"D407 Thawing人视网膜色素上皮细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
D407 Thawing人视网膜色素上皮细胞系
细胞生长：贴壁
如何进行细胞复苏：１)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入３７℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；２)从３７℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加１０倍以上培养液，混匀；３)离心，１０００rpm，５min；４)弃去上清液，加入含１０%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，３７℃培养箱静置培养；５)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】１)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但为对数生长期细胞。在冻存前一天换一次培养液；２)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做好防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；３)冻存和复苏用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放３７度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有３７度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞培养无菌操作步骤和注意事项：１.打开无菌工作台及净化室的紫外灯，消毒半小时以上。２.进入净化室前先关闭紫外灯，打开超净台风机，等待３０min以上，以排尽臭氧。３.穿好隔离衣，戴好口罩，帽子。４.风淋２分钟。５.０.１%水泡手，擦干。６.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管，滴管，试管，培养瓶等均事先灭菌。７.打开各类瓶盖前先过火，以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰，镊子使用前应经火焰烧灼。８.水平式风机的超净台，应使瓶口斜置，应尽量避免瓶口敞开直立。９.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系；吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口０.５cm，避免伸入培养瓶口或试管口；以防止细胞系的互相混杂污染。１０.漏在培养瓶上或台上的液体，立即用酒精棉球擦净。１１.操作完毕后恢复工作台面。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
D407 Thawing人视网膜色素上皮细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞形态特性：详见细胞说明书
NK-92细胞系相关产品：WPMY1细胞、CAL-62细胞、MDA-MB-361细胞
U-2OS细胞系相关产品：RT 112细胞、OLN93细胞、NS653细胞
HUVEC细胞系相关产品：QG-56细胞、HCC0078细胞、CL1-5细胞
GP5d细胞系相关产品：SKES-1细胞、OCI-AML2细胞、Vero细胞
Panc 02细胞系相关产品：T47-D细胞、Hs675T细胞、Pan02细胞
C666-1细胞系相关产品：AM细胞、WI-38细胞、AU-Mel细胞
NPA87细胞系相关产品：DU 145细胞、Sc-1细胞、SHEP1细胞
C666-1细胞系相关产品：AM细胞、WI-38细胞、AU-Mel细胞
MNNG细胞系相关产品：I90细胞、Clone 929细胞、SW 839细胞
CCD19-Lu细胞系相关产品：UCD-MLA-144细胞、NG 108-15细胞、AAV-293细胞
RC-K8细胞系相关产品：HEK293-FT细胞、Molm 14细胞、KLN205细胞
H2291细胞系相关产品：RGC-6细胞、H841细胞、HCV-29细胞
HEK293EBNA细胞系相关产品：OACP4 C细胞、NCIH2110细胞、3AA细胞
Michigan Cancer Foundation-7细胞系相关产品：WM-239细胞、Hs 888Lu细胞、SW-13细胞
NK-92细胞系相关产品：WPMY1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞、SU-DHL-4细胞
NCI H716细胞系相关产品：OCI-Ly10细胞、NU-GC-2细胞、SUDHL6细胞
GI-1细胞系相关产品：SUDHL-10细胞、SW-1088细胞、National Medical Center-Glioma 1细胞
NF639细胞系相关产品：MKN74细胞、MDAPCa-2b细胞、SJRH 30细胞
CPA 47细胞系相关产品：HCC1954-BL细胞、CEM T4细胞、FHL-124细胞
MC9细胞系相关产品：CCD1112Sk细胞、KYSE-180细胞、0V-1063细胞
TCC-SUP细胞系相关产品：NTERA-2/D1细胞、COLO824细胞、SK-RC-20细胞
HCC 38细胞系相关产品：NCTC1469细胞、Ku812细胞、NCI-H2171细胞
CHO-Lec1细胞系相关产品：H1963细胞、H4-II-EC3细胞、A2780CP细胞
JKT-1细胞系相关产品：HEYA8细胞、NCI-SNU-449细胞、HCC0366细胞
Roswell Park Memorial Institute 7951细胞系相关产品：NCI-ADR-RES细胞、SKN-AS细胞、A-375.S2细胞
NOZC-1细胞系相关产品：F442A细胞、MFE-280细胞、Hs 636.T细胞
D407 Thawing人视网膜色素上皮细胞系
Hs-600-T细胞系相关产品：H-1781细胞、TMK1细胞、FM88细胞
HCC0202细胞系相关产品：B-CPAP细胞、HT-29/CX-1细胞、OV-1063细胞
A7r5细胞系相关产品：SKCol1细胞、HuH6细胞、NCI-H64细胞
OCIAML3细胞系相关产品：BetaTC6细胞、GM2132细胞、HS-5细胞
SK-Mel1细胞系相关产品：PC-3M-2B4细胞、OVCAR-433细胞、Ketr3细胞
Institute for Medical Research-90细胞系相关产品：CACO2细胞、NCIH2009细胞、NCI-H322T细胞
SKO007细胞系相关产品：L1210细胞、BL-6细胞、HNE-3细胞
A-875细胞系相关产品：OVCA-433细胞、Helacyton gartleri细胞、MIA Paca2细胞
Human Fetal Thymocyte-8810细胞系相关产品：HCC-1569细胞、H-69细胞、KATO III细胞
Potorous tridactylus Kidney 1细胞系相关产品：Caco-2BBe细胞、Eca-109细胞、H157细胞
MOLP8细胞系相关产品：D341MD细胞、LX-2细胞、McCoy B细胞
McA-RH8994细胞系相关产品：LAN1细胞、PL-45细胞、Mel624细胞
MES-13细胞系相关产品：OSK-1细胞、CTLL(2)细胞、Calu3细胞
PK-136细胞系相关产品：NCI-H1876细胞、NCI-H295细胞、DHL-8细胞
CALU 1细胞系相关产品：GM00637I细胞、NCI H226细胞、Hs 695.T细胞
H-727细胞系相关产品：293A细胞、U251细胞、PK-13细胞
no-11细胞系相关产品：MiaPaca.2细胞、KMB-17细胞、HRIF细胞
HeLa细胞系相关产品：Panc2_03细胞、SK-N-SH细胞、PC-9S1细胞
T-CAM2细胞系相关产品：SUM-52PE细胞、Clone Y1细胞、H1993细胞
Gejiu Lung Carcinoma-82细胞系相关产品：NCI-H1395细胞、87 MG细胞、OCILY-3细胞
alpha TC1 clone 6细胞系相关产品：Leukemic 1210细胞、COLO-320-HSR细胞、H19-7细胞
LC1/Sq细胞系相关产品：Hs 822.T细胞、Be-Wo细胞、HCC-1806细胞
LNCaP细胞系相关产品：Y79细胞、CCK81细胞、PE/CA-PJ34细胞
DKMG细胞系相关产品：NR8383.1细胞、ECC 12细胞、Hs821T细胞
NCI-H774细胞系相关产品：UMUC14细胞、BE2_C细胞、CCC-HEL-1细胞
Central Adrenergic TH-expressing a细胞系相关产品：MPC-11细胞、H-128细胞、LAPC4细胞
HPF细胞系相关产品：2B4-L细胞、SVHUC细胞、Hepatoma-22细胞
H-358细胞系相关产品：PC-3M细胞、H-2126细胞、MG-63细胞
MDA-134细胞系相关产品：CV1细胞、OACP4C细胞、LLC细胞
HCT8细胞系相关产品：P3 NS1 Ag4细胞、G361mel细胞、MDA MB231细胞
SMC-1细胞系相关产品：GM07404A细胞、FRTL5细胞、Caki-2细胞
293 EBNA细胞系相关产品：Calu 3细胞、SUM159细胞、B 95-8细胞
AR4-IP细胞系相关产品：S3 HeLa细胞、Scott and White No. 13细胞、Rat Fetal Lung-6细胞
D407 Thawing人视网膜色素上皮细胞系
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞系相关产品：NHEK细胞、T-HEECs细胞、SV40-MES13细胞
E.G7-OVA细胞系相关产品：EOC20细胞、CAKI 1细胞、AD-293细胞
SEM细胞系相关产品：LTEP-a2细胞、OC-3-VGH细胞、WM115细胞
F98细胞系相关产品：MC-CAR细胞、YES 2细胞、YAC-1细胞
DHL-8细胞系相关产品：NS-1细胞、CAL-51细胞、PTK 2细胞
HeLa S3细胞系相关产品：NCI-H82细胞、H676B细胞、Mink细胞
P3/X63/Ag8.653细胞系相关产品：TE-5细胞、CTLL2细胞、CD18/HPAF细胞
H-1373细胞系相关产品：HCO细胞、CHP 212细胞、MCFs细胞
MDA2B细胞系相关产品：WC00079细胞、LC1/Sq细胞、NCTC clone 1469细胞
KMB 17细胞系相关产品：MCF10A细胞、COV362细胞、SNU216细胞
MZCRC1细胞系相关产品：PNT-1A细胞、YD15细胞、HLF-a细胞
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