"786-O cell line人肾透明细胞腺癌细胞系
细胞背景资料:该细胞源自一位原发性肾透明细胞癌患者。该细胞有微绒毛和桥粒,能在软琼脂上生长。此细胞生成一种PTH(甲状旁腺素)样的多肽,与乳癌和肺癌中生成的肽相似,其N端序列与PTH相似,具有PTH样活性,分子量为6000D。
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良好,当补液时,需避免反复吹打。
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
786-O cell line人肾透明细胞腺癌细胞系
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性:贴壁生长
我们都知道世界宇宙浩瀚无极,除了我们知道的地球、太阳、月球、银河系以外还有好多其他宇宙行星,这样的世界对于很多人来说很陌生稀奇甚至无法想象,这样的世界同样也是我们无法触摸的,然而还有一个微观的世界也是我们无法接触的,这个就是——细胞里的微观世界。对于很多人来说,除了从书本上简单了解植物细胞的知识以外,在行业外人的意识里,细胞还是一个让人一头雾水的词语,甚至都是一个无形的存在,更别提描述和看见这个东西,但是对于行业内的生物科学研究者和医学研究者,这是个经常被运用到的必需之物,用宇宙世界的包含于被包含的关系把细胞的微观世界剖析开来,让我们了解到细胞是什么样的东西及应用和未来世界细胞在生命中的重要作用。细胞发炎——心脏疾病;DNA受损——癌症;细胞能量衰退——肾功能衰竭、关节炎、帕金森氏;老化蛋白堆积——糖尿病、痴呆症、心脑血管疾病;所有的衰老和疾病都是机体内细胞开的损伤、衰老和死亡造成的。所以细胞在科学研究和医学研究中有着重要的应用作用,尤其是原代细胞,它是从机体组织中分离提取培养,它可以作为一种科研材料帮助研究者进行项目研究和课题研究,也可以帮助医学者进行疾病研究和疾病试验,试想从人体组织中分离培养的细胞经过医学药物的试验再运用到人体身上,无论从功效还是结果上效果都是。
786-O cell line人肾透明细胞腺癌细胞系
细胞形态特性:上皮样
Hs-729-T细胞系相关产品:RPMI8226细胞、OCILY-10细胞、MM96L细胞
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