"BEL-7405 Thawing人肝癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
BEL-7405 Thawing人肝癌细胞系
细胞生长:贴壁
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,原因比较复杂,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳;血清使用错误或血清的品质不佳;解冻过程错误;冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心;悬浑细胞误认为死细胞;培养温度使用错误;细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟,转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离;rpm为离心机每分钟的转数;RCF(relative centrifugal force)为相对离心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞株(系)的使用,为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的,长期连续传代的细胞,不仅消耗大量的人力和物力,而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化,因而细胞失去原有的遗传特性,有时还会由于细胞污染而造成传代中断,种子丢失。因此,在实际工作中常需冻存一定数量的细胞,以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前,细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻,细胞内外的水分会很快形成冰晶,从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增高,pH值改变,部分蛋白质由于上述原因而变性,引起细胞内部空间结构紊乱,溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶,使细胞内结构成分造成破坏,线粒体肿胀,功能丢失,并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变,使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多,随冷冻温度的降低,冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤,而致细胞死亡。因此,细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分,减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质分子量小,溶解度大,易穿透细胞,可以使冰点下降,提高细胞膜对水的通透性,且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外,减少胞内形成冰结晶的机会,从而减少冰晶对细胞的损伤。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
BEL-7405 Thawing人肝癌细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
细胞形态特性:上皮细胞样
OCI AML2细胞系相关产品:MKN-45细胞、SUNE1细胞、GM00346B细胞
U031细胞系相关产品:HEL299细胞、NCIH1385细胞、CCF-STTG1细胞
HBZY-1细胞系相关产品:OCI-AML-3细胞、HSC1细胞、P-388细胞
TE 32.T细胞系相关产品:SF 767细胞、WEHI-3B细胞、C1498细胞
MDA-MB 231细胞系相关产品:HCT 116细胞、UM-UC-1细胞、HCC1806细胞
OPM2细胞系相关产品:KP-N-YN细胞、SKRC 39细胞、RSC-364细胞
MIA-PaCa-2细胞系相关产品:Dakiki细胞、HSC3细胞、HCPEpiC细胞
VA-ES-BJ细胞系相关产品:SK-Col-1细胞、SW480细胞、H.Ep. No. 2细胞
HUC-1细胞系相关产品:NCI-H187细胞、Astrocyte type I clone细胞、TE-12细胞
B16BL6细胞系相关产品:HEI193细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞、MSF细胞
HCC1187细胞系相关产品:ARIP细胞、BNL.CL2细胞、MM6细胞
SKO-007细胞系相关产品:HCC1833细胞、NBL-5细胞、HKBML细胞
CPA 47细胞系相关产品:HCC1954-BL细胞、CEM T4细胞、FHL-124细胞
BDCM细胞系相关产品:OCI/AML2细胞、Plaepi 34细胞、SUIT-2细胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞系相关产品:UACC 893细胞、PTK1细胞、HR-1细胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞系相关产品:PC 12细胞、MONO-MAC 6细胞、KYSE0030细胞
HPAF-I细胞系相关产品:KM.12细胞、HC11 Mammary Epithelium细胞、Hs 832(C).T细胞
HRIF细胞系相关产品:CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞
Huh 7.5.1细胞系相关产品:LM(TK-)细胞、SuDHL 2细胞、UM2细胞
SW579细胞系相关产品:Human ErythroLeukemia细胞、HS766T细胞、Ej138细胞
Z138细胞系相关产品:NCI-H520细胞、HeLa 229细胞、KATOIII细胞
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X63.Ag8.653细胞系相关产品:NCIH211细胞、GC9811-P细胞、NCI-BL1339细胞
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BEL-7405 Thawing人肝癌细胞系
SNU869细胞系相关产品:Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、MNNG/HOS细胞、A2780CP70细胞
TE-9细胞系相关产品:DMS-79细胞、MCF/Adr细胞、ECC10细胞
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BEL 7402细胞系相关产品:HTR-8/SVneo细胞、SW403细胞、NT-2细胞
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RC13细胞系相关产品:JF305细胞、BE2-C细胞、HSC5细胞
DoTc2 4510细胞系相关产品:COLO201细胞、SACC-83细胞、T-47-D细胞
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MB 157细胞系相关产品:UPCI:SCC090细胞、Z-138细胞、Hepatoma 22细胞
H460细胞系相关产品:Karpas 299细胞、87MG细胞、MA 104细胞
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C3H/10T1/2细胞系相关产品:JIMT-1细胞、SF763细胞、RTMC细胞
Neuro-2a细胞系相关产品:HBSMC细胞、IOSE80细胞、Madin Darby Bovine Kidney细胞
Rat 1细胞系相关产品:HMrSV5细胞、NCI-H1792细胞、ACT-1细胞
MCF 7细胞系相关产品:293-GP细胞、MyLa2059细胞、NCI-H2444细胞
BxPC-3细胞系相关产品:RPMI-7666细胞、M 1细胞、H-345细胞
NCI-H102细胞系相关产品:KHYG1细胞、B/C3T3细胞、WIL2 S细胞
SKMEL1细胞系相关产品:HL-60 Clone 15细胞、HCC1954BL细胞、CHO-Lec1细胞
253J细胞系相关产品:GM3569细胞、Mouse Podocyte Clone-5细胞、RT4P细胞
BL6细胞系相关产品:UO-31细胞、MC-38细胞、NIH:OVCAR-8细胞
BEL-7405 Thawing人肝癌细胞系
VK2/E6E7细胞系相关产品:ESC细胞、H660细胞、C17细胞
MDA415细胞系相关产品:H2135细胞、A 375细胞、HPDLF细胞
OCI-LY-18细胞系相关产品:ROS17/2.8细胞、MCA38细胞、HCC-9724细胞
Roswell Park Memorial Institute 1788细胞系相关产品:EM3细胞、SGC7901/DDP细胞、C3H10T1/2细胞
HEC-1A细胞系相关产品:Oka-C1细胞、SK Col 1细胞、OEC33细胞
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NCI-H64细胞系相关产品:HepaRG细胞、D-324 Med细胞、McA-RH7777细胞
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Colon 38细胞系相关产品:SKMEL-31细胞、Ls-174-T细胞、SkMel31细胞
CAL-51细胞系相关产品:WEHI 164细胞、HMVEC细胞、MC3T3细胞
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