"Hepa 1-6 Thawing小鼠肝癌细胞系
细胞背景资料:此细胞株源自C57/L小鼠中引发的BW7756肝癌;表达AFP、α1抗胰蛋白酶、淀粉酶;鼠痘病毒阴性。此细胞可以在无血清的培养基中繁殖,培养基成分是:DMEM,75%;Waymouth'sMAB87/3培养基,25%。添加3x10-8M。
细胞形态:上皮细胞样
Hepa 1-6 Thawing小鼠肝癌细胞系
细胞生长:贴壁
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Hepa 1-6 Thawing小鼠肝癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
冷冻细胞解冻程序:依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例,制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类,若因实验需要,必须有所不同时,务必以缓慢比例渐次改变培养基组成,确定细胞适应后,方进行所需之实验。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,马血清),对细胞而言差异极大,请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于37°C水槽中回温,回温后喷以70%酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。取出冷冻管,立即放入37°C水槽中快速解冻,水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿,否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化后,以70%ethanol擦拭冷冻管外部,移入无菌操作台内。依据细胞种类和浓度,于无菌操作台内取10ml培养基加至T25或T75flask中。取出已解冻之细胞悬浮液,缓缓加入T25或T75flask内之培养基,混合均匀,放入37°C,5%CO2培养箱培养。对绝大多数细胞而言,1%以下之冷冻保护剂DMSO,不会对细胞之贴附或活化有不良影响,不需立刻由解冻细胞中去除,待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO敏感或会造成细胞分化之细胞,需立即去除DMSO者,则可将解冻后之细胞悬浮液放入5-10ml培养基中,离心300xg(约1000rpm),5分钟,小心移去上清液,加入适量新鲜培养基,将细胞均匀混合后,转移至培养瓶中,再放入37°C,5%CO2培养箱培养。
细胞形态特性:上皮样
H-510细胞系相关产品:LC-2 ad细胞、FHL124细胞、SK-BR3细胞
D10G41细胞系相关产品:SUM-102细胞、AR4IP细胞、bEnd3细胞
Huh7.5.1细胞系相关产品:H716细胞、MM96L细胞、LoMeT-ccRcc细胞
HMC-1细胞系相关产品:ML-2细胞、NCI-H711细胞、H35 Reuber细胞
H2195细胞系相关产品:NCI-SNU-449细胞、COLO679细胞、NCI H716细胞
HSC2细胞系相关产品:HUT125细胞、HEC251细胞、NKM-1细胞
CWR22-Rv1细胞系相关产品:P3-X63-Ag8-6-5-3细胞、Hs822T细胞、Panc203细胞
H35 Reuber细胞系相关产品:CV-1 in Origin Simian-1细胞、RN细胞、MMAc-SF细胞
CCRF/CEM-C7细胞系相关产品:SLMT-1细胞、COLO206细胞、SCCVII/St细胞
MKN 7细胞系相关产品:MCAEC细胞、COR-L279细胞、JEG-3细胞
MLOY4细胞系相关产品:PC615.3细胞、GM346细胞、GM00346细胞
H1568细胞系相关产品:MSTO-211细胞、NCIH1694细胞、H-676细胞
HEC251细胞系相关产品:CL1-0细胞、IHH4细胞、MDA453细胞
GA-10 clone 4细胞系相关产品:P388.D1细胞、Hs 636 T细胞、SNU-869细胞
SNT8细胞系相关产品:CCD33Co细胞、DMS-153细胞、Metastatic Variant-522细胞
SKNBE-1细胞系相关产品:SKOV-433细胞、MDA-MB-231 #4175细胞、H1648细胞
HCT-GEO细胞系相关产品:SF 126细胞、H460细胞、NALM6细胞
VK2 (E6/E7)细胞系相关产品:COLO-320细胞、GM0637细胞、CNE1-LUC细胞
NCIH526细胞系相关产品:Panc8.13细胞、WERI Rb-1细胞、ATC241细胞
OCI-AML-5细胞系相关产品:SNU398细胞、16HBE细胞、SK-N-BE(2C)细胞
B16-BL6细胞系相关产品:C6661细胞、COLO 357细胞、HLEC-B3细胞
B16-BL6细胞系相关产品:C6661细胞、COLO 357细胞、HLEC-B3细胞
TYK-nu细胞系相关产品:SEG-1细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、HTSMC细胞
PL9细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-78细胞、CAKI1细胞、MDA-MB-231-GFP细胞
Ca761细胞系相关产品:NCIH2170细胞、ST细胞、PTK 1细胞
HuO9细胞系相关产品:SW1990细胞、MDA-436细胞、BT.549细胞
Hepa 1-6 Thawing小鼠肝癌细胞系
NCIH1648细胞系相关产品:NRK-49F细胞、Hs343T细胞、NS-1细胞
SK Mel 24细胞系相关产品:Earle's L cells细胞、SNK-6细胞、Mono Mac 6细胞
WiDr细胞系相关产品:HPAF细胞、TOV-112细胞、L cell细胞
H1770细胞系相关产品:H-209细胞、HuH1细胞、Ku812细胞
EAhy926细胞系相关产品:Hs.27细胞、C-33 A细胞、NCI-322细胞
LN 229细胞系相关产品:RBMVEC细胞、SUM 52PE细胞、COLO-679细胞
KU.812细胞系相关产品:J-774A.1细胞、Hi-five细胞、HEK-293-H细胞
MCF.7细胞系相关产品:SKNEP1细胞、HCEC细胞、AGS细胞
COLO-738细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 1846细胞、M3 Clone M-3细胞、GM05862细胞
CV-1.K细胞系相关产品:OVMANA细胞、Ku812F细胞、RH8994细胞
WISH细胞系相关产品:OLN 93细胞、OVCA433细胞、SW-1116细胞
BEL 7405细胞系相关产品:NCI-H128细胞、D-341细胞、IOSE80UBC细胞
SNG-M细胞系相关产品:SKMEL5细胞、OVCA432细胞、CCC-HIE-2细胞
KU-812-F细胞系相关产品:SEM细胞、Mevo细胞、OCIAML2细胞
Sf-21细胞系相关产品:KAT5细胞、MiaPaca.2细胞、PC10细胞
Human Pancreatic Duct Epithelial细胞系相关产品:293H细胞、MDA415细胞、HPAC细胞
PC 61.5.3细胞系相关产品:alpha TC1 clone 6细胞、SK-MEL-MeWo细胞、U-251-MG细胞
Institute for Medical Research-32细胞系相关产品:MDA-415细胞、HCC1187细胞、COLO357细胞
SK-MEL 28细胞系相关产品:NS1-Ag4细胞、OSC19细胞、IHC-ST1细胞
SNU886细胞系相关产品:Huh 7.5细胞、SNU-719细胞、Hu-P-T3细胞
C4-1细胞系相关产品:IOSE80UBC细胞、HeLa S 3细胞、COR-L88细胞
SUM 159细胞系相关产品:C8-D1A细胞、IALM细胞、NCI-H2066细胞
V 79细胞系相关产品:Liver-02细胞、LS 123细胞、Microbiological Associates-104细胞
PFSK1细胞系相关产品:DC 2.4细胞、Hs-274-T细胞、TK 10细胞
NCI-HUT-460细胞系相关产品:TR-146细胞、ECV 304细胞、H-1869细胞
SVOG细胞系相关产品:Panc-1-P细胞、HCC94细胞、B10BR细胞
Sarcoma OSteogenic-2细胞系相关产品:8305C_1细胞、MZ-CRC-1细胞、MC116细胞
Panc 2.03细胞系相关产品:CC-LP-1细胞、SNU-368细胞、SKML-28细胞
H2107细胞系相关产品:38C-13细胞、HIT T-15细胞、KB细胞
AQ-Mel细胞系相关产品:SUM149PT细胞、NCI522细胞、Jurkat E6.1细胞
NCI-H1793细胞系相关产品:Sol8细胞、Colo-678细胞、H-2135细胞
SW-13细胞系相关产品:B35细胞、RH35细胞、MCF-7B细胞
ST486细胞系相关产品:GalK1细胞、BNCL-2细胞、CHP100细胞
Hepa 1-6 Thawing小鼠肝癌细胞系
NCIH522细胞系相关产品:Pa16C细胞、CAL 120细胞、OVCAR433细胞
Spodoptera frugiperda clone 9细胞系相关产品:IPLB-Sf21细胞、VP 267细胞、KBM5细胞
OVHM细胞系相关产品:MV-522细胞、NCIH1963细胞、H9c2(2-1)细胞
RMS1598细胞系相关产品:NCIH1355细胞、T2细胞、Ramos 1细胞
COLO-699细胞系相关产品:LI7细胞、CMT-64细胞、BSC-1细胞
LC-1-sq细胞系相关产品:RH35细胞、P30OHK细胞、Panc_03_27细胞
GM03190A细胞系相关产品:A-253细胞、Fu97细胞、TEC细胞
MiaPaCa-2细胞系相关产品:TW-039细胞、FET细胞、Potorous tridactylus Kidney 1细胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞系相关产品:MOLT 4细胞、Swiss-3T3细胞、H-2087细胞
MOLM-13细胞系相关产品:NCI N87细胞、Sol8细胞、WEHI3B细胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞系相关产品:PG-4细胞、MESSA-DX5细胞、RCC4细胞
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