"DMS 273 Thawing人小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
DMS 273 Thawing人小细胞肺癌细胞系
细胞生长:贴壁
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
DMS 273 Thawing人小细胞肺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
细胞复苏基本方法:1.从液氮罐中取出安剖;有时因安剖未封严,浸入了液氮,取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸,因此应带有防护眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上盖并不时摇动,尽快解冻。3.剪开纱布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,净化台上打开盖,用吸管吸出细胞悬液,装入离心管中,再补加10ml培养液,吹打使细胞悬浮。4.低速离心(500~1000转/分)5分钟,取上清后再重复用培养液漂洗、离心。5.加入培养液适当稀释后,再移装入培养瓶中,置温箱培养,次日更换一次培养液后再继续培养。收到T25 flask细胞时,处理方式为:在寄送过程中,为避免起泡造成细胞脱落死亡,T25 flask均加满培养基。请检查flask外观,并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象,若有任何问题,不要打开盖子,请立即通知细胞实验室。将原封之T25 flask静置于37°C,5%CO2培养箱中,使细胞回温至37°C,并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后,于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用),仅留约5-10ml培养基于flask内,依一般培养方式再将细胞置入培养箱中,或细胞已长满盘,则将细胞做传代培养。
细胞形态特性:详见细胞说明书
J 82细胞系相关产品:RK-13细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞、REC细胞
GCT细胞系相关产品:BRL-3A细胞、M1细胞、EFM-192B细胞
OCI-Ly1细胞系相关产品:THPI细胞、Mahlavu细胞、HCC1500细胞
Sp 2/0-Ag 14细胞系相关产品:SHP77细胞、MC3T3E1细胞、MX1细胞
CC-LP-1细胞系相关产品:HCC-2279细胞、TE-11细胞、HEC1B细胞
KMM-1细胞系相关产品:MCF12F细胞、RPMI 2650细胞、CCRFCEM细胞
SK-RC 42细胞系相关产品:SW 13细胞、Hs 870.T细胞、USMC细胞
Jiyoye(P-2003)细胞系相关产品:Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞、ECC1细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞
BCP-1细胞系相关产品:P3X63Ag8-6-5-3细胞、High-5细胞、H-810细胞
RKOE6细胞系相关产品:SUM 190PT细胞、BCECs细胞、BC-3-H-I细胞
Baby Hamster Kidney 21细胞系相关产品:H2087细胞、DHBE细胞、H520细胞
HC11 Mammary Epithelium细胞系相关产品:F98细胞、H-1734细胞、4T1.2细胞
Strain V细胞系相关产品:NeHepLxHT细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞、SUDHL6细胞
Y3-Ag123细胞系相关产品:C4-1细胞、SK RC 20细胞、Hep-G2/C3A细胞
OVCAR5细胞系相关产品:SK-NSH细胞、RPMI 6666细胞、Caco2BBe细胞
H-1395细胞系相关产品:A549-Taxol细胞、PC-3M-IE8细胞、NCI-522细胞
VMM-5A细胞系相关产品:CC-LP-I细胞、AtT20细胞、PL-9细胞
HO8910PM细胞系相关产品:TGBC-11-TKB细胞、SK.MEL.5细胞、NCI-H220细胞
L615细胞系相关产品:GM02132C细胞、KOSC-2细胞、Earles's cells细胞
IEC-6细胞系相关产品:AdHek细胞、OCI-LY-7细胞、Hs 839.T细胞
COLO829细胞系相关产品:HS-695T细胞、L-02细胞、H341细胞
COLO829细胞系相关产品:HS-695T细胞、L-02细胞、H341细胞
SG231细胞系相关产品:K7M2细胞、32Dc3细胞、MRMT-1细胞
WM266细胞系相关产品:KE-39细胞、NTERA2-cloneD1细胞、293EBNA细胞
SK-MEL-5细胞系相关产品:H28细胞、Mel624细胞、NCI-SNU-C1细胞
MPP 89细胞系相关产品:KY180细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞、INS1细胞
DMS 273 Thawing人小细胞肺癌细胞系
786-O细胞系相关产品:P-19细胞、Y3M细胞、KU812-F细胞
C17细胞系相关产品:MDA-453细胞、SK-MEL-31细胞、Tn5B1-4细胞
HCEpiC细胞系相关产品:C2BBe1细胞、Meat Animal Research Center-145细胞、RFL-6细胞
Centre Antoine Lacassagne-51细胞系相关产品:LWnt-3A细胞、HT 1197.T细胞、SRA01/04细胞
NW-MEL-38细胞系相关产品:LL/2(LLc1)细胞、D324 Med细胞、NCIH1944细胞
SKO3细胞系相关产品:143 B细胞、NCIH460细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞
HFF-1细胞系相关产品:MHCC 97-L细胞、McARH7777细胞、HCC827细胞
SKNBE(2c)细胞系相关产品:Melan-a细胞、HCA 7细胞、NCI-H522细胞
MC3T3-E1细胞系相关产品:NCIH2228细胞、RAW-264.7细胞、Hs 729T细胞
OSC19细胞系相关产品:BL-6细胞、SEG-1细胞、SU86_86细胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞系相关产品:HFB细胞、PL-5细胞、MCF 7B细胞
Ej138细胞系相关产品:Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞
Jurkat-77细胞系相关产品:Human fetal lung fibroblast 1细胞、CP-70细胞、686LN-M4e细胞
P3HR1-BL细胞系相关产品:Pan02细胞、MCA-205细胞、SK-ES-1细胞
SUNE-1细胞系相关产品:D10G41细胞、SCC 15细胞、Hs822T细胞
PLA802细胞系相关产品:CaES-17细胞、HS-5细胞、CCD-19Lu细胞
LLC-WRC 256细胞系相关产品:HuNS1细胞、HEEpiC细胞、MHCC-LM3细胞
MDBK细胞系相关产品:ECC10细胞、U-hth74细胞、HBZY1细胞
HOPC细胞系相关产品:UACC-893细胞、Normal Rat Kidney细胞、H209细胞
F-36P细胞系相关产品:Hepa 1-6细胞、NB9细胞、PLMVEC细胞
OUMS-23细胞系相关产品:210RCY3-Ag1.2.3细胞、SF 763细胞、COLO206F细胞
HT55细胞系相关产品:SUM 159PT细胞、UM-UC-14细胞、ML-2细胞
NCI-322细胞系相关产品:H-2171细胞、H226细胞、NCI-H460细胞
Caco-2/ATCC细胞系相关产品:NCI-H1944细胞、R D细胞、SUD4细胞
GM03190细胞系相关产品:H-1092细胞、H69细胞、WiDr/S细胞
RMG-I细胞系相关产品:HMCB细胞、C3H-10T1/2细胞、293T/17细胞
Mino细胞系相关产品:EoL-1-cell细胞、LM6细胞、RPMI.8226细胞
LY细胞系相关产品:H7721细胞、H35 Reuber细胞、Karpas-422细胞
SW 527细胞系相关产品:UMUC-3细胞、H1435细胞、A375-S2细胞
LX-2细胞系相关产品:MDA-MB-435S细胞、OVCA433_Bast细胞、GM04678细胞
SKMEL28细胞系相关产品:Panc 05.04细胞、Pt K1细胞、PC3M-1E8细胞
B-CPAP细胞系相关产品:MuM-2C细胞、SW 527细胞、KYSE 30细胞
HT-115细胞系相关产品:32D.3细胞、HSMC细胞、A-172 MG细胞
DMS 273 Thawing人小细胞肺癌细胞系
HOP-92细胞系相关产品:L-WRN细胞、SCC25细胞、LA-N-6细胞
UPCISCC154细胞系相关产品:FTC133细胞、SK-N-BE(1)n细胞、138 MG细胞
LS 180细胞系相关产品:HT-1080细胞、MODE-K细胞、H-661细胞
NCI-H1341细胞系相关产品:SNU-407细胞、Case 3细胞、Dysplastic Oral Keratinocyte细胞
hTERTHME1细胞系相关产品:SK-MEL-3细胞、PaCa2细胞、LY-R细胞
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞系相关产品:18G3.cl 1细胞、NCIH226细胞、Pa16C细胞
C127细胞系相关产品:M 1细胞、PTK 1细胞、TE6细胞
SUDHL-8细胞系相关产品:SK-MEL-1细胞、OCI-Ly18细胞、LS123细胞
SU-DHL2细胞系相关产品:HCoEpiC细胞、Oka-C1细胞、TMD8细胞
TCCPAN2细胞系相关产品:HLEC细胞、QGP-1细胞、OP9细胞
H4-II-E-C3细胞系相关产品:Mel-624细胞、CESS细胞、THEECs细胞
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