"TE-15 Thawing人食管癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
TE-15 Thawing人食管癌细胞系
细胞生长:贴壁
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
TE-15 Thawing人食管癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞形态特性:上皮样
3T3 L1细胞系相关产品:NL20SV细胞、IEC6细胞、NALM 6细胞
Hs 940.T细胞系相关产品:CoC1细胞、TE10细胞、MEF (CF-1)细胞
NCI-SNU-216细胞系相关产品:KPL4细胞、ANA-1细胞、H4-II-EC3细胞
GM02219C细胞系相关产品:MCF 10A细胞、Lec1细胞、RD 2细胞
SK-MEL-MeWo细胞系相关产品:SP2-0-Ag14细胞、Ly8细胞、NEC细胞
H-4细胞系相关产品:MV522细胞、EOC20细胞、RBL 1细胞
TE-671细胞系相关产品:LM8细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞、ROS 17/28细胞
ES-2细胞系相关产品:OCI/AML-2细胞、GMK,BSC-1细胞、TOV-112细胞
PA-1细胞系相关产品:Becker细胞、NUGC-2细胞、NCIH1819细胞
ARIP细胞系相关产品:AR4-2J细胞、H1666细胞、CFSC-2G细胞
OVCAR8细胞系相关产品:RCC4细胞、SKRC-39细胞、Panc4.03细胞
HCC1500细胞系相关产品:OEC33细胞、HTR-8/SV neo细胞、H1417细胞
SW900细胞系相关产品:NCI-H510细胞、HCA7细胞、BxPC-3细胞
NCI-H838细胞系相关产品:hTERT-RPE-1细胞、R1610细胞、Okayama University Medical School-23细胞
SW1222细胞系相关产品:HRA 19细胞、Ketr3细胞、Vero E-6细胞
V79-GalK1细胞系相关产品:GM05372E细胞、Hs 695T细胞、L cells细胞
GM03573细胞系相关产品:L5178Y TK+/-3.7.2c细胞、GM03320细胞、H-2141细胞
Mel-624细胞系相关产品:CCK81细胞、OCI-Ly8细胞、KYSE-30细胞
Hs-578-T细胞系相关产品:H2196细胞、OKa-C-1细胞、H-2228细胞
VMRCRCZ细胞系相关产品:BE(2)-C细胞、SL1细胞、NU-GC-3细胞
OVCAR 432细胞系相关产品:ME16C细胞、Sarcoma OSteogenic-2细胞、HEI193细胞
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H-2023细胞系相关产品:Kelly细胞、NCI-H102细胞、Reh细胞
SW480细胞系相关产品:HPAEpiC细胞、SK-LMS-1细胞、TK-1细胞
VM-CUB1细胞系相关产品:HSC4细胞、MSCs(mUCMSCs)细胞、SW-948细胞
TOV-21G细胞系相关产品:H22-H8D8细胞、H865细胞、SNU-251细胞
TE-15 Thawing人食管癌细胞系
OCI-Ly 18细胞系相关产品:8305C细胞、F81细胞、P-3J细胞
HITT15细胞系相关产品:CNE-1细胞、Lu-65细胞、HR-1细胞
NS20Y细胞系相关产品:MA-782细胞、bEnd.3[BEND3]细胞、Mc Coy细胞
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SNU119细胞系相关产品:MDA1386细胞、MUTZ-3细胞、CL1-0细胞
GM03320D细胞系相关产品:TK.10细胞、HLEB3细胞、RH35细胞
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FAK+/+细胞系相关产品:NCI-H1869细胞、Melanoma 14细胞、RD-ES细胞
RPMI6666细胞系相关产品:CCRF/CEM-C7细胞、MPP89细胞、DH 82细胞
University of Arizona Cell Culture-893细胞系相关产品:GM2132细胞、SKBr3细胞、Sp2/O细胞
RPMI-7666细胞系相关产品:T HEECs细胞、NTERA-2/D1细胞、Hs281T细胞
SNU-668细胞系相关产品:Mac-1细胞、EU-4细胞、NCI-H660细胞
624 MEL细胞系相关产品:SNUC1细胞、CCD-841CoN细胞、COLO-684细胞
U-343-MG细胞系相关产品:OUMS-27细胞、CMT 93细胞、H1568细胞
Strain KB细胞系相关产品:6-T CEM细胞、RPMI 8226细胞、H-1792细胞
IMR90细胞系相关产品:Natural Killer-92细胞、Line 522细胞、COLO684细胞
BNCL2细胞系相关产品:H647细胞、IGR.OV1细胞、U-251_MG细胞
WiDr-TC细胞系相关产品:Los Angeles Prostate Cancer-4细胞、SUM-190PT细胞、WIL2 Secreting细胞
NBL-2细胞系相关产品:NPC-039细胞、Farage Original Line细胞、EFM192B细胞
MV4:11细胞系相关产品:P30OHK细胞、K1细胞、BXPC3细胞
KMS18细胞系相关产品:NS20-Y细胞、UCLA NPA-87-1细胞、JHH-7细胞
FDCP-1细胞系相关产品:M21细胞、HCC1599细胞、GT1-1细胞
BMF细胞系相关产品:TK10细胞、SW 1990细胞、N9细胞
Rin-M-5F细胞系相关产品:HuP-T3细胞、HCC-1806细胞、EOC-20细胞
P19细胞系相关产品:KYSE140细胞、LN-18细胞、L 363细胞
H-1341细胞系相关产品:A1847细胞、MDBK (NBL-1)细胞、D-341Med细胞
MDA1386细胞系相关产品:BT-549细胞、CEM/C1细胞、MN-60细胞
SKNMC细胞系相关产品:KU812-F细胞、BC-028细胞、CAL 39细胞
TE-15 Thawing人食管癌细胞系
THP1细胞系相关产品:HBVP细胞、WM115-mel细胞、MUTZ3细胞
LNCaP.FGC细胞系相关产品:NB-19细胞、B10BR细胞、SW-1417细胞
LNCaP.FGC细胞系相关产品:NB-19细胞、B10BR细胞、SW-1417细胞
HCC-1954细胞系相关产品:CMECs细胞、P3-X63Ag8细胞、EST50细胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞系相关产品:NFHIOSE-29细胞、A 2058细胞、H-2347细胞
OCI/AML-2细胞系相关产品:HCC94细胞、SKNFI细胞、HC11细胞
QGY细胞系相关产品:CCD-1112sk细胞、IPLB-SF-21细胞、HCC-4006细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞系相关产品:Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞、Okayama University Medical School-23细胞、FHL124细胞
RH-35细胞系相关产品:H-2452细胞、Psi2-DAP细胞、H498细胞
NCIH1694细胞系相关产品:GC1-SPG细胞、S3-HeLa细胞、Hs 636 T细胞
SNU-869细胞系相关产品:P 3 HR 1细胞、Uhth-74细胞、T-98细胞
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