"KYSE-450 cell line人食管癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良好,当补液时,需避免反复吹打。
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
KYSE-450 cell line人食管癌细胞系
细胞传代培养的胰酶消化法:传代培养:是指细胞从一个培养瓶以1:2或1:2以上的比例转移,接种到另一培养瓶的培养。传代细胞,可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代,部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤:①入无菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒双手;②倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液37℃下预热;③超净台台面应整洁,用75%酒精棉球擦拭清洁;④打开超净工作台的紫外灯照射台面20min左右,关闭紫外灯,打开风机清洁空气除去臭氧;⑤点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内;⑥将培养用液瓶口用75%酒精消毒,过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上;⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去残留的就培养基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每个大培养瓶加入1ml胰酶,小培养瓶用量酌减,盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶,使细胞脱离胰酶,然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鲜培养基,反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散,再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成细胞悬液,然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖,适度拧紧后稍回转,以利于CO2的进入,将培养瓶放回CO2培养箱;⑩对悬浮培养细胞,步骤7-9不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清,加入新鲜培养基,然后分装到各瓶中。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性:贴壁生长
有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
KYSE-450 cell line人食管癌细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
BEL/FU细胞系相关产品:KOSC-2 cl3-43细胞、HBL1细胞、RT-BM细胞
NCI-H1092细胞系相关产品:RPMI 2650细胞、COR-L105细胞、KOSC-2细胞
Ca Ski细胞系相关产品:Tb 1 Lu (NBL-12)细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞、D-407细胞
GM346细胞系相关产品:LN 229细胞、HS-766-T细胞、NCI-H2286细胞
NCIH1688细胞系相关产品:NCI-H23细胞、AGS细胞、786-0WT细胞
Huh-7.5细胞系相关产品:HEK 293-H细胞、NCI-H510细胞、MA104细胞
HCC 70细胞系相关产品:Nthy-ori 3-1细胞、SK-MEL28细胞、AC16 [Human hybrid]细胞
BT-549细胞系相关产品:H719细胞、Karpas-422细胞、Dami细胞
MSB1细胞系相关产品:LIPF178C细胞、HGC-27细胞、KPL1细胞
RMS1598细胞系相关产品:NCIH1355细胞、T2细胞、Ramos 1细胞
HL-60 Clone 15细胞系相关产品:HHUA细胞、Roswell Park Memorial Institute 7666细胞、TE-6细胞
B/C3T3细胞系相关产品:NCI-H1672细胞、HMC细胞、HNE3细胞
MDA-MB 231细胞系相关产品:HCT 116细胞、UM-UC-1细胞、HCC1806细胞
KYSE-450 cell line人食管癌细胞系
LA795细胞系相关产品:Vero from pool #76细胞、HLF-a细胞、OVCAR-5细胞
293 c18细胞系相关产品:NCI-SNU-668细胞、HPAF-I细胞、A431/P细胞
LC1sq细胞系相关产品:Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞、RPMI-8226S细胞、RenCa细胞
ACC-2细胞系相关产品:NCIH226细胞、U373 MG细胞、Pt K1 (NBL-3)细胞
PLA801-95C细胞系相关产品:NCI-HUT-292细胞、SK Mel 1细胞、H841细胞
WEHI 164细胞系相关产品:HFLS-OA细胞、H-250细胞、Neuro-2a细胞
L cell line细胞系相关产品:IBMF-7细胞、Hs839T细胞、SUM102PT细胞
RGC5细胞系相关产品:HeLa.S3细胞、L- cell细胞、SW839细胞
SK-MEL 28细胞系相关产品:NS1-Ag4细胞、OSC19细胞、IHC-ST1细胞
OVCA433_Bast细胞系相关产品:AE 1201细胞、Bat lung细胞、T1-73细胞
HOS-143B细胞系相关产品:DSL6A/C1细胞、SK_N_FI细胞、RCCJF细胞
Hs-274-T细胞系相关产品:GI-1细胞、HeLa S-3细胞、Pfeiffer细胞
H-1930细胞系相关产品:PaCa2细胞、HS-294-T细胞、253J-BV细胞
SK-MEL-2-LUC细胞系相关产品:VE细胞、CORL105细胞、B16-F10细胞
NCI-SNU-119细胞系相关产品:NRK clone 49F细胞、MDAMB134细胞、H-2172细胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞系相关产品:Fortner's melanotic melanoma #3细胞、3T3-442A细胞、HCCC9810细胞
UCH1细胞系相关产品:HBZY1细胞、H-650细胞、P3J HR1-K细胞
MC57细胞系相关产品:NB19-RIKEN细胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞、NPA细胞
BS-C-1细胞系相关产品:U87-MG细胞、RCC-4细胞、H-1693细胞
H3255细胞系相关产品:RCC-4细胞、KP4细胞、KU-812F细胞
COLO-HSR细胞系相关产品:H.Ep. #2细胞、HOC1细胞、rRTEC细胞
SKMEL-31细胞系相关产品:NOMO1细胞、EST81细胞、b.End3细胞
HEB细胞系相关产品:KMS26细胞、H-847细胞、EB1细胞
NK 10a细胞系相关产品:NCIH1734细胞、alpha TC1.6细胞、MPP-89细胞
CEM/C1细胞系相关产品:H-2106细胞、DH-82细胞、NK-92.05细胞
B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞系相关产品:SMMC7721细胞、NCI-HUT-460细胞、LSC-1细胞
JROECL19细胞系相关产品:LC1/Sq细胞、U118细胞、BT483细胞
NCI-H1836细胞系相关产品:GRSL细胞、WM 266-4细胞、Jurkat 77细胞
DU145细胞系相关产品:RKN细胞、Mc Coy细胞、1.1B4细胞
N2a细胞系相关产品:MPP89细胞、Gejiu Lung Carcinoma-82细胞、SNU16细胞
NT2D1细胞系相关产品:GAK细胞、NL20SV细胞、D10细胞
KNS-42细胞系相关产品:P-388D1细胞、mRMEC细胞、T47-D细胞
SW-1783细胞系相关产品:FRhK4细胞、CHOK1细胞、U14细胞
SNU-16细胞系相关产品:2E8细胞、JurkatE6-1细胞、X63-Ag8.653细胞
MGc80-3细胞系相关产品:Hep 3B细胞、T98-G细胞、OVCAR432细胞
OCI/AML4细胞系相关产品:SK-N-BE-2c细胞、MPC11细胞、OCI/AML4细胞
HEL299细胞系相关产品:SKOV3细胞、SK.OV.3细胞、TGBC11T细胞
B16/F1细胞系相关产品:H345细胞、HEK293E细胞、NCIH1648细胞
BT549细胞系相关产品:HEC1-A细胞、U343MG细胞、DMS79细胞
Hs 934.T细胞系相关产品:MV4-11细胞、NCIH2030细胞、G 401细胞
Hs 742.T细胞系相关产品:High5细胞、H-1435细胞、B16 subline B78细胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞系相关产品:MDA-PCa-2b细胞、HT-22细胞、293FT细胞
NBL-3细胞系相关产品:RL952细胞、H-2085细胞、WSUDLCL2细胞
KYSE-450 cell line人食管癌细胞系
LCMS细胞系相关产品:KRC-Y细胞、Tj-905细胞、CT-26细胞
16-HBEo细胞系相关产品:Normal Rat Kidney-49F细胞、OSC-19细胞、NCIH1915细胞
C3H10T1/2CL8细胞系相关产品:SKNFI细胞、TE-15细胞、H-2073细胞
CCRF-CEM C7细胞系相关产品:1301细胞、Colon 26细胞、Alexander细胞
MDA1386细胞系相关产品:BT-549细胞、H378细胞、NBL-7细胞
NR8383.1细胞系相关产品:NCIH520细胞、CAKI 2细胞、SW 954细胞
Ca Ski细胞系相关产品:Tb 1 Lu (NBL-12)细胞、Mel-MeWo细胞、NCI-H2198细胞
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