"HEK293-F Thawing人胚肾细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
HEK293-F Thawing人胚肾细胞系
细胞生长:贴壁
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HEK293-F Thawing人胚肾细胞系
细胞生长特性:贴壁生长;悬浮生长
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞形态特性:上皮细胞样
BC-028细胞系相关产品:FHC细胞、H446细胞、IAR20细胞
Capan 2细胞系相关产品:CHO-K1细胞、NCI-H128细胞、ACC-3细胞
H-358细胞系相关产品:PC-3M细胞、H-2126细胞、MG-63细胞
SKRC-20细胞系相关产品:NCI-H2342细胞、JOSK-M细胞、SUM 52细胞
HCC1187细胞系相关产品:ARIP细胞、BNL.CL2细胞、MM6细胞
N-Tera-2细胞系相关产品:RBL-2H3细胞、IEC 18细胞、PC-3M IE8细胞
H-1793细胞系相关产品:ECC-10细胞、Swiss 3T6细胞、SCC-25细胞
BSC-1细胞系相关产品:COV 504细胞、Tn5B1-4细胞、RBMVEC细胞
KPL-4细胞系相关产品:NCIH1417细胞、SW626细胞、BMDC细胞
B-95-8细胞系相关产品:L-cell细胞、CAMA细胞、KTC-1细胞
HuT 102细胞系相关产品:CAKI 1细胞、GM15452细胞、SW954细胞
SU 86.86细胞系相关产品:UWB1.289细胞、HEK-293 c18细胞、Hs840_T细胞
U251-MG细胞系相关产品:Leukemia L1210细胞、DMS-153细胞、CCD33Co细胞
Sc-1细胞系相关产品:RS 4;11细胞、SCI1细胞、D283MED细胞
MDAMB453细胞系相关产品:MDA-MB-436细胞、Z138细胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞
HDQ-P1细胞系相关产品:HCT.116细胞、MC3T3-E细胞、Anip[973]细胞
LA795细胞系相关产品:Vero from pool #76细胞、HLF-a细胞、OVCAR-5细胞
SUIT 2细胞系相关产品:K562/ADR细胞、P-3J细胞、SUDHL5细胞
HS766T细胞系相关产品:CTLL(2)细胞、HMO6细胞、PZ-HPV-7细胞
MOLM-13细胞系相关产品:NCI N87细胞、Sol8细胞、WEHI3B细胞
U118MG细胞系相关产品:NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞
U118MG细胞系相关产品:NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞
LK-2细胞系相关产品:RAEC细胞、COLO 829细胞、A1847细胞
P3 88 D1细胞系相关产品:UM-UC-14细胞、SF-539 BT细胞、MES13细胞
JJN3细胞系相关产品:DrG细胞、SK-RC 39细胞、MiaPaca.2细胞
HS578T细胞系相关产品:MDA-468细胞、EAhy 926细胞、LA-N-6(OAN)细胞
HEK293-F Thawing人胚肾细胞系
C-6细胞系相关产品:MRC9细胞、JIMT细胞、GM-637细胞
RPMI.8226细胞系相关产品:NCIH250细胞、KYSE 50细胞、KMB 17细胞
TKB1细胞系相关产品:Anip[973]细胞、GM05862细胞、NCI-H1694细胞
293/EBNA-1细胞系相关产品:SK_N_FI细胞、Ly3细胞、U2-OS细胞
U-2OS细胞系相关产品:RT 112细胞、OLN93细胞、NS653细胞
OVCAR-3细胞系相关产品:TE10细胞、SW1417细胞、LN-382细胞
MUTZ1细胞系相关产品:P3-X63Ag8细胞、Human Epithelioma-2细胞、HITT15细胞
KMS-11细胞系相关产品:NOR10细胞、NCIH2106细胞、BT细胞
MC-3T3细胞系相关产品:CESS细胞、A-172MG细胞、RFL 6细胞
LM1细胞系相关产品:MDA231-LM2-4175细胞、TCC Sup细胞、149PT细胞
H-1404细胞系相关产品:RPMI.8226细胞、CCC-HSF-1细胞、HTR-8细胞
SKCO1细胞系相关产品:PC3M-1E8细胞、NG108-15细胞、RBVEC细胞
HB611细胞系相关产品:HTR8/SVneo细胞、Human Kidney-2细胞、HCFB(HCF)细胞
L-M(TK-)细胞系相关产品:GB-1细胞、BALB/3T3细胞、KMM1细胞
SNU-601细胞系相关产品:NT2/D1细胞、PANC-03-27细胞、DSL-6A-C1细胞
SKNEP1细胞系相关产品:PG-LH7细胞、BV173细胞、HT3细胞
HT1376细胞系相关产品:RH30SJ细胞、RL-65细胞、NK62a细胞
CCC-HEL-1细胞系相关产品:SF763细胞、MDA.MB.231细胞、WM-266-mel细胞
EC109细胞系相关产品:Ra No. 1细胞、Institute for Medical Research-90细胞、COLO678细胞
NCI H345细胞系相关产品:TOV112D细胞、Earles's cells细胞、PATU-S细胞
SGC-996细胞系相关产品:Hs 604.T细胞、HCET细胞、LAN1细胞
P3-X63-Ag8细胞系相关产品:Colo-678细胞、Sp2/mIL-6细胞、HEY A8细胞
HEK293-A细胞系相关产品:UPCI:SCC154细胞、H-2170细胞、C-4-I细胞
CEM clone 7细胞系相关产品:NKM-1细胞、BTI-TN5B1-4细胞、SW-620细胞
H1385细胞系相关产品:MM.1S细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、HeLa229细胞
Anip 973细胞系相关产品:OE21细胞、CCD-966SK细胞、Co 115细胞
Ku812细胞系相关产品:VK-2/E6E7细胞、HTh 74细胞、EFM192细胞
NCIH2081细胞系相关产品:74Int细胞、HPAFII细胞、Homo sapiens No. 578, breast cells细胞
HLEpiC细胞系相关产品:Tca8113细胞、AAV293细胞、DHL5细胞
H-1693细胞系相关产品:3 LL细胞、Hs 274细胞、IHH4细胞
AMJ2-C8细胞系相关产品:ANA1细胞、CHO K1细胞、SGC 7901细胞
A204细胞系相关产品:HuT 102细胞、KY-270细胞、TK10细胞
MFE-280细胞系相关产品:HSAS3细胞、JB6Cl30细胞、L- cell细胞
HEK293-F Thawing人胚肾细胞系
HCC1954BL细胞系相关产品:HA1800细胞、S-16细胞、LOU-NH-91细胞
Hepa-RG细胞系相关产品:SF 763细胞、DHL4细胞、NCIH1373细胞
HTR-8细胞系相关产品:NCI-H2330细胞、MDA-157细胞、V 79细胞
L-cell细胞系相关产品:MC116细胞、TW-039细胞、NCI-H1755细胞
A375SM细胞系相关产品:PBMC细胞、MKN-7细胞、SLMT1细胞
CWR22-Rv1细胞系相关产品:P3-X63-Ag8-6-5-3细胞、Hs822T细胞、Panc203细胞
M14-MEL细胞系相关产品:MDA-MB 361细胞、SW982细胞、CCD-966SK细胞
NCI-H460细胞系相关产品:SK Mel28细胞、NCI-H1793细胞、SW 480细胞
SW 954细胞系相关产品:A375-S2细胞、Mel526细胞、SUIT 2细胞
HO-8910PM细胞系相关产品:3T6细胞、TYKnu细胞、T98G细胞
MV3细胞系相关产品:TE7细胞、IHH-4细胞、RD-2细胞
"