"KP-4 Thawing人胰腺导管细胞癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
KP-4 Thawing人胰腺导管细胞癌细胞系
细胞生长:贴壁
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
KP-4 Thawing人胰腺导管细胞癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
冷冻细胞解冻程序:依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例,制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类,若因实验需要,必须有所不同时,务必以缓慢比例渐次改变培养基组成,确定细胞适应后,方进行所需之实验。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,马血清),对细胞而言差异极大,请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于37°C水槽中回温,回温后喷以70%酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。取出冷冻管,立即放入37°C水槽中快速解冻,水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿,否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化后,以70%ethanol擦拭冷冻管外部,移入无菌操作台内。依据细胞种类和浓度,于无菌操作台内取10ml培养基加至T25或T75flask中。取出已解冻之细胞悬浮液,缓缓加入T25或T75flask内之培养基,混合均匀,放入37°C,5%CO2培养箱培养。对绝大多数细胞而言,1%以下之冷冻保护剂DMSO,不会对细胞之贴附或活化有不良影响,不需立刻由解冻细胞中去除,待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO敏感或会造成细胞分化之细胞,需立即去除DMSO者,则可将解冻后之细胞悬浮液放入5-10ml培养基中,离心300xg(约1000rpm),5分钟,小心移去上清液,加入适量新鲜培养基,将细胞均匀混合后,转移至培养瓶中,再放入37°C,5%CO2培养箱培养。
细胞形态特性:上皮样
NCIH1184细胞系相关产品:AU-565细胞、H498细胞、H-847细胞
OVCAR.8细胞系相关产品:H-446细胞、HCM细胞、IPLB-Sf21AE细胞
Hs 729细胞系相关产品:SK Hep1细胞、YES-2细胞、JB-6 Cl 30细胞
H-1792细胞系相关产品:Detroit 562细胞、NTERA-2 clone D1细胞、HuPT3细胞
T241细胞系相关产品:JeKo 1细胞、VMCUB1细胞、MRC5细胞
huH 1细胞系相关产品:Lewis lung carcinoma细胞、D283 Med细胞、343MG细胞
U2932细胞系相关产品:RL95细胞、Rat-1细胞、HUT-226细胞
OCI AML4细胞系相关产品:CCRF细胞、H-1770细胞、T-HEECs细胞
HPaSteC(HPSC)细胞系相关产品:C3H-10T1/2细胞、MyLa 2059细胞、HEL-92细胞
GM05887细胞系相关产品:RBL.2H3细胞、H-209细胞、ZR75_1细胞
HCT15细胞系相关产品:P-3J细胞、HuT 102细胞、OVCAR 8细胞
KNS42细胞系相关产品:MV4II细胞、HCC0095细胞、NCI-H526细胞
SCC 4细胞系相关产品:JTC-39细胞、RSC96细胞、Z-138细胞
HEL 92.1.7细胞系相关产品:MA104细胞、MSTO-211 H细胞、T-24细胞
H-2023细胞系相关产品:Kelly细胞、HUC-1细胞、CMT64细胞
OV-90细胞系相关产品:P3JHR-1细胞、S37细胞、B16 F1细胞
NCIH2591细胞系相关产品:KS-SLK细胞、Mouse Colon 38细胞、Meat Animal Research Center-145细胞
BNL.CL2细胞系相关产品:TFK-1细胞、MA-104细胞、NCIH244细胞
LN229细胞系相关产品:Hs 870.T细胞、H647ell细胞、Swiss3T3细胞
LOU-NH91细胞系相关产品:CAL-33细胞、MDA-MB-468细胞、RINm-5F细胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞系相关产品:RPMI8402细胞、NIH3T3细胞、C 643细胞
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Human Epidermoid carcinoma #2细胞系相关产品:HCC1569细胞、NBL-4细胞、NS20Y细胞
no-11细胞系相关产品:MiaPaca.2细胞、KMB-17细胞、HRIF细胞
HCGC细胞系相关产品:BC3H-1细胞、PG-BE1细胞、OCUM-1细胞
HCT/Taxo1细胞系相关产品:NTERA2-D1细胞、RKN细胞、NW-MEL-38细胞
KP-4 Thawing人胰腺导管细胞癌细胞系
C1R细胞系相关产品:HEK-293细胞、UMNSAH-DF1细胞、NOR 10细胞
SK UT 1细胞系相关产品:SNU216细胞、HD11细胞、MN60细胞
Det. 562细胞系相关产品:H19-7细胞、SNU620细胞、MES 13细胞
L02细胞系相关产品:NCI-H1651细胞、NCI-H1435细胞、B958细胞
RSC 96细胞系相关产品:Ej138细胞、SKMEL-31细胞、IEC 18细胞
PANC-10-05细胞系相关产品:SNU-878细胞、TGBC11TKB细胞、B16 BL6细胞
HEK293T/17细胞系相关产品:SKNSH细胞、University of Arizona Cell Culture-893细胞、SUM149PT细胞
HSC-3细胞系相关产品:NCIH2081细胞、Nb2细胞、HUCEC细胞
MAVER细胞系相关产品:HuH 6细胞、FL-83B细胞、P3.NS-1/1.Ag4.1细胞
CL1-5细胞系相关产品:HuH-1细胞、HEp-2细胞、SW 626细胞
SBC-5细胞系相关产品:SACC-LM细胞、Soleus clone 8细胞、253J-Bladder-V细胞
CT26WT细胞系相关产品:RAW-264.7细胞、hRMECs细胞、P3JHR-1细胞
Eca-109细胞系相关产品:SKMEL1细胞、F-36P细胞、HCMEC(BL12-H)细胞
DBTRG-05MG细胞系相关产品:EBTr细胞、HB611细胞、NCI-SNU-216细胞
COLO 394细胞系相关产品:HRPEpiC细胞、NPC-TW-039细胞、MHCC 97-L细胞
brain-derived Endothelial cells.3细胞系相关产品:NH-6细胞、RPMI 7951细胞、OCI-Ly 3细胞
Rat1细胞系相关产品:INS-1细胞、HPaSteC(HPSC)细胞、SW 780细胞
Caco-2/ATCC细胞系相关产品:NCI-H1944细胞、R D细胞、SUD4细胞
H-2172细胞系相关产品:B16-F10--RED细胞、H341细胞、GM04671细胞
MES-SA/Dx5细胞系相关产品:Glioma-261细胞、B16-F1细胞、HANK1细胞
CT 26细胞系相关产品:NCI/ADR-RES细胞、CMT 64细胞、GM-346细胞
P31FUJ细胞系相关产品:DHL-16细胞、ME1细胞、FU-OV-1细胞
Eca109细胞系相关产品:H283细胞、B104 [Rat neuroblastoma]细胞、H1341细胞
P388细胞系相关产品:KG1细胞、H-378细胞、NH-6细胞
P3X63Ag8细胞系相关产品:HEK293A细胞、SCC-7细胞、SNU407细胞
Hs 294T细胞系相关产品:NTERA-2 clone D1细胞、OVCAR.5细胞、CHL细胞
HuCCT-1细胞系相关产品:T-98细胞、AR-42J细胞、RPMI1788细胞
KE39细胞系相关产品:HFT8810细胞、ChaGo K-1细胞、HBE 135-E6/E7细胞
HELA-GFP细胞系相关产品:251MG细胞、NCI-128细胞、HuPT4细胞
Hs 819.T细胞系相关产品:MPVECs细胞、NU-GC-3细胞、M3 Clone M-3细胞
SJSA-1细胞系相关产品:PECAPJ34细胞、HAC-84细胞、MDA.MB.435细胞
NCIN87细胞系相关产品:H1876细胞、NCIH841细胞、NCI-H2405细胞
CTX TNA2细胞系相关产品:JB-6 Cl 30细胞、USMC细胞、C-32细胞
KP-4 Thawing人胰腺导管细胞癌细胞系
SK-N-SH细胞系相关产品:Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞、DMS-79细胞、STC-1细胞
HRIF细胞系相关产品:CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞
U266 B1细胞系相关产品:NCIH727细胞、NHA细胞、H920细胞
MC38细胞系相关产品:QG56细胞、H-1238细胞、OCM1A细胞
GP5d细胞系相关产品:SKES-1细胞、OCI-AML2细胞、Vero细胞
50.B1细胞系相关产品:TOV21G细胞、WIL2 S细胞、SW579细胞
J774A1细胞系相关产品:H676细胞、OVCAR 432细胞、CaEs17细胞
NCI-HUT-460细胞系相关产品:TR-146细胞、ECV 304细胞、H-1869细胞
JHH7细胞系相关产品:TE354.T细胞、GM03190细胞、WERI-Rb-1细胞
L2细胞系相关产品:D562细胞、TALL-104细胞、NPC-TW 039细胞
HaCaT细胞系相关产品:HO-1-N-1细胞、Be Wo细胞、MGSMC细胞
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