"A-375 Thawing人恶性黑色素瘤细胞系
细胞背景资料：A３７５源自一位５４岁女性，是Giard DJ等人建立的一系列细胞株中的一株。该细胞可在免疫抑制小鼠上成瘤，在琼脂上形成克隆。
细胞形态：上皮细胞样
A-375 Thawing人恶性黑色素瘤细胞系
细胞生长：贴壁
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会很快形成冰晶，从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增高，pH值改变，部分蛋白质由于上述原因而变性，引起细胞内部空间结构紊乱，溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶，使细胞内结构成分造成破坏，线粒体肿胀，功能丢失，并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变，使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多，随冷冻温度的降低，冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤，而致细胞死亡。因此，细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提高细胞膜对水的通透性，且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
A-375 Thawing人恶性黑色素瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-７０℃~-１９６℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-７０℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过０~２０℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。１ml冻存细胞使用１０~２０ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在３×１０(５)活细胞/ml；培养细胞１２到２４小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml冻存细胞加入到大约２５ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约８０x离心２到３分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为３×１０(５)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约１０１２个，可以区分为２００多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G１期开始时一个确定的点G０点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。
细胞形态特性：上皮细胞样
SKNBE(2c)细胞系相关产品：Melan-a细胞、HCA 7细胞、NCI-H522细胞
GM03320D细胞系相关产品：TK.10细胞、HLEB3细胞、RH35细胞
L细胞系相关产品：PMVEC细胞、DU-4475细胞、NCI-SNU-668细胞
H3396细胞系相关产品：NCI-H1693细胞、KYSE 410细胞、WSU-DLCL(2)细胞
SCC4细胞系相关产品：COLO 201细胞、SMA 560细胞、Pt K2细胞
C2C12细胞系相关产品：OC 316细胞、COLO-HSR细胞、RPE D407细胞
HREC细胞系相关产品：H-1672细胞、J.E6-1细胞、PLC-PRF-5细胞
EB-3细胞系相关产品：SW 1783细胞、SK-NM-C细胞、Y3-Ag 1.2.3细胞
AR4-2J细胞系相关产品：Epithelioma Papulosum Cyprini细胞、HNEpC细胞、HS0578T细胞
P36细胞系相关产品：MGSMC细胞、NCIH2227细胞、NHDF细胞
NCI-H1373细胞系相关产品：HLMVEC细胞、Colon 38细胞、RIN Cl-5F细胞
McCoy细胞系相关产品：NCIH1373细胞、HAVSMC细胞、CA-46细胞
Hmy.2 CIR细胞系相关产品：Balb/c3T3细胞、NE1细胞、KYSE 450细胞
MM1S细胞系相关产品：L-1210细胞、FAT细胞、B5537SKIN细胞
A2780S细胞系相关产品：OE-33细胞、FCCH1018细胞、MAC1细胞
SW-837细胞系相关产品：P3HR-1细胞、HuT-78细胞、NCI-H460细胞
Vero C1008细胞系相关产品：COLO 206F细胞、SU 86.86细胞、TW01细胞
253J-BV细胞系相关产品：VK2/E6E7细胞、RPE-1细胞、Michigan Cancer Foundation-7细胞
P3X63-Ag8.653细胞系相关产品：8226/S细胞、PC14细胞、OV3121细胞
174xCEM.T2细胞系相关产品：NCI-H446细胞、GA10细胞、H-460细胞
PNT1-a细胞系相关产品：DHL4细胞、GC-1细胞、MSTO-211细胞
7404细胞系相关产品：4-1st细胞、Hs 706.T细胞、Hs 821.T细胞
SK-NSH细胞系相关产品：COV-362细胞、HCC 38细胞、C4-1细胞
IMR 32细胞系相关产品：RenCa细胞、MDA-MB-134 VI细胞、H1048细胞
NCI-BL1339细胞系相关产品：Neuro-2a细胞、Tb 1-Lu细胞、NCTC1469细胞
FAK+/+细胞系相关产品：NCI-H1869细胞、Melanoma 14细胞、RD-ES细胞
A-375 Thawing人恶性黑色素瘤细胞系
BEL 7402细胞系相关产品：HTR-8/SVneo细胞、SW403细胞、NT-2细胞
MCA-205细胞系相关产品：HEK-293 c18细胞、NCI-SNU-1040细胞、Nb2a细胞
NCI-H526细胞系相关产品：P3-X63-Ag8.653细胞、HS-940-T细胞、MCMEC细胞
COV504细胞系相关产品：H341细胞、Rh30细胞、Hs 27细胞
H2342细胞系相关产品：HGE细胞、3AA细胞、MC 3T3-E1细胞
HR8348细胞系相关产品：DHL10细胞、LS174T细胞、DMS153细胞
HuH6细胞系相关产品：Mel526细胞、LC1细胞、Wistar Institute, Susan Hayflick细胞
KTC-1细胞系相关产品：RPMI 8226细胞、UMC11细胞、A 375细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞系相关产品：EFM19细胞、DHL-2细胞、U937细胞
HS-294细胞系相关产品：KPL-4细胞、RIN-m5F细胞、Huh 7.5细胞
JROECL19细胞系相关产品：LC1/Sq细胞、U118细胞、BT483细胞
Molm 14细胞系相关产品：M-O7e细胞、HCO细胞、38C-13细胞
RH-35细胞系相关产品：H-2452细胞、Psi2-DAP细胞、H498细胞
MHCC 97-H细胞系相关产品：NIT-1细胞、SW-626细胞、16HBEo-细胞
H1793细胞系相关产品：TGW-nu-1细胞、SVEC 4-10细胞、SK Mel 1细胞
A2780/CP细胞系相关产品：HGC-27细胞、Hs-746T细胞、SNU-601细胞
293T细胞系相关产品：CMT-64细胞、HL-60 clone15细胞、SMA560细胞
EJ1细胞系相关产品：SUDHL2细胞、OVCA 433细胞、SW-1463细胞
SW 1573细胞系相关产品：Sp 2817细胞、CBRH7919细胞、MDA231细胞
ETCC007细胞系相关产品：VP303细胞、Panc 08.13细胞、RCS细胞
OKAC1细胞系相关产品：P3JHR1细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、MC57细胞
HeLa S-3细胞系相关产品：HeLa 229细胞、RFL 6细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞
MDCK细胞系相关产品：SK-BR-3细胞、PNEC30细胞、293/EBNA-1细胞
NCI-H929细胞系相关产品：S3-HeLa细胞、Glioma 261细胞、NCI-H865细胞
3LL细胞系相关产品：HT-22细胞、PA-TU S细胞、SH-SY5Y Parental细胞
HUVEC-C[HUVEC]细胞系相关产品：N1S1细胞、M-07e细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞
Ej138细胞系相关产品：Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞
IGR-OV1细胞系相关产品：H1734细胞、EMT6细胞、MFD-1细胞
MEF (CF-1)细胞系相关产品：HPDE6c7细胞、RMG-I细胞、1301细胞
RL95-2细胞系相关产品：Clone 166细胞、GM03570细胞、Molm 13细胞
RBL-2H3细胞系相关产品：EFM192B细胞、KB细胞、C4-2 Bone metastatic细胞
Dysplastic Oral Keratinocyte细胞系相关产品：ACC2细胞、SK-RC-42细胞、SKMEL1细胞
Walker/LLC-WRC256细胞系相关产品：INS1-E细胞、CL1-0细胞、Vero 76 clone E-6细胞
A-375 Thawing人恶性黑色素瘤细胞系
HT 115细胞系相关产品：SBC5细胞、H2171细胞、KYSE520细胞
WM 115细胞系相关产品：FU-OV-1细胞、N-2a细胞、BT325细胞
Pro-5WgaRI3C细胞系相关产品：NCI-SNU-423细胞、NCIH69细胞、Hs 934.T细胞
B4G12细胞系相关产品：MUM2B细胞、PCI:SG231细胞、Hs-578Bst细胞
KB细胞系相关产品：T-ALL1细胞、H-2171细胞、SUM-159PT细胞
MM1细胞系相关产品：MV 4;11细胞、Tregs细胞、NIH-3T3细胞
HBZY 1细胞系相关产品：HOS-MNNG细胞、HEK-293F细胞、REC1细胞
AN3 CA细胞系相关产品：BV-2细胞、Ishikawa细胞、COLO 679细胞
H-1373细胞系相关产品：HCO细胞、CHP 212细胞、MCFs细胞
DMS 273细胞系相关产品：AN-3细胞、OCI-Ly7细胞、Hs940-T细胞
NTERA-2/D1细胞系相关产品：RM-1细胞、H-520细胞、MAVER-1细胞
"
