"NCM460 Thawing结直肠腺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
NCM460 Thawing结直肠腺癌细胞系
细胞生长：贴壁
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCM460 Thawing结直肠腺癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
细胞学在生命科学科中起着至关重要的作用，近年来细胞学蓬勃发展，并取得了重大的进展，细胞实验室的构建也是各个院校生物学科必备的实验室。细胞实验谨慎复杂，需要的实验设备种类繁多，下面就一些动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍：CO２培养箱是细胞培养的必备仪器，它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境，如适宜的温度、湿度、酸碱度、O２浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染，因此，CO２培养箱的灭菌和抑菌能力就显得尤为重要。纯水系统：细胞培养用水一般要求双蒸水，实际上普通蒸馏水经玻璃器皿中按标准方法蒸馏二次得到的双蒸水是不能满足要求的，而且水中的内毒素直接参与细胞凋亡，血清中内毒素含量越低，对细胞毒性越小，越利于细胞的生长和传代;内毒素含量过高，会直接导致细胞提前老化。因此建议配置正式的水纯化系统。超净工作台/生物安全柜：细胞培养对无菌环境要求很高，在细胞操作时，一般需要在１００级空气质量条件下进行，因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。液氮罐：为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此环境中，一般细胞可以保存十年具有活性。超低温冰箱：细胞的冻存过程需要一系列程序降温，一般４℃下存放３０min，转放-２０℃ １ hour，再转入-７０至-８０℃过夜，之后才可以转移到液氮内(-１９６℃)，这时就必须配备一台-８６℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月，对于不需要长期冻存的细胞，可暂时放于超低温冰箱保存。恒温水浴：从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于３７℃水浴中快速复苏之后才传代培养，因此，恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。离心机：细胞培养需要离心收集传代细胞，所以需要配置低速的常温离心机，对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。移液器和细胞培养的大量耗材：细胞实验中有大量频繁的移液操作，因此各种微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各类细胞培养板、细胞培养瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量极大。除上述仪器外，高压灭菌锅、倒置显微镜也是细胞培养的必备仪器，发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
细胞形态特性：详见细胞说明书
BNL.1ME A.7R.1细胞系相关产品：NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞
Mv 1 Lu细胞系相关产品：Sf-21细胞、C4-1细胞、RL-65细胞
NCIH1693细胞系相关产品：C4-2 B细胞、Metastatic Variant-522细胞、COLO-320DM细胞
BE2-M17细胞系相关产品：COLO680N细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞、SW1222细胞
BE(2)-C细胞系相关产品：NCI-H209细胞、MESSA/Dx5细胞、COLO679细胞
H-EMC-SS细胞系相关产品：BSC-40细胞、HS 683T细胞、U-373 MG细胞
U-373 MG细胞系相关产品：L-132细胞、Huh7.5.1细胞、GS9L细胞
TCCPAN2细胞系相关产品：HLEC细胞、QGP-1细胞、OP9细胞
HEP3B2细胞系相关产品：Hos TE-85细胞、H647细胞、HMSC细胞
ACCM细胞系相关产品：Rat Skin 1细胞、143B细胞、SW626细胞
NTera 2/cl.D1细胞系相关产品：H-1155细胞、OVCAR432细胞、ssMCF-7细胞
IGROV 1细胞系相关产品：HDF-a细胞、NCI-Hut 125细胞、OLN-93细胞
GM12878细胞系相关产品：KM-12细胞、COR-L26细胞、HDLM2细胞
Farage OL细胞系相关产品：F-36P细胞、SK-RC 52细胞、SK-MEL5细胞
PTK2细胞系相关产品：JIII细胞、293-GP细胞、H-2444细胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞系相关产品：Fortner's melanotic melanoma #3细胞、OVSAHO细胞、PL45细胞
P3HRI细胞系相关产品：SCL I细胞、CCF-STTG1细胞、MDST8细胞
HGF-1细胞系相关产品：PAN 02细胞、SNU-869细胞、JIMT-1细胞
H-2172细胞系相关产品：B16-F10--RED细胞、H341细胞、GM04671细胞
TO 175.T细胞系相关产品：RAW264.7细胞、HCC70细胞、SCL2细胞
624mel细胞系相关产品：COLO206细胞、K-562细胞、HUT-28细胞
624mel细胞系相关产品：COLO206细胞、K-562细胞、HUT-28细胞
KTCTL-140细胞系相关产品：C518细胞、COLO 684细胞、H-1954细胞
T24细胞系相关产品：KCL22S细胞、GA-10细胞、UCLA-RO 81细胞
A1847细胞系相关产品：NCI-H345细胞、NCI-H647细胞、P-2003细胞
CORL26细胞系相关产品：WM-239A细胞、KMS11细胞、MDAPC2B细胞
NCM460 Thawing结直肠腺癌细胞系
IOSE-Mar细胞系相关产品：4T1-A细胞、GM02132细胞、SEG1细胞
SKNBE细胞系相关产品：PZ-HPV-7细胞、L-132细胞、H-446细胞
HepG2/C3A细胞系相关产品：SUM-102PT细胞、HUCCT1细胞、LS411细胞
GH 3细胞系相关产品：HLCL9B10细胞、SP-2/0-AG14细胞、SU-DHL2细胞
VK2 (E6/E7)细胞系相关产品：COLO-320细胞、GM0637细胞、CNE1-LUC细胞
Murine Carcinoma-38细胞系相关产品：SNU-739细胞、95-D细胞、87MG细胞
HDLM-2细胞系相关产品：MHCC-97细胞、D407细胞、H2106细胞
MCF7-GFP细胞系相关产品：P3/NS-1细胞、SW 1353细胞、CCRF-CEM C1细胞
RERFLCMS细胞系相关产品：DI TNC-1细胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞、CV-1 in Origin Simian-1细胞
MAC1细胞系相关产品：MuM-2B细胞、HCC-1428细胞、SACC-LM细胞
NCIH1618细胞系相关产品：CFSC-2G细胞、LAN1细胞、KP-N-YN细胞
SKGIIIA细胞系相关产品：Strain L-929细胞、MDAMB415细胞、H1672细胞
Madison细胞系相关产品：RF/6A细胞、SF 126细胞、CBRH7919细胞
COLO206细胞系相关产品：NALM-6-M1细胞、H-II-E-C3细胞、SU-DHL-16细胞
MKN45细胞系相关产品：TE-671细胞、MCMEC细胞、SVG(P12)细胞
Hs863T细胞系相关产品：NCIH1836细胞、LC-1细胞、RDES-1细胞
GA-10细胞系相关产品：NIH3T3-L1细胞、HIEC-6细胞、K1细胞
NCI-SNU-407细胞系相关产品：CAMA1细胞、UC-3细胞、H-2009细胞
OVCAR-420细胞系相关产品：LICR-HN-6细胞、MDA435细胞、SNU-216细胞
RIN-m5F细胞系相关产品：NCIN87细胞、CCC-HHM-2细胞、639V细胞
MFM223细胞系相关产品：TMD8细胞、Hepatoma 22细胞、P3J-HR-1细胞
NCI-H2347细胞系相关产品：KATO III细胞、32D/cl3细胞、KAT-5细胞
HEL92.1.7细胞系相关产品：MLMEC细胞、MDA157细胞、GM05372细胞
GCT细胞系相关产品：BRL-3A细胞、M1细胞、EFM-192B细胞
MGC-803细胞系相关产品：NMC-G1细胞、Leukemic 1210细胞、SKMEL-24细胞
P3/NSI/1-AG4-1细胞系相关产品：SW 1088细胞、Alexander细胞、CAL-148细胞
HS-729细胞系相关产品：Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞、SKNMC细胞、RPMI 6666细胞
Ramos.2G6.4C10细胞系相关产品：Hepa1-6细胞、NCI-H1915细胞、GC-1 spg细胞
FD-LSC-1细胞系相关产品：DI-TNC1细胞、DK-MG细胞、C127细胞
Cates 1B细胞系相关产品：KP2细胞、67NR细胞、A549细胞
CCF-STTG1细胞系相关产品：MT-2J细胞、ME 180细胞、NCI-H1184细胞
ETCC007细胞系相关产品：VP303细胞、Panc 08.13细胞、RCS细胞
HFLS-RA细胞系相关产品：Evsa-T细胞、J774 A.1细胞、RAW 264.7细胞
NCM460 Thawing结直肠腺癌细胞系
COLO-741细胞系相关产品：HPAF2细胞、Swiss/3T3细胞、MDA-435细胞
KM12 SM细胞系相关产品：Madin Darby Bovine Kidney细胞、SCH细胞、GAK细胞
KM12 SM细胞系相关产品：Madin Darby Bovine Kidney细胞、SCH细胞、GAK细胞
Hs611T细胞系相关产品：B16-F0细胞、MFD-1细胞、NCIH1385细胞
Mouse INsulinoma 6细胞系相关产品：U251MG细胞、H1436细胞、WI38细胞
HTR-8/SV-neo细胞系相关产品：T24细胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞、H1666_DA细胞
MNNG-HOS (Cl#5)细胞系相关产品：P31-FUJ细胞、HCGC细胞、Hi-5细胞
HEK-EBNA细胞系相关产品：SK-ES细胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞
Clone 166细胞系相关产品：CCD-33Co细胞、COLO 320F细胞、SV40 MES 13细胞
PC3M-1E8细胞系相关产品：CEMx721.174.T2细胞、MC3T3-E1 Subclone 4细胞、Hs839.T细胞
AR4-IP细胞系相关产品：S3 HeLa细胞、Scott and White No. 13细胞、Rat Fetal Lung-6细胞
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