"Onda 11 Thawing人脑神经胶质瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
Onda 11 Thawing人脑神经胶质瘤细胞系
细胞生长：贴壁
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Onda 11 Thawing人脑神经胶质瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞形态特性：上皮样
CEM T4细胞系相关产品：DHL5细胞、Douglas Foster-1细胞、NPA 87细胞
HNE-1细胞系相关产品：SP-2细胞、DMS 79细胞、NCI-SNU-119细胞
L-cells细胞系相关产品：UPCI-SCC-090细胞、HCT 116细胞、Hopkins-92细胞
Hepa-RG细胞系相关产品：SF 763细胞、DHL4细胞、NCIH1373细胞
NBLAN5T细胞系相关产品：KFB细胞、HEL-299细胞、CEK细胞
PG-4 (S+L-)细胞系相关产品：SB细胞、MCF7细胞、COC1/CDDP细胞
RASMCs细胞系相关产品：U2932细胞、JIMT1细胞、SKNBE2C细胞
Super Tube细胞系相关产品：SCCVII/St细胞、COR-L23/P细胞、TE5细胞
210RCY3-Ag1.2.3细胞系相关产品：C32 [Human melanoma]细胞、QSG-7701细胞、NCIH650细胞
BALB/3T3 (clone A31)细胞系相关产品：OVCAR5细胞、MUTZ3细胞、BNL CL2细胞
MDAPCa2b细胞系相关产品：TE3细胞、JM1细胞、Lieming Xu-2细胞
SW 527细胞系相关产品：UMUC-3细胞、H1435细胞、A375-S2细胞
HCC0015细胞系相关产品：COV434细胞、IBMF-7细胞、IMCD-3细胞
GTL-16细胞系相关产品：H35 Reuber细胞、SNG-M细胞、Colo205细胞
Hs 739.T细胞系相关产品：U138-MG细胞、MV-522细胞、OSRC2细胞
YD15细胞系相关产品：Hs940T细胞、Panc-08.13细胞、H-322细胞
18G3.cl 1细胞系相关产品：SNU-216细胞、NCI H157细胞、SKGIIIA细胞
H-747细胞系相关产品：HPC-Y5细胞、H727细胞、VMRC-LCD细胞
SF 295细胞系相关产品：MDA-MB 453细胞、SW-1116细胞、HuP-T3细胞
IPEC-J2细胞系相关产品：NT2细胞、Det. 562细胞、ACC-M细胞
32D CL3细胞系相关产品：NCI-H87细胞、Colo-201细胞、DAKIKI Clone 1细胞
HREC细胞系相关产品：H-1672细胞、J.E6-1细胞、PLC-PRF-5细胞
MeT-5A细胞系相关产品：A-549细胞、SK-ES1细胞、PANC 327细胞
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OVISE细胞系相关产品：HCC1954BL细胞、H2087细胞、HM细胞
Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞系相关产品：NIH/3T3细胞、BV-173细胞、HEK/293细胞
Onda 11 Thawing人脑神经胶质瘤细胞系
201T细胞系相关产品：Fetal Bovine Heart Endothelial细胞、KALS-1细胞、MDBK (NBL-1)细胞
Lewis Lung细胞系相关产品：WEHI231细胞、UMNSAH/DF#1细胞、LIXC-002细胞
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Rat-2细胞系相关产品：KMS18细胞、Kit225-K6细胞、526细胞
FT-293细胞系相关产品：B104 [Rat neuroblastoma]细胞、ARH-77细胞、NPA87-1细胞
DMS-53细胞系相关产品：HPDEC细胞、Hs 695.T细胞、HL-7702细胞
OV1/P细胞系相关产品：CA46细胞、MDAMB435细胞、CCD18细胞
SP2细胞系相关产品：CCD1095Sk细胞、SW 13细胞、HPB-ALL细胞
OVCAR 5细胞系相关产品：Nb-2细胞、MTC-TT细胞、SW527细胞
87 MG细胞系相关产品：Hs888 Lu细胞、KU.812细胞、HSC-T6细胞
PLA801C细胞系相关产品：MBT-2细胞、CCD-19Lu细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞
FLC7细胞系相关产品：GM00346B细胞、OVCAR8细胞、Nb2细胞
A9 (Hamprecht)细胞系相关产品：HLF细胞、CFSC-2G细胞、HEK293S细胞
HFLS-OA细胞系相关产品：HFF-1细胞、L5178-R细胞、COV 434细胞
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KU 19-19细胞系相关产品：Bovine Turbinate细胞、NCIH2141细胞、Caco-2BBe细胞
Onda 11 Thawing人脑神经胶质瘤细胞系
EA.hy 926细胞系相关产品：RAMSCs细胞、SKMel-5细胞、HEI-193细胞
EOC 20细胞系相关产品：SK-N-BE(1)n细胞、HRMC细胞、CORL23细胞
NBL-4细胞系相关产品：UMRC-2细胞、Simpson细胞、NCI-H498细胞
NIH3T3-L1细胞系相关产品：KE 37细胞、Hs294细胞、HCC38细胞
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HuPT3细胞系相关产品：LU165细胞、624-mel细胞、COLO-738细胞
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CFPAC1细胞系相关产品：PJ34细胞、143B TK-细胞、G-402细胞
32D.cl3细胞系相关产品：Mouse Podocyte Clone-5细胞、LS-411N细胞、QBC939细胞
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