"SNU-216 Thawing人胃癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
SNU-216 Thawing人胃癌细胞系
细胞生长：贴壁
细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SNU-216 Thawing人胃癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞形态特性：详见细胞说明书
SKNBE细胞系相关产品：PZ-HPV-7细胞、L-132细胞、H-446细胞
CAL-51细胞系相关产品：WEHI 164细胞、HMVEC细胞、MC3T3细胞
LNCaP.FGC细胞系相关产品：NB-19细胞、B10BR细胞、SW-1417细胞
HT clone H9细胞系相关产品：AsPC-1细胞、KU-19-19细胞、NCI-H2081细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞系相关产品：95D细胞、Hs 940.T细胞、UACC812细胞
UM-UC3细胞系相关产品：HEC1A细胞、H1299细胞、HD-LM-2细胞
AG 9细胞系相关产品：Ramos-RA1细胞、IAR20细胞、NCIH345细胞
HPAF细胞系相关产品：Hs 729细胞、SKMEL-24细胞、SNK1细胞
Rat Glomerular Endothelial细胞系相关产品：NCIH747细胞、JeKo-1细胞、NCI747细胞
C32 mel细胞系相关产品：MESSA-DX5细胞、C1R细胞、NGEC细胞
HCC 38细胞系相关产品：NCTC1469细胞、Ku812细胞、NCI-H2171细胞
U373细胞系相关产品：ASPC1细胞、BIC1细胞、Y-79细胞
H460细胞系相关产品：Karpas 299细胞、87MG细胞、MA 104细胞
SNU1细胞系相关产品：K-1735细胞、SNU449细胞、MM-1S细胞
Hs-852-T细胞系相关产品：U-343MG细胞、IOSE 80细胞、HEK293-FT细胞
CTV-1细胞系相关产品：P3/NS1/Ag4-1细胞、ketr 3细胞、GM00637细胞
LS174细胞系相关产品：HIBEC细胞、33604细胞、H1838细胞
alphaTC clone 6细胞系相关产品：L细胞、PK(15)细胞、Hs 683.T细胞
SUDHL-4细胞系相关产品：NCI H345细胞、NW-MEL-38细胞、H-676B细胞
MB39细胞系相关产品：Mc Ardle 7777细胞、JROECL 19细胞、NIH-3T3-L1细胞
SK-MEL-24细胞系相关产品：HL 60细胞、EM-3细胞、NuTu 19细胞
SK-MEL-24细胞系相关产品：HL 60细胞、EM-3细胞、NuTu 19细胞
OVCAR-433细胞系相关产品：MDA-MB-435 S细胞、BC3H1细胞、Hs578Bst细胞
ARPE-19细胞系相关产品：CoCL3细胞、TMK-1细胞、MDA 1386细胞
LTEP-sm 1细胞系相关产品：Mono-Mac-6细胞、UPCI-SCC-090细胞、SNU-475细胞
Y 1细胞系相关产品：MESSA/Dx5细胞、U-251-MG细胞、P3J HR-1细胞
SNU-216 Thawing人胃癌细胞系
SU-DHL1细胞系相关产品：Hs695细胞、HEC1B细胞、Mono-Mac-6细胞
207细胞系相关产品：CHOS细胞、Panc-03.27细胞、HEC1-A细胞
A-20细胞系相关产品：EFM192A细胞、NPA 87细胞、SN4741细胞
AQ-Mel细胞系相关产品：SUM149PT细胞、NCI522细胞、Jurkat E6.1细胞
F36P细胞系相关产品：MiaPaCa-2细胞、WM-266-4细胞、373MG细胞
Ramos (RA)细胞系相关产品：BALB/3T3 clone A31细胞、H19-7细胞、Nb-2细胞
LU65细胞系相关产品：130 T细胞、H2405细胞、SW 1573细胞
EAC-E2G8细胞系相关产品：OVCAR3细胞、TM-3细胞、A9 (Hamprecht)细胞
MDCK-II细胞系相关产品：C-Lu-65细胞、MN-60细胞、HCC94细胞
C12细胞系相关产品：DLM8细胞、TE13细胞、RPMI-8226细胞
SUM 102PT细胞系相关产品：H660细胞、BC-009细胞、SK-LU-1细胞
H-1105细胞系相关产品：UWB1289细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞
MGECs细胞系相关产品：SKBR-3细胞、Hs 611.T细胞、QBC(939)细胞
MiaPaCa2细胞系相关产品：HEC151细胞、CA 46细胞、KM12SM细胞
NCIH2073细胞系相关产品：BCECs细胞、L23/P细胞、ECC1细胞
HUT 125细胞系相关产品：LTEP a2细胞、TPC1细胞、SW260细胞
OVSAHO细胞系相关产品：WM-266-mel细胞、Hs683T细胞、UWB1.289+BRCA1细胞
A-204细胞系相关产品：COLO 205细胞、P31/FUJ细胞、NCI H345细胞
SKNEP1细胞系相关产品：PG-LH7细胞、BV173细胞、HT3细胞
PC615.3细胞系相关产品：HCC827细胞、LIM1215细胞、BEL7402细胞
SCL2细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞、4175细胞、TFK-1细胞
SNU398细胞系相关产品：G 401细胞、SKUT-1细胞、SK-N-BE(2)-C细胞
A-375细胞系相关产品：H647ell细胞、A.704细胞、Hs683T细胞
B16 F1细胞系相关产品：JROECL33细胞、H-1703细胞、LC-MS细胞
MOLT4细胞系相关产品：HME-1细胞、VeroE6细胞、Medical University of Graz-Chordoma 1细胞
MC57G细胞系相关产品：HTR8svn细胞、MIA Paca2细胞、HT144细胞
SNU5细胞系相关产品：NCI-SNU-C2B细胞、Hela-Ap-1细胞、HEK 293-EBNA细胞
SUSM-1细胞系相关产品：NCIH2073细胞、Hs604T细胞、MKN45细胞
U 138 MG细胞系相关产品：A375-MEL细胞、R-1059-D细胞、32D-Cl3细胞
OCI-LY-1细胞系相关产品：Hs 445细胞、L6细胞、SMMC7721细胞
PANC3.27细胞系相关产品：BT-B细胞、AU 565细胞、SNGM细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞系相关产品：RINm-5F细胞、3T3-Swiss albino细胞、EBC1细胞
Hs 688(A).T细胞系相关产品：SCC25细胞、E.G7-OVA细胞、SK LU 1细胞
SNU-216 Thawing人胃癌细胞系
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞系相关产品：H211细胞、CLL-CII细胞、bEnd.3[BEND3]细胞
AR4-2J细胞系相关产品：Epithelioma Papulosum Cyprini细胞、HNEpC细胞、HS0578T细胞
LAN1细胞系相关产品：HCE细胞、SKG-IIIa细胞、Mac-1细胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞系相关产品：H-810细胞、KAT-5细胞、MB39细胞
293T/17细胞系相关产品：SU-DHL-16细胞、IPEC1细胞、H1693细胞
IEC-6细胞系相关产品：AdHek细胞、OCI-LY-7细胞、Hs 839.T细胞
PSN1细胞系相关产品：SVEC4-10细胞、TOV21G细胞、DiFi细胞
3T3(A31)细胞系相关产品：MKN-1细胞、H-548细胞、PL-11细胞
COLO 738细胞系相关产品：T 98 G细胞、Hs 688(A).T细胞、P560细胞
Psi2 DAP细胞系相关产品：NCIH128细胞、A9(Hamprecht)细胞、ML2细胞
Li-7细胞系相关产品：NCTC clone 929细胞、Balb/3T3-4-Cl31细胞、VM-CUB-I细胞
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