"MDA-MB-231-luc Thawing人乳腺癌细胞系
细胞背景资料:MDA-MB-231来自患有转移乳腺腺癌的51岁女病人的胸水。在裸鼠和ALS处理的BALB/c小鼠中,它能形成低分化腺癌(III级)。
细胞形态:上皮细胞样
MDA-MB-231-luc Thawing人乳腺癌细胞系
细胞生长:贴壁
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MDA-MB-231-luc Thawing人乳腺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞形态特性:详见细胞说明书
OCILY19细胞系相关产品:hFOB 1.19细胞、NCIH2029细胞、Walker-256细胞
MHCC-LM3细胞系相关产品:C-28I2细胞、JROECL19细胞、Hs934T细胞
HuCCT-1细胞系相关产品:T-98细胞、AR-42J细胞、RPMI1788细胞
SK RC 20细胞系相关产品:OV1-P细胞、3T3-J2细胞、P3X63Ag8细胞
OSA细胞系相关产品:SHIN3细胞、SUDHL-4细胞、OCI-Ly07细胞
NCI-H508细胞系相关产品:293-H细胞、NCI660细胞、JVM3细胞
Calu-1细胞系相关产品:KYSE-140细胞、BCAP37细胞、NCI-BL2141细胞
PL45细胞系相关产品:4T1细胞、NHDF细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞
EA. hy 926细胞系相关产品:SUM190PT细胞、THLE-2细胞、AU 565细胞
PAI细胞系相关产品:UPCISCC090细胞、MS751细胞、H1404细胞
MuM-2C细胞系相关产品:Hs688(A)T细胞、Calu6细胞、OV2008细胞
RPMI8226/S细胞系相关产品:HFL-1细胞、SMA-560细胞、BEL7404细胞
MOLT4细胞系相关产品:HME-1细胞、VeroE6细胞、Medical University of Graz-Chordoma 1细胞
Swiss3T3细胞系相关产品:3T6-Swiss albino细胞、NCI-BL6细胞、NCIH661细胞
H4IIE细胞系相关产品:H-1975细胞、MNNG细胞、MEL-526细胞
H1105细胞系相关产品:CHP 126细胞、DMS 114细胞、SK-ML2细胞
H-2330细胞系相关产品:Soleus clone 8细胞、RL-952细胞、HEK293FT细胞
MC57细胞系相关产品:NB19-RIKEN细胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞、NPA细胞
OVCA432_Bast细胞系相关产品:NCI-A549细胞、130-T细胞、SW-1271细胞
E0771细胞系相关产品:Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、BC-3-H-I细胞、kms 11细胞
RD 2细胞系相关产品:SACCLM细胞、PANC-10-05细胞、COLO-HSR细胞
RD 2细胞系相关产品:SACCLM细胞、PANC-10-05细胞、COLO-HSR细胞
CCD841CoTr细胞系相关产品:A-72细胞、MFM223细胞、U-343细胞
MDA-330细胞系相关产品:SPC-A-1细胞、H87细胞、10RGB细胞
HuT78细胞系相关产品:P3J HR1-K细胞、MHCC 97细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞
SUPB15细胞系相关产品:SN12C-PM6细胞、HRPEpiC细胞、A 2058细胞
MDA-MB-231-luc Thawing人乳腺癌细胞系
TOV-112D细胞系相关产品:ECGI10细胞、HEK293-H细胞、Hs68细胞
PaCa2细胞系相关产品:NTera-2D1细胞、118MG细胞、OCILY19细胞
Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞系相关产品:NIH/3T3细胞、BV-173细胞、HEK/293细胞
PA1细胞系相关产品:Nb2a细胞、EJ-1细胞、K-562细胞
SNU869细胞系相关产品:Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、MNNG/HOS细胞、A2780CP70细胞
NCI-H2029细胞系相关产品:Ku812细胞、P30 OHK细胞、SK-NEP-1细胞
M14细胞系相关产品:SK MEL-28细胞、T1-73细胞、Douglas Foster-1细胞
Nb2细胞系相关产品:C-4I细胞、C32-mel细胞、U-251MG细胞
NCIH1299细胞系相关产品:H1650_CO细胞、JS1细胞、Swiss 3T6细胞
UCLA RO-81-A-1细胞系相关产品:293 EBNA细胞、Molm 13细胞、SUDHL8细胞
NCIH647细胞系相关产品:Kit 225-K6细胞、Tca-83细胞、CX1细胞
UACC 812细胞系相关产品:RL-952细胞、VMM5细胞、Tu212细胞
Hs 870.T细胞系相关产品:RPVSMC细胞、MRC5细胞、KYSE510细胞
SUPB-15细胞系相关产品:CCD-841-CoN细胞、HCT-8细胞、NCI-H446细胞
SK-N-BE(2)-M17细胞系相关产品:MAntle cell VERona-1细胞、Mono-Mac-1细胞、J111细胞
MOLT-4细胞系相关产品:HEL92.1.7细胞、RGC-5细胞、SNU668细胞
HBE 135-E6E7细胞系相关产品:SaOS细胞、HPAEpiC细胞、Clone 929细胞
H-II-E-C3细胞系相关产品:beta-TC6细胞、MDCK-2细胞、NE1细胞
Malme3M细胞系相关产品:NCIH1993细胞、MDCK2细胞、HEP3B2细胞
KPL4细胞系相关产品:GT1-1细胞、WML2细胞、ABC1细胞
M-G63细胞系相关产品:SKMel-5细胞、SUIT-2细胞、HLE-B3细胞
MBT-2细胞系相关产品:HEY-A8细胞、HT-1376细胞、EC109细胞
MS1细胞系相关产品:H1522细胞、MS-751细胞、YES-2细胞
Karpas-299细胞系相关产品:HCM细胞、SHIN-3细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞
HCT FET细胞系相关产品:NBLAN5T细胞、MDCK supertube细胞、HO1-N-1细胞
H2126细胞系相关产品:AMC-HN-8细胞、NCI-HUT-520细胞、K562/ADP细胞
Transformed Human Liver Epithelial-3细胞系相关产品:NRCC细胞、TE-1细胞、S.B.细胞
H-69细胞系相关产品:VK2 (E6/E7)细胞、E304细胞、NCI-H1048细胞
N-9细胞系相关产品:PK15细胞、MSF细胞、CG4细胞
SGC7901细胞系相关产品:Daoy细胞、Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDA-415细胞
CCD 19Lu细胞系相关产品:TE 671细胞、HCC1569细胞、H2198细胞
L-132细胞系相关产品:CAL851细胞、EVSA/T细胞、OCI/AML5细胞
HECCL-1细胞系相关产品:K422细胞、OK细胞、H-1694细胞
MDA-MB-231-luc Thawing人乳腺癌细胞系
HECCL-1细胞系相关产品:K422细胞、OK细胞、H-1694细胞
NCIH1915细胞系相关产品:SW260细胞、293细胞、MDA 435细胞
NCIH1915细胞系相关产品:SW260细胞、293细胞、MDA 435细胞
Capan 1细胞系相关产品:CAOV3细胞、BHP 10-3细胞、NCI-SNU-5细胞
87 MG细胞系相关产品:Hs888 Lu细胞、KU.812细胞、HSC-T6细胞
H82细胞系相关产品:FRTL-5细胞、H596细胞、OCM-1细胞
NEC8细胞系相关产品:EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Rca-B细胞、KYSE410细胞
MHCC97L细胞系相关产品:MESSADX5细胞、COLO 741细胞、CEM-C7细胞
RSMC细胞系相关产品:SU-DH-L5细胞、TKB1细胞、UWB1.289细胞
HEEpiC细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、BE(2)-C细胞、JCA1细胞
YAC细胞系相关产品:NUGC-2细胞、SUDHL5细胞、MCA-205细胞
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