"HCC95 Thawing人肺鳞状细胞癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
HCC95 Thawing人肺鳞状细胞癌细胞系
细胞生长：贴壁
造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】１)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌３０min,酒精擦拭后直接开始试验；２)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；３)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；４)不带手套，徒手操作；５)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需１２１°C高压灭菌２０分钟后３７％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不好，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且好几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求高，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
贴壁细胞的消化方法介绍：１、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在０.２５-０.５%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。０.２５%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在３７度条件下，一般消化１-５分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-２０度。２、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在０.０２%左右。作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。因此，配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此，消化下来的细胞要洗一遍。４、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大，但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。５、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。６、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。优点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧，又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：１、用较多的４度的PBS 洗涤一遍细胞(以６孔板为例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，３、轻轻吹打，细胞即完全脱落，４、按一定比例传代。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCC95 Thawing人肺鳞状细胞癌细胞系
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞形态特性：详见细胞说明书
NCI-Hut 125细胞系相关产品：R1800[RA]细胞、NMCG-1细胞、Strain V细胞
PTK 2细胞系相关产品：COLO 699细胞、NS1-Ag4/1细胞、hCMEC/D3细胞
2780细胞系相关产品：aTC1 Clone 6细胞、T-47D细胞、HCC-1428细胞
HLE-SRA-01/04细胞系相关产品：Panc2.03细胞、CEMC7细胞、NTera 2细胞
R.K.13细胞系相关产品：MDA-MB-134-VI细胞、Microbiological Associates-104细胞、OCI AML5细胞
AM38细胞系相关产品：RPMI8226/S细胞、VMRCLCD细胞、Co 205细胞
CAMA细胞系相关产品：CAL 51细胞、TSU-Pr1细胞、H929细胞
HT29细胞系相关产品：SW 962细胞、OVCA-432细胞、HCT_116细胞
SKMEL-1细胞系相关产品：Walker256细胞、ST 486细胞、MC3T3-E1细胞
Karpas 299细胞系相关产品：HNE-1细胞、AML-12细胞、RINm5F细胞
PG-4细胞系相关产品：SuDHL 5细胞、786-O细胞、Karpas299细胞
H64细胞系相关产品：EC109细胞、NCI H82细胞、PLC PRF 5细胞
OV3121细胞系相关产品：BCP-1细胞、NCI-BL1339细胞、Hs294细胞
SW982细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞、HEI-193细胞、HS 1.Tes细胞
AD293细胞系相关产品：T-T细胞、B16/BL6细胞、COLO 829细胞
293H细胞系相关产品：SMC-1细胞、NPA87细胞、H-1373细胞
HCC2218细胞系相关产品：Hs 819.T细胞、rHSC-99细胞、HCC-78细胞
LS-411细胞系相关产品：H1693细胞、MC3T3-E1 Subclone 14细胞、OVCA433_Bast细胞
HEK-293-EBNA细胞系相关产品：32Dcl3细胞、Bac 1.2F5细胞、BALB/3T3 clone A31细胞
RCSMC细胞系相关产品：OVCAR.8细胞、H-2073细胞、LAN-5细胞
Porcine Kidney-13细胞系相关产品：H-1048细胞、P3HRI细胞、HPAF II细胞
Porcine Kidney-13细胞系相关产品：H-1048细胞、P3HRI细胞、HPAF II细胞
Hs895.T细胞系相关产品：BMU-S1细胞、D10细胞、H1395细胞
RERFLCMS细胞系相关产品：DI TNC-1细胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞、CV-1 in Origin Simian-1细胞
Ha Fe细胞系相关产品：HCC1008细胞、AN3CA细胞、OVCAR.8细胞
KPNRTBM1细胞系相关产品：32D clone3细胞、H 9细胞、CP-70细胞
HCC95 Thawing人肺鳞状细胞癌细胞系
C666-1细胞系相关产品：AM细胞、WI-38细胞、AU-Mel细胞
HEY-A8细胞系相关产品：H1395细胞、SNU520细胞、CHO cell clone K1细胞
UO-31细胞系相关产品：Human Kidney-2细胞、PC2细胞、MC-3T3细胞
Hs 729.T细胞系相关产品：H-820细胞、KYSE-50细胞、WM115mel细胞
SHSY5Y细胞系相关产品：H1666细胞、MEF细胞、FL-83B细胞
CMT64细胞系相关产品：LN382细胞、Ramos(RA1)细胞、LMH细胞
SU-DHL2细胞系相关产品：HCoEpiC细胞、Oka-C1细胞、TMD8细胞
NUGC3细胞系相关产品：VMRC-RCZ细胞、SU-DHL6细胞、16-HBEo细胞
SKBR-3细胞系相关产品：RPMI 1846细胞、NCIH2085细胞、RT-BM-1细胞
COLO 320DM细胞系相关产品：4T1.2细胞、R2C细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞
RC92A细胞系相关产品：NCIH1648细胞、CCC-HEH-2细胞、HUT 125细胞
RT-BM 1细胞系相关产品：B95.8细胞、SK MEL-28细胞、CemT4细胞
FL83B细胞系相关产品：H847细胞、SW 837细胞、WM266-4细胞
746T细胞系相关产品：MNNG-HOS (Cl#5)细胞、PC3M-2B4细胞、VM-CUB1细胞
SW579细胞系相关产品：Human ErythroLeukemia细胞、HS766T细胞、Ej138细胞
ME180细胞系相关产品：PNT1-a细胞、L78细胞、Fetal Human Colon细胞
SW527细胞系相关产品：R3/1细胞、P3/NS-1细胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞
MES13细胞系相关产品：FTC-133细胞、COLO201细胞、A-2780细胞
F36P细胞系相关产品：MiaPaCa-2细胞、WM-266-4细胞、373MG细胞
WEHI-164细胞系相关产品：HSC 3细胞、3T3(A31)细胞、PC-3M-1E8细胞
TE-13细胞系相关产品：Jurkat clone A3细胞、HOS (TE85)细胞、NRK细胞
CAL 39细胞系相关产品：MM1S细胞、NCI-H1522细胞、MMAc.SF细胞
MDA-MB 231细胞系相关产品：HCT 116细胞、UM-UC-1细胞、HCC1806细胞
H209细胞系相关产品：HN6细胞、SKHEP1细胞、SPCA1细胞
SHG-44细胞系相关产品：H4细胞、A253细胞、SF295细胞
CAL 85-1细胞系相关产品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞、HIBEpiC细胞、SCC-7细胞
RGC5细胞系相关产品：HeLa.S3细胞、L- cell细胞、SW839细胞
870细胞系相关产品：H1650细胞、BTI-Tn5B14细胞、EFO 27细胞
GS-9L细胞系相关产品：BC-028细胞、Neukoplast细胞、OAW42细胞
H929细胞系相关产品：639 V细胞、VK-2/E6E7细胞、NOK细胞
ARPE19细胞系相关产品：Balb/3T3-4-Cl31细胞、U 937细胞、IM 9细胞
NCIH69细胞系相关产品：RD 2细胞、H-1963细胞、ASPC1细胞
3T3-Swiss albino细胞系相关产品：RPTEC/TERT1细胞、SVG(P12)细胞、ANA-1细胞
HCC95 Thawing人肺鳞状细胞癌细胞系
HEK/293细胞系相关产品：VMM5A细胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、L-M[TK-]细胞
A-101D细胞系相关产品：OCI/AML-3细胞、FRTL-5 Cl 2细胞、TE-15细胞
H441细胞系相关产品：HHL5细胞、H748细胞、MNNG/HOS Clone F-5细胞
MBMEC细胞系相关产品：CNLMG-B5537SKIN细胞、alphaTC1 Clone 6细胞、UPCI:SCC90细胞
PLA801-95D细胞系相关产品：SJSA细胞、Panc05.04细胞、MPC 11细胞
L-540细胞系相关产品：FRO 81-2细胞、NCI-H2405细胞、RL-95-2细胞
RK13细胞系相关产品：CCLP1细胞、AMJ2C8细胞、H-2444细胞
NCI-H1417细胞系相关产品：KTCTL-140细胞、SNU-620细胞、HuT78细胞
Roswell Park Memorial Institute 6666细胞系相关产品：BC-019细胞、UM2细胞、LU-65M细胞
CAL120细胞系相关产品：IMR90细胞、OCILY-19细胞、RK-13细胞
L23/P细胞系相关产品：ETCC007细胞、Mink细胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞
"
