"NCTC 1469 Thawing小鼠正常肝细胞系
细胞背景资料:1952年建系,源于正常C3H/An小鼠的肝脏组织,表达H-2K抗原,鼠痘病毒阴性。
细胞形态:上皮细胞样
NCTC 1469 Thawing小鼠正常肝细胞系
细胞生长:贴壁
细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCTC 1469 Thawing小鼠正常肝细胞系
细胞生长特性:贴壁
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞形态特性:淋巴母细胞
PNT1-a细胞系相关产品:DHL4细胞、GC-1细胞、MSTO-211细胞
HN-6细胞系相关产品:ANA-1细胞、MDA-MB 453细胞、OSA细胞
FL62891细胞系相关产品:PCI-SG231细胞、SNU-601细胞、SNU-668细胞
SUM102细胞系相关产品:CPAE细胞、GS9L细胞、H2.35细胞
SKMEL-2细胞系相关产品:M-20细胞、GC-2spd(ts)细胞、BAC1.2F5细胞
H-2171细胞系相关产品:H-2030细胞、MO59J细胞、HIT T-15细胞
NCI-H125细胞系相关产品:J82COT细胞、SKMEL28细胞、HT144-mel细胞
CCD19Lu细胞系相关产品:Kasumi-1细胞、McA-RH7777细胞、Kit-225细胞
HCC-15细胞系相关产品:MRMT-1细胞、Swiss 3T3细胞、OCI-Ly1细胞
BC3 H1细胞系相关产品:Hs-27细胞、Los Angeles Prostate Cancer-4细胞、LAC细胞
NIH 3T6细胞系相关产品:CP70细胞、H1373细胞、SKNBE(2c)细胞
DMS-153细胞系相关产品:H2052_MM细胞、OV 2008细胞、BJAB细胞
Toledo细胞系相关产品:G-361细胞、H-295细胞、KP4细胞
C32-mel细胞系相关产品:GLAG-66细胞、huH 1细胞、WEHI-279细胞
JIMT细胞系相关产品:HECV细胞、A1847细胞、MDA-MB-157细胞
OCM1细胞系相关产品:CTV-1细胞、HEK 293-F细胞、HuP-T4细胞
NCIH748细胞系相关产品:A375S2细胞、Central Adrenergic TH-expressing a细胞、SUDHL-10细胞
NL20细胞系相关产品:RIN m5F细胞、MLFC细胞、LTEP-sm 1细胞
mousepodocyte细胞系相关产品:HH [Human lymphoma]细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、MCA-38细胞
COR-L279细胞系相关产品:NS1细胞、Caov-4细胞、HCC0015细胞
H187细胞系相关产品:NCI-H748细胞、TE-7细胞、H2342细胞
NCI-SNU-398细胞系相关产品:SCC-9细胞、MDA 231-LM2-4175细胞、SNU423细胞
Panc-10.05细胞系相关产品:OVCA432_Bast细胞、GP2-293细胞、Rat1细胞
RSC 96细胞系相关产品:Ej138细胞、SKMEL-31细胞、IEC 18细胞
NCI-H2122细胞系相关产品:R1610细胞、U-CH1细胞、HFL1细胞
OCI-AML4细胞系相关产品:HCC-94细胞、F36P细胞、Colo320细胞
NCTC 1469 Thawing小鼠正常肝细胞系
H-1963细胞系相关产品:CTX TNA2细胞、OCI-AML-4细胞、SK-MEL24细胞
LLC PK1细胞系相关产品:U20S细胞、LTEP-s细胞、JTC-28细胞
Alexander细胞系相关产品:IPLB-SF-21-AE细胞、95D细胞、Sp2/0-Ag-14细胞
NCIH82细胞系相关产品:HT55细胞、NTera 2细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞
Madin Darby Bovine Kidney细胞系相关产品:LU65细胞、JB6 [Mouse]细胞、H1623细胞
Japanese Tissue Culture-39细胞系相关产品:HCT-8细胞、Human Embryo Lung-1细胞、LLC-PK(1)细胞
IR 983F细胞系相关产品:MDA-MB-231 #4175细胞、Detroit-562细胞、HCT GEO细胞
LN-382细胞系相关产品:W256细胞、SVGp12细胞、U-266细胞
CHOK1细胞系相关产品:SKRC20细胞、R 1610细胞、KHYG-1细胞
GP2-293细胞系相关产品:AM38细胞、COLO320-DM细胞、NCI-H1944细胞
Hs 839.T细胞系相关产品:NCI-H661细胞、HEK 293细胞、HEK293-A细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞系相关产品:LNCaP-FGC细胞、HOC-1细胞、CMT-64细胞
RCC 7860细胞系相关产品:COLO-205细胞、WEHI231细胞、CAKI 2细胞
ROS 17/2.8细胞系相关产品:HLFa细胞、293 Ad5细胞、UMNSAH-DF 1细胞
OVCA 420细胞系相关产品:IOSE 80细胞、RT-112细胞、NK92MI细胞
M-20细胞系相关产品:HCCC9810细胞、CAL148细胞、MUVEC细胞
HCC2218细胞系相关产品:Hs 819.T细胞、rHSC-99细胞、HCC-78细胞
HCASMC细胞系相关产品:NR-8383细胞、J-774细胞、MA-104细胞
Hs1.Tes细胞系相关产品:hCMEC/D3细胞、UT7细胞、RPTEC/TERT 1细胞
Walker/LLC-WRC256细胞系相关产品:INS1-E细胞、CL1-0细胞、Vero 76 clone E-6细胞
IPEC1细胞系相关产品:SKNBE2C细胞、hFOB细胞、Mel526细胞
SHI-1细胞系相关产品:T24(ECV304)细胞、C32r细胞、A 172细胞
G361细胞系相关产品:EBNA-293细胞、H-1755细胞、Ly10细胞
CHO Lec1细胞系相关产品:Caco-2/BBe细胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、A375S2细胞
MDA 435细胞系相关产品:SP2细胞、A-375.S2细胞、T47D细胞
Capan-1细胞系相关产品:COLO-1细胞、SNU-520细胞、RPMI1846细胞
KY-50细胞系相关产品:CL MC/9细胞、NCI-SNU-407细胞、Hs 606细胞
Daoy细胞系相关产品:KMB-17细胞、UMRC-2细胞、Rat-2细胞
H-292细胞系相关产品:WEHI164细胞、PC3M细胞、NCI-H-128细胞
HSC-T6细胞系相关产品:Hs742T细胞、MM6细胞、HOC-1细胞
M-G63细胞系相关产品:SKMel-5细胞、SUIT-2细胞、HLE-B3细胞
8305C细胞系相关产品:MKN28细胞、NCI-H719细胞、SK-MEL2细胞
MDA-MB-415细胞系相关产品:NCI.H23细胞、QSG7701细胞、H-1930细胞
NCTC 1469 Thawing小鼠正常肝细胞系
COLO 320F细胞系相关产品:G-402细胞、IAR-20细胞、Immortalized Human Hepatocytes细胞
RAW 264.7细胞系相关产品:NCI-H2172细胞、MFM-223细胞、SK-GT-4细胞
BJAB细胞系相关产品:COLO 320 DM细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞、tdott细胞
P3X63 AG8-653细胞系相关产品:T-CAM2细胞、HMEC细胞、HELF细胞
G-292细胞系相关产品:U-CH1细胞、NCTC clone 1469细胞、H-647细胞
Pro-Lec1.3C细胞系相关产品:3T3 clone A31细胞、UACC 812细胞、NCI-H1770细胞
Colon38细胞系相关产品:H125细胞、RC13细胞、JF305细胞
Walker/LLC-WRC 256细胞系相关产品:GM05384细胞、Panc8.13细胞、HCT 8细胞
Detroit 562细胞系相关产品:SUDHL6细胞、PaTu 8988s细胞、Hs746T细胞
Hs606细胞系相关产品:JHH7细胞、HDMEC细胞、Panc 8.13细胞
G519细胞系相关产品:NCI H747细胞、OVCAR-432细胞、GTL 16细胞
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