"M14 Thawing人黑色素瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
M14 Thawing人黑色素瘤细胞系
细胞生长：贴壁
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：３传代
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
M14 Thawing人黑色素瘤细胞系
细胞生长特性：混合生长
冷冻细胞解冻程序：依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例，制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类，若因实验需要，必须有所不同时，务必以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行所需之实验。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,马血清)，对细胞而言差异极大，请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于３７°C水槽中回温，回温后喷以７０%酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。取出冷冻管，立即放入３７°C水槽中快速解冻，水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿，否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在１分钟内全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷冻管外部，移入无菌操作台内。依据细胞种类和浓度，于无菌操作台内取１０ml培养基加至T２５或T７５flask中。取出已解冻之细胞悬浮液，缓缓加入T２５或T７５flask内之培养基，混合均匀，放入３７°C，５%CO２培养箱培养。对绝大多数细胞而言，１%以下之冷冻保护剂DMSO，不会对细胞之贴附或活化有不良影响，不需立刻由解冻细胞中去除，待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO敏感或会造成细胞分化之细胞，需立即去除DMSO者，则可将解冻后之细胞悬浮液放入５-１０ml培养基中，离心３００xg(约１０００rpm)，５分钟，小心移去上清液，加入适量新鲜培养基，将细胞均匀混合后，转移至培养瓶中，再放入３７°C，５%CO２培养箱培养。
细胞形态特性：详见细胞说明书
ACT-1细胞系相关产品：LC-2-Ad细胞、SW1990细胞、H1688细胞
PCI:SG-231细胞系相关产品：SK-ES1细胞、Hs 27细胞、Hs 706.T细胞
Mv 1 Lu (NBL-7)细胞系相关产品：BCaP 37细胞、H-1944细胞、NCI-UMC-11细胞
BNL-HCC细胞系相关产品：Walker 256细胞、Vero细胞、QGY细胞
NCIADR.RES细胞系相关产品：SUNE 1细胞、SU-DHL-5细胞、3LL细胞
SNU601细胞系相关产品：KYSE0030细胞、WiDr-TC细胞、KPNRTBM1细胞
MCA38细胞系相关产品：U-hth74细胞、DMS 273细胞、P3/NSI/1-AG4-1细胞
BMF细胞系相关产品：TK10细胞、SW 1990细胞、N9细胞
G 292 Clone A 141B1细胞系相关产品：T-HEECs细胞、COV504细胞、X63-AG 8.653细胞
Immortal Pig Intestinal-2I细胞系相关产品：CHO Lec1细胞、LM TK negative细胞、Centre Antoine Lacassagne-27细胞
ATDC-5细胞系相关产品：KMST-6细胞、OVCAR-3细胞、MBMEC细胞
Vero C1008细胞系相关产品：COLO 206F细胞、SU 86.86细胞、TW01细胞
NK-92 MI细胞系相关产品：H2291细胞、GP293细胞、BE(2)M17细胞
Pt K1 (NBL-3)细胞系相关产品：Jurkat 77细胞、Hs-281-T细胞、Huh-7.5.1细胞
RM-1细胞系相关产品：ChaGo K-1细胞、LS-411细胞、EVSA/T细胞
RMS1598细胞系相关产品：NCIH1355细胞、PA-1细胞、BEL 7402细胞
HeLa 229细胞系相关产品：NTERA-2cl.D1细胞、LS 180细胞、FRTL5细胞
LLC1细胞系相关产品：JHH-7细胞、MDA-MB435细胞、JROECL33细胞
FCCH1024细胞系相关产品：751-NA细胞、KBM-7细胞、Emory University-3细胞
NCI-H1770细胞系相关产品：SKGIIIA细胞、HuH28细胞、TK.10细胞
SCC154细胞系相关产品：Plaepi 34细胞、VM-CUB1细胞、BHT101细胞
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OVCAR-420细胞系相关产品：LICR-HN-6细胞、MDA435细胞、SNU-216细胞
FK81细胞系相关产品：TK-10细胞、DMS53细胞、A375SM细胞
Tu-686细胞系相关产品：HEK-AD 293细胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞、ROS 17/2.8细胞
PLMVEC细胞系相关产品：JB6 clone 30, subclone 7b细胞、HTh-74细胞、L(TK-)细胞
M14 Thawing人黑色素瘤细胞系
HCC 70细胞系相关产品：Nthy-ori 3-1细胞、SK-MEL28细胞、AC16 [Human hybrid]细胞
H-378细胞系相关产品：SW839细胞、NCI-H87细胞、Alpha Mouse Liver 12细胞
PLA-801D细胞系相关产品：THP1细胞、PMVEC细胞、NCIH64细胞
KPL1细胞系相关产品：HS-940-T细胞、C2BBe1细胞、MV 3细胞
VMM5A细胞系相关产品：CX-1细胞、Fox/NY细胞、7860细胞
CTLL2细胞系相关产品：HeLa-S3细胞、CCRF SB细胞、NCI-H125细胞
KU1919细胞系相关产品：MC9细胞、NMC-G1细胞、Panc 04.03细胞
OCI-Ly10细胞系相关产品：RIN-m 14B细胞、Hs 578T细胞、P388.D1细胞
HNTEC细胞系相关产品：MES-SA细胞、NRK clone 52E细胞、MCM细胞
C17细胞系相关产品：MDA-453细胞、SK-MEL-31细胞、Tn5B1-4细胞
HGSMC细胞系相关产品：TE12细胞、RC92A细胞、NCI H82细胞
Kit225 K6细胞系相关产品：2780细胞、PA12细胞、NCI-H508细胞
NCI-H676细胞系相关产品：SKN-SH细胞、OCILY-3细胞、BC-027细胞
NPC-TW01细胞系相关产品：Pfeiffer细胞、H1770细胞、C57/B6-L细胞
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Colo205细胞系相关产品：KBM-7细胞、RAG细胞、MHCC 97细胞
T HEECs细胞系相关产品：N1E-115细胞、NALM 6细胞、SHG-44细胞
MC3T3细胞系相关产品：P3-NS1/1-Ag4-1细胞、Panc 02细胞、COLO 201细胞
IGROV-1细胞系相关产品：G361细胞、PC-9/GR细胞、RPE-1细胞
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OV-2008细胞系相关产品：IPAM-WT细胞、MHCCLM3细胞、R1610细胞
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SW954细胞系相关产品：KNS81细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞、HCC15细胞
3 LL细胞系相关产品：UM-UC14细胞、NCI-H1954细胞、GM03671细胞
OC 316细胞系相关产品：SF-539 BT细胞、Nittby-Salford 1细胞、MNNG-HOS (Cl#5)细胞
OsA-CL细胞系相关产品：TE11细胞、TE6细胞、NRK 52E细胞
RPMI-6666细胞系相关产品：SKG3A细胞、MC-116细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞
NMCG-1细胞系相关产品：GM00215细胞、TE-32细胞、CAL 62细胞
JIII细胞系相关产品：MDA-MB-468细胞、LS1034细胞、3D4/21细胞
Ocular Choroidal Melanoma-1细胞系相关产品：XuanWei Lung Cancer-05细胞、A375-SM细胞、CHP 212细胞
MZ-CRC-1细胞系相关产品：H2030细胞、KM933细胞、SUM 102细胞
M14 Thawing人黑色素瘤细胞系
COLO-829细胞系相关产品：A-10细胞、SW48细胞、CA 46细胞
H-1092细胞系相关产品：Hs 863.T细胞、MCF 10A细胞、H-1238细胞
N87细胞系相关产品：HDSMC细胞、Th17细胞、L-M(TK-)细胞
SNU886细胞系相关产品：Huh 7.5细胞、SNU-719细胞、Hu-P-T3细胞
CCLP1细胞系相关产品：HS0578T细胞、P3X63-Ag8.653细胞、F442-A细胞
Hs 578T细胞系相关产品：SK-N-AS细胞、F98细胞、WM 239-A细胞
SW1783细胞系相关产品：HCT-GEO细胞、HuH-1细胞、LNCaP-C4-2细胞
R2C细胞系相关产品：Y3-Ag1,2,3细胞、SW-620细胞、HOP-92细胞
NCIH460细胞系相关产品：Panc02-H0细胞、COLO-357细胞、NCIH292细胞
MonoMac6细胞系相关产品：DMS53细胞、SUM190细胞、NCI-H810细胞
Hs-746T细胞系相关产品：NOZAWA细胞、CCRF/CEM-C7细胞、EAhy926细胞
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