUCMSCs细胞
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