"ID8 Thawing小鼠卵巢癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
ID8 Thawing小鼠卵巢癌细胞系
细胞生长：贴壁
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
ID8 Thawing小鼠卵巢癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培养基；包含１０%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%甘油的新鲜培养基或５０%细胞条件培养基和５０%含有１０%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：５０%细胞条件无血清培养基和５０%包含有７.５%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有７.５%二甲基亚砜和１０%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约２００～４００g离心５分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以１×１０(７)到５×１０(７)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约２００g离心５分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。以５×１０(６)到１×１０(６)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入４℃冰箱中，５分钟内开始冷冻步骤。细胞以１℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
细胞形态特性：详见细胞说明书
GM03569B细胞系相关产品：NCI-H1819细胞、HCC1588细胞、MOLT 3细胞
COLO 320DM细胞系相关产品：4T1.2细胞、R2C细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞
Madin Darby Canine Kidney细胞系相关产品：M20 [Human melanoma]细胞、SK-MEL5细胞、TM-4细胞
LS 180细胞系相关产品：HT-1080细胞、MODE-K细胞、H-661细胞
HDQP1细胞系相关产品：Tissue Culture-1细胞、HuP-T4细胞、Ect1/E6E7细胞
B16F1细胞系相关产品：870细胞、IPLB-Sf21细胞、BALB/3T3 cl. A31细胞
LOU-NH91细胞系相关产品：CAL-33细胞、MDA-MB-468细胞、RINm-5F细胞
MDA134细胞系相关产品：RBL 1细胞、H-1993细胞、MDCK细胞
SF126细胞系相关产品：KMH-2细胞、MCA 205细胞、MKN 7细胞
NCIH1792细胞系相关产品：HOS TE85细胞、Y3-Ag 1.2.3细胞、HCC1833细胞
BNL-CL.2细胞系相关产品：NW-MEL-38细胞、HSF细胞、P31-FUJ细胞
MDA361细胞系相关产品：HCC0038细胞、RCC 786-O细胞、QG56细胞
NTERA2-D1细胞系相关产品：TGBC11TKB细胞、H378细胞、BT-549细胞
Pt K1细胞系相关产品：Ly18细胞、PZ-HPV-7细胞、H2452细胞
H-4细胞系相关产品：MV522细胞、AE 1201细胞、YD15细胞
SK Mel 24细胞系相关产品：Earle's L cells细胞、Glioma-261细胞、SNK6细胞
NCI-H157细胞系相关产品：Tu 212细胞、SUD4细胞、CAL 12T细胞
Evsa T细胞系相关产品：SF-539细胞、U138细胞、IOSE 80细胞
SUM149-PT细胞系相关产品：MHCC-LM3细胞、Vero E-6细胞、NOMO-1细胞
MC3T3细胞系相关产品：P3-NS1/1-Ag4-1细胞、Panc 02细胞、COLO 201细胞
IPLB-Sf21细胞系相关产品：OV-2008细胞、HNTEC细胞、KYSE-510细胞
IPLB-Sf21细胞系相关产品：OV-2008细胞、HNTEC细胞、KYSE-510细胞
P3-X63.Ag8.653细胞系相关产品：MonoMac 6细胞、SU-DHL-6细胞、BEL7405细胞
HCC 94细胞系相关产品：624mel细胞、SK-MEL 28细胞、hTERT RPE-1细胞
KTA7细胞系相关产品：NuTu-19细胞、M07e细胞、QGY7701细胞
VK2 (E6/E7)细胞系相关产品：COLO-320细胞、GM0637细胞、CNE1-LUC细胞
ID8 Thawing小鼠卵巢癌细胞系
SK MEL 28细胞系相关产品：Fetal Human Colon细胞、NP69细胞、HREC细胞
Walker-Ca.256细胞系相关产品：Tu 177细胞、WSU-DLCL(2)细胞、KNS42细胞
COLO-684细胞系相关产品：DMS 273细胞、NCI-SNU-668细胞、Hs852细胞
GM00215A细胞系相关产品：HOSEpiC细胞、H2122细胞、GM02219D细胞
U-226AR1细胞系相关产品：H-1417细胞、U-937细胞、WML2细胞
HEK/293细胞系相关产品：VMM5A细胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、L-M[TK-]细胞
SNU484细胞系相关产品：Hs819T细胞、NCIH64细胞、OV-2008细胞
H1563细胞系相关产品：GM00346细胞、T98细胞、MT2细胞
GM05372E细胞系相关产品：SNU423细胞、NBL-7细胞、L5178YR细胞
COLO394细胞系相关产品：373 MG细胞、BE2-M17细胞、RGM1细胞
N1S1细胞系相关产品：NTera2 cl.D1细胞、373MG细胞、RCF细胞
CA 46细胞系相关产品：D283 Med细胞、WERI-Rb 1细胞、Colo741细胞
AX-Mel细胞系相关产品：TCMK-1细胞、OCUM-1细胞、AE 1201细胞
HUTU80细胞系相关产品：SK-LMS-1细胞、IPECJ2细胞、PCI-SG231细胞
H-1437细胞系相关产品：H-64细胞、L02细胞、PA-TU S细胞
Panc 4.03细胞系相关产品：WEHI-3细胞、RTE细胞、NCI-H2452细胞
H2228细胞系相关产品：Ocular Choroidal Melanoma-1细胞、N87细胞、210RCY3-Ag1.2.3细胞
HCC2279细胞系相关产品：HuCC-T1细胞、NCIH446细胞、LIM-1215细胞
OLN-93细胞系相关产品：SRA 01/04细胞、C3H/10T1/2细胞、NS1/1-Ag4.1细胞
OVCAR5细胞系相关产品：SK-NSH细胞、C3H10T1/2 clone8细胞、H524细胞
Hopkins-92细胞系相关产品：SKBr3细胞、H1650细胞、Panc 4.03细胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞系相关产品：GTL16细胞、T47-D细胞、MDA-468细胞
BEL 7402细胞系相关产品：HTR-8/SVneo细胞、SW403细胞、NT-2细胞
BNL 1ME A.7R.1细胞系相关产品：HCC2218细胞、SW 1573细胞、COLO 684细胞
MSTO-211细胞系相关产品：HSC2细胞、TFK1细胞、SK.MEL.2细胞
H.Ep. #2细胞系相关产品：H1792细胞、Hs 739.T细胞、COV-362细胞
RA细胞系相关产品：T47D细胞、NCIH2291细胞、MV522细胞
CAL-51细胞系相关产品：WEHI 164细胞、HMVEC细胞、MC3T3细胞
PNT-1A细胞系相关产品：SV40 MES 13细胞、A9 (Hamprecht)细胞、GMK,BSC-1细胞
SK-SH-SY5Y细胞系相关产品：QGY-7701细胞、SKO007细胞、RS4;11细胞
HEC1B细胞系相关产品：PTK 2细胞、MIMVEC细胞、OE-21细胞
KM932细胞系相关产品：T-24细胞、Caco-2细胞、HRC-99细胞
MOLT-3细胞系相关产品：HKBML细胞、NE1-E6E7细胞、BEL-7402细胞
ID8 Thawing小鼠卵巢癌细胞系
B-104细胞系相关产品：COLO-320DM细胞、SaOS细胞、RMS 13细胞
hCMEC/D3细胞系相关产品：SACC-83细胞、EBTr细胞、MN9D细胞
hCMEC/D3细胞系相关产品：SACC-83细胞、EBTr细胞、MN9D细胞
Co-115细胞系相关产品：RIN Cl-5F细胞、HCT-FET细胞、MDAMB415细胞
KE-39细胞系相关产品：Hs706T细胞、SUP-B1细胞、T47D:A细胞
HCA7细胞系相关产品：CAKI1细胞、H128细胞、Hs-606-T细胞
SUDHL6细胞系相关产品：H841细胞、RAOEC细胞、ATN-1细胞
UWB1.289细胞系相关产品：118MG细胞、NCIH196细胞、FD-LSC-1细胞
TYK-nu细胞系相关产品：SEG-1细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、HTSMC细胞
OCIAML4细胞系相关产品：NG10815细胞、A2780/Taxol细胞、3T3 clone A31细胞
786-0WT细胞系相关产品：PATU-S细胞、BXPC3细胞、TW 01细胞
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