"NCI-H1299 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料：这株细胞来源于一个淋巴结转移。患者接受了初期放疗。细胞均一性的部分缺失p５３蛋白，并缺少p５３蛋白表达。细胞可以合成０.１pmol/毫克蛋白的NMB蛋白，而不合成促胃液释放肽(GRP)。
细胞形态：上皮细胞样
NCI-H1299 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
细胞生长：贴壁
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代；３天传代一次。
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H1299 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞形态特性：上皮样；多角形
UMUC-3细胞系相关产品：P388D1细胞、Psi-2 DAP细胞、MOLT 16细胞
IHC-ST1细胞系相关产品：Be-Wo细胞、H-3255细胞、HPC-Y5细胞
190PT细胞系相关产品：Hs 888.T细胞、OCM1A细胞、Calu 3细胞
MDA231-LM2细胞系相关产品：NCI H716细胞、MA-782细胞、Reuber H-35细胞
Neuro 2a细胞系相关产品：A10细胞、HCC-95细胞、OLN 93细胞
Anip 973细胞系相关产品：OE21细胞、CCD-966SK细胞、Co 115细胞
Human Hepatocyte Line 5细胞系相关产品：COLO206F细胞、NB.4细胞、Huh7.5细胞
PC-3/M细胞系相关产品：184A1细胞、NCM356细胞、H1155细胞
SU-DH-L5细胞系相关产品：PC 61细胞、RetroPack PT67细胞、EBTr细胞
NIE 115细胞系相关产品：B16-F10-BL6细胞、Bac1 2F5细胞、NCIH1395细胞
KASUMI1细胞系相关产品：9L细胞、Tca-8113细胞、NCI-H295R细胞
Hs 343.T细胞系相关产品：TN5B14细胞、HKC细胞、V79-1细胞
686LN-M4e细胞系相关产品：HSC-2细胞、Dx5细胞、786-O RCC细胞
Sp 2/0-Ag 14细胞系相关产品：SHP77细胞、MC3T3E1细胞、MX1细胞
Caco-2/BBe细胞系相关产品：TB-1 Lu细胞、PLC-PRF-5细胞、E6-1细胞
H-2228细胞系相关产品：VB细胞、Y-1细胞、SK MEL 5细胞
UMUC-14细胞系相关产品：HCAEC细胞、NS-20Y细胞、CTLL2细胞
H82细胞系相关产品：FRTL-5细胞、H596细胞、OCM-1细胞
CCD-966SK细胞系相关产品：P3X63Ag8653细胞、H-1836细胞、PJ34细胞
WM115F细胞系相关产品：WIL2S细胞、KPL-1细胞、LLC PK1细胞
CHO/dhFr-细胞系相关产品：MDBK细胞、NOK细胞、HT 115细胞
CHO/dhFr-细胞系相关产品：MDBK细胞、NOK细胞、HT 115细胞
Jurkat-E6细胞系相关产品：Baby Hamster Kidney-21细胞、WM-451Lu细胞、NIH 3T6细胞
EB-3细胞系相关产品：SW 1783细胞、SK-NM-C细胞、Y3-Ag 1.2.3细胞
118MG细胞系相关产品：SUP-B1细胞、Detroit 562细胞、LM1细胞
VCaP细胞系相关产品：Hs274T细胞、LNCaP-C4-2细胞、SKOV-3细胞
NCI-H1299 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
MCF-7/ADR细胞系相关产品：CAL 62细胞、CRFK细胞、SCC9细胞
SNUC1细胞系相关产品：HSC3细胞、PY8119细胞、AML-EOL-1细胞
MMAc-Serum Free细胞系相关产品：OCI-Ly18细胞、TE-4细胞、KTCTL140细胞
ZR75-1细胞系相关产品：MSB-1细胞、SF126细胞、Large Cell Lung Cancer-103H细胞
CESS细胞系相关产品：EFM-19细胞、B16 melanoma细胞、CaSki细胞
CCC-HEH-2细胞系相关产品：SK-GT-4细胞、Tn5 B1-4细胞、MESSADX5细胞
SKG-IIIa细胞系相关产品：IOSE80细胞、BC-019细胞、H-2196细胞
B5537SKIN细胞系相关产品：MLTC-1细胞、HT 29细胞、OVCAR-3细胞
DI TNC-1细胞系相关产品：MXI细胞、KP-4细胞、SW948细胞
C-Lu65细胞系相关产品：MOLP-2细胞、RCC10细胞、NCIH2009细胞
Bx-PC3细胞系相关产品：Hs832T细胞、HOMEC细胞、L78细胞
624 MEL细胞系相关产品：SNUC1细胞、CCD-841CoN细胞、COLO-684细胞
HONE-1细胞系相关产品：PG-4 S+L-细胞、GM05372E细胞、H1522细胞
U-118-MG细胞系相关产品：KP4细胞、Hs611T细胞、NB-9细胞
KGN细胞系相关产品：SO-RB50细胞、HS688AT细胞、SKCO1细胞
JB-6细胞系相关产品：H322细胞、NCIH740细胞、COLO 824细胞
MUTZ3细胞系相关产品：Vero-76细胞、HCC202细胞、HUCCT1细胞
SK-ES细胞系相关产品：LK 2细胞、Emory University-3细胞、U-138 MG细胞
NCI H747细胞系相关产品：NKL细胞、HeLa-S3细胞、Colon 26细胞
OV-1063细胞系相关产品：C127细胞、SKMES1细胞、HCT-15细胞
L-Wnt-3A细胞系相关产品：MC3T3-E细胞、A-172细胞、RPMI-1788细胞
NOZ细胞系相关产品：H196细胞、NCI-H-69细胞、THP-1细胞
WERI-Rb-1细胞系相关产品：HDLM-2细胞、RT112细胞、UM-UC-1细胞
BC-027细胞系相关产品：MOVAS细胞、SW 620细胞、CT-26 WT细胞
MC3T3-L1细胞系相关产品：C-Li-7细胞、BV2细胞、MES-SA-Dx5细胞
S37细胞系相关产品：HBE135-E6E7细胞、Jurkat, Clone E6-1细胞、NCIH716细胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞系相关产品：Hs 766细胞、H-676细胞、RPVSMC细胞
L-428细胞系相关产品：NBLS细胞、SKGIIIA细胞、SNU-638细胞
CTLL-2细胞系相关产品：M14细胞、CemT4细胞、KLM-1细胞
CFPAC细胞系相关产品：NCIH524细胞、HEL9217细胞、DMS-153细胞
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞系相关产品：LIM 1215细胞、HMC-1细胞、HuH28细胞
AMC-HN8细胞系相关产品：Hs746T细胞、LTEP-a-2细胞、PC3M细胞
Henrietta Lacks cells细胞系相关产品：IM 9细胞、OVHM细胞、MOLT16细胞
NCI-H1299 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
HSC-I细胞系相关产品：NCI-H69细胞、Co 205细胞、HKC细胞
ME16C细胞系相关产品：NCI-H250细胞、Hs-611-T细胞、3T3J2细胞
NCIH460细胞系相关产品：Panc02-H0细胞、COLO-357细胞、NCIH292细胞
SW948细胞系相关产品：CL1-5细胞、Ramos 2G6.4C10细胞、Hs895T细胞
HCASMC细胞系相关产品：NR-8383细胞、J-774细胞、MA-104细胞
P30-OHK细胞系相关产品：MDA468细胞、KU812-F细胞、H441细胞
HCe-8693细胞系相关产品：MOLM-16细胞、UACC893细胞、OCIAML5细胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞系相关产品：SHSY5Y细胞、QBI-293A细胞、NCIH1623细胞
CTLL(2)细胞系相关产品：KU-19-19细胞、SLMT-1细胞、MC9细胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞系相关产品：NCIH1838细胞、H157细胞、SK 1细胞
MARC 145细胞系相关产品：CoCL2细胞、CP70细胞、T-T细胞
"
