"HCC78 Thawing人肺腺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
HCC78 Thawing人肺腺癌细胞系
细胞生长：贴壁
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCC78 Thawing人肺腺癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞形态特性：详见细胞说明书
CBRH-7919细胞系相关产品：MH-S细胞、J774A.1细胞、BT20细胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞系相关产品：T-84细胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、PA I细胞
NCI-H2347细胞系相关产品：KATO III细胞、32D/cl3细胞、KAT-5细胞
EA. hy 926细胞系相关产品：SUM190PT细胞、THLE-2细胞、AU 565细胞
HCC-1500细胞系相关产品：SKMES1细胞、Nb-2细胞、SW-1783细胞
Co 115细胞系相关产品：COLO829细胞、JHH7细胞、NCIH1688细胞
JROECL21细胞系相关产品：OsA-CL细胞、HCMEC(BL12-H)细胞、EBC-1/original细胞
ANA-1细胞系相关产品：RBE4细胞、Rat 2细胞、NCI-460细胞
SW-403细胞系相关产品：TF-1a细胞、HSC5细胞、Lewis-Lung细胞
LIPF155C细胞系相关产品：DMS-114细胞、MonoMac6细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞
OCILY-10细胞系相关产品：P3-X63-Ag8-653细胞、WM 239A细胞、Cor L51细胞
ZYM-SVEC01细胞系相关产品：EB-1细胞、HOS-143B细胞、KTCTL-140细胞
EoL-1-cell细胞系相关产品：BRL细胞、H-1048细胞、SPCA-1细胞
MDA-330细胞系相关产品：SPC-A-1细胞、H87细胞、10RGB细胞
NIHOVCAR3细胞系相关产品：FL62891细胞、Panc_04_03细胞、KYSE 450细胞
H-1770细胞系相关产品：RSC 96细胞、ABC-1细胞、FRTL-5 Cl 2细胞
MFD-1细胞系相关产品：LAPC-4细胞、JHH-7细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞
H-1573细胞系相关产品：HUCEC细胞、RCSMC细胞、SkChA-1细胞
MCF 7B细胞系相关产品：J-111细胞、CCD 1112SK细胞、Hep 2细胞
Me Wo细胞系相关产品：MDAMB453细胞、SUM 159PT细胞、SW 1417细胞
ST-2细胞系相关产品：SW 756细胞、HEK-293-H细胞、JOSK-M细胞
ST-2细胞系相关产品：SW 756细胞、HEK-293-H细胞、JOSK-M细胞
Hs 274细胞系相关产品：CFPAC-1细胞、TK-10细胞、AML 12细胞
FHC细胞系相关产品：HELA-GFP细胞、T-24细胞、S91细胞
HIBEpiC细胞系相关产品：HEK 293A细胞、Normal Rat Kidney-52E细胞、H2107细胞
A375-SM细胞系相关产品：RT4-D6-P2T细胞、HepG2细胞、NCI-H165细胞
HCC78 Thawing人肺腺癌细胞系
KMST-6细胞系相关产品：DF-1细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、NCIH441细胞
L5178Y TK+/-3.7.2c细胞系相关产品：293S细胞、A375mel细胞、H4IIEC3细胞
BTI-TN5B1-4细胞系相关产品：HASMC细胞、NTera 2/cl.D1细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞
786-O RCC细胞系相关产品：SMA 560细胞、Murine Carcinoma-38细胞、VK2/E6E7细胞
PC3M细胞系相关产品：BMSC/hBMSCs细胞、KM12SM细胞、PNT-1A细胞
L-5178-Y-R细胞系相关产品：WPE-int细胞、SW260细胞、OUMS23细胞
NCIH128细胞系相关产品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、EBTr (NBL-4)细胞、G361mel细胞
McA-RH8994细胞系相关产品：LAN1细胞、PL-45细胞、Mel624细胞
CF PAC-1细胞系相关产品：WSU-DLCL(2)细胞、NCI-H841细胞、TE12细胞
SJRH 30细胞系相关产品：NCI-H498细胞、GA-10(Clone 4)细胞、HVSMC细胞
COS-1细胞系相关产品：OACP4C细胞、H-2172细胞、CL-34细胞
PANC 203细胞系相关产品：TE4细胞、WEHI-3细胞、L-WRN细胞
Rat Chondrosarcoma Swarm细胞系相关产品：HL1细胞、HEK-293A细胞、MES 23.5细胞
V-79-4细胞系相关产品：HBZY 1细胞、C3H/10T1/2 clone 8细胞、A204细胞
COLO320-DM细胞系相关产品：HuO9细胞、RBMEC细胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞
P3/NS1/1-Ag4.1细胞系相关产品：H2444细胞、IR 983F细胞、LC1细胞
HBEpiC细胞系相关产品：RWPE-2细胞、SKO3细胞、GM03571细胞
SKLU01细胞系相关产品：WM 239细胞、MM-1S细胞、ATDC-5细胞
THP-1(ATCC)细胞系相关产品：J.E6-1细胞、BLO-11细胞、Vero 76细胞
Cloudman M3细胞系相关产品：Dami细胞、Hs600T细胞、H1650细胞
RT-112细胞系相关产品：C32-mel细胞、HeLa/DDP细胞、RCC10细胞
SKGT2细胞系相关产品：Hs 895 T细胞、SK LU 1细胞、TE 32细胞
HDMEC细胞系相关产品：Hs895.T细胞、GLC-82细胞、Karpas 422细胞
LNCaP FGC细胞系相关产品：H446细胞、SMC-1细胞、H1092细胞
HemECs细胞系相关产品：Beta-TC-6细胞、H-1184细胞、COS-7细胞
IFRS1细胞系相关产品：SNU-423细胞、GM06141细胞、TE13细胞
U-373MG细胞系相关产品：Astrocyte type I clone细胞、FU-97细胞、DoTc2 4510细胞
YES2细胞系相关产品：MDAMB175细胞、WM2664细胞、H-295R细胞
TK10细胞系相关产品：KY70细胞、SK HEP-1细胞、NCI-H1651细胞
Evsa-T细胞系相关产品：PC-9S1细胞、C42细胞、NCI-H1703细胞
MT2细胞系相关产品：HS-294-T细胞、BIU87细胞、DMS273细胞
N1E-115细胞系相关产品：87MG细胞、MDA-MB-175-VII细胞、AML193细胞
L5178YR细胞系相关产品：D10细胞、L M (TK-)细胞、NCIH748细胞
HCC78 Thawing人肺腺癌细胞系
EVSAT细胞系相关产品：MB49细胞、HCC0044细胞、PVEC细胞
OCI Ly10细胞系相关产品：SCL-1细胞、HD-LM-2细胞、A2780-CP细胞
HeLa/S3细胞系相关产品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、NCTC1469细胞、GP-293细胞
NCIH209细胞系相关产品：LA-N-5细胞、Capan 1细胞、VE细胞
CAL-27细胞系相关产品：CAL-51细胞、My-La 2059细胞、NCI-747细胞
P388细胞系相关产品：KG1细胞、H-378细胞、NH-6细胞
NCI H747细胞系相关产品：NKL细胞、HeLa-S3细胞、Colon 26细胞
b.End3细胞系相关产品：Calu 6细胞、C1498细胞、8305-C细胞
RCC-10细胞系相关产品：SKCO-1细胞、OCI-Ly 18细胞、NCIH1355细胞
UMUC-14细胞系相关产品：HCAEC细胞、NS-20Y细胞、CTLL2细胞
SRA 01/04细胞系相关产品：HN4细胞、CEM-0细胞、MC38细胞
"
