"A101D Thawing人黑色素瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
A101D Thawing人黑色素瘤细胞系
细胞生长：贴壁
常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或高过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：４-１：６传代，２-３天换液１次。
正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存好了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至７０%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：５-１０% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；５-１５%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在５０%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长２４小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过１.５ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做好记录是非常非常重要的！还有一个最重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做好防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
A101D Thawing人黑色素瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-７０℃~-１９６℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-７０℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过０~２０℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。１ml冻存细胞使用１０~２０ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在３×１０(５)活细胞/ml；培养细胞１２到２４小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml冻存细胞加入到大约２５ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约８０x离心２到３分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为３×１０(５)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约１０１２个，可以区分为２００多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G１期开始时一个确定的点G０点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。
细胞形态特性：上皮细胞
hRMECs细胞系相关产品：HSAS4细胞、LSECs细胞、NCI-H1672细胞
X63-Ag8.653细胞系相关产品：LU451细胞、H-196细胞、SHIN3细胞
OCILY7细胞系相关产品：SNU-520细胞、PT-67细胞、Hs839T细胞
H-23细胞系相关产品：L 363细胞、SK-N-BE(2C)细胞、NCI-H187细胞
HLEpiC细胞系相关产品：Tca8113细胞、AAV293细胞、DHL5细胞
HEK 293T/17细胞系相关产品：SKML-28细胞、FHs 74 Int细胞、BHT-101细胞
LS174T细胞系相关产品：Rat Lung-65细胞、Ra #1细胞、P3/X63/Ag8细胞
NBL-S细胞系相关产品：CZ-1细胞、H-1395细胞、U-373MG ATCC细胞
LL/2 (LLC1)细胞系相关产品：HeLa229细胞、ROS 17/2.8细胞、LAN6细胞
A2780-CP细胞系相关产品：Hs 578.T细胞、NG10815细胞、KM-H2细胞
ZR75-30细胞系相关产品：NCI-H1522细胞、SCC VII细胞、HEC1-B细胞
HCC1806细胞系相关产品：OVCA420细胞、GM03569细胞、COV-434细胞
H2107细胞系相关产品：38C-13细胞、HIT T-15细胞、KB细胞
OVCAR-5细胞系相关产品：R 1610细胞、Lieming Xu-2细胞、VSC4.1细胞
NIE 115细胞系相关产品：B16-F10-BL6细胞、H-2444细胞、HPAF细胞
Malme3M细胞系相关产品：NCIH1993细胞、HT clone H9细胞、C17.2细胞
A101D细胞系相关产品：SNU-C2B细胞、NCI-A549细胞、B6Tert-1细胞
NPC-039细胞系相关产品：MCF 7B细胞、PE/CA-PJ-34细胞、Sp2/O-Ag14细胞
NCC-IT细胞系相关产品：NCI-H2198细胞、MGHU1细胞、SUP-T1细胞
Spodoptera frugiperda clone 9细胞系相关产品：IPLB-Sf21细胞、VP 267细胞、KBM5细胞
LTEPsm细胞系相关产品：NCI-H596细胞、ONS76细胞、LC-1/sq细胞
LTEPsm细胞系相关产品：NCI-H596细胞、ONS76细胞、LC-1/sq细胞
OVCAR-8/ADR细胞系相关产品：Psi2 DAP细胞、MDAMB134VI细胞、X63-Ag8-653细胞
SNU878细胞系相关产品：L cell细胞、CMECs细胞、A-875细胞
HCC4006细胞系相关产品：KAT-5细胞、HCC-94细胞、H-1184细胞
COLO 201细胞系相关产品：Madin Darby Canine Kidney细胞、HuP-T3细胞、Bovine Turbinate细胞
A101D Thawing人黑色素瘤细胞系
KU 19-19细胞系相关产品：Bovine Turbinate细胞、NCIH2141细胞、Caco-2BBe细胞
A-875细胞系相关产品：OVCA-433细胞、Helacyton gartleri细胞、MIA Paca2细胞
RK13细胞系相关产品：CCLP1细胞、AMJ2C8细胞、H-2444细胞
Ramos (RA 1)细胞系相关产品：hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞
COLO-679细胞系相关产品：TE-6细胞、H283细胞、3T3-442A细胞
CCD19-Lu细胞系相关产品：UCD-MLA-144细胞、NG 108-15细胞、AAV-293细胞
NCI H929细胞系相关产品：SUM 159细胞、J82COT细胞、CCRF-CEM细胞
P3-Jiyoye细胞系相关产品：M-NFS-60细胞、SHZ-88细胞、SK-RC-39细胞
Calu-1细胞系相关产品：KYSE-140细胞、BCAP37细胞、NCI-BL2141细胞
GM00215A细胞系相关产品：HOSEpiC细胞、H2122细胞、GM02219D细胞
LN-18细胞系相关产品：SLK细胞、RH30SJ细胞、WM 266-4细胞
P3-NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品：NHLF细胞、NCI-H524细胞、Caco 2细胞
ST-2细胞系相关产品：SW 756细胞、HEK-293-H细胞、JOSK-M细胞
MDCK-2细胞系相关产品：Ku812F细胞、HS578T细胞、Swiss/3T3细胞
Capan 2细胞系相关产品：CHO-K1细胞、NCI-H128细胞、ACC-3细胞
G292细胞系相关产品：Nb 2细胞、HS940细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞
COLO 206F细胞系相关产品：PLA 802细胞、CCD 966 SK细胞、Hi-five细胞
Hs68细胞系相关产品：DMS 114细胞、OCI-LY-1细胞、M21细胞
H69细胞系相关产品：KYSE-50细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞
RK-13细胞系相关产品：CALU 1细胞、Hep II细胞、MES-23.5细胞
Duke University 145细胞系相关产品：M619细胞、D-283 Med细胞、Japanese Tissue Culture-39细胞
PAMC82细胞系相关产品：mousepodocyte细胞、RIN14B细胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞
U-138-MG细胞系相关产品：SK-GT-2细胞、HNSC细胞、RIN-m5F细胞
IOSE-29细胞系相关产品：LTEP-a-2细胞、SNU-C2B细胞、MAntle cell VERona-1细胞
MCF-10 Attached细胞系相关产品：NCIH929细胞、E6-1细胞、RL952细胞
MEF细胞系相关产品：OKAC1细胞、SNT-8细胞、C8-D1A细胞
HeLa.S3细胞系相关产品：ND7/23细胞、Ocular Choroidal Melanoma-1细胞、BT474细胞
SW 1573细胞系相关产品：Sp 2817细胞、CBRH7919细胞、MDA231细胞
CMT.64细胞系相关产品：Mv.1.Lu细胞、NCI-H2135细胞、Mel-RM细胞
OB2细胞系相关产品：Lieming Xu-2细胞、OCI/AML4细胞、A2780细胞
HPF细胞系相关产品：2B4-L细胞、SVHUC细胞、Hepatoma-22细胞
NCI-H196细胞系相关产品：NIE-115细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、L615细胞
B95.8细胞系相关产品：BC-3-H-I细胞、HT29细胞、Kit-225-K6细胞
A101D Thawing人黑色素瘤细胞系
NIH:OVCAR4细胞系相关产品：Ly8细胞、CHL-1细胞、DK-MG细胞
Hs 729细胞系相关产品：SK Hep1细胞、YES-2细胞、JB-6 Cl 30细胞
Hs 729细胞系相关产品：SK Hep1细胞、YES-2细胞、JB-6 Cl 30细胞
Michigan Cancer Foundation-12F细胞系相关产品：HBL 100细胞、HRCEC细胞、WM-2664细胞
Reuber H35细胞系相关产品：TC-1[JHU-1]细胞、M-1 myeloid leukemia细胞、JM细胞
DMS 114细胞系相关产品：MDAMB175VII细胞、BrCL12细胞、Roswell Park Memorial Institute 1846细胞
THP1细胞系相关产品：HBVP细胞、WM115-mel细胞、MUTZ3细胞
HLEpiC细胞系相关产品：Tca8113细胞、AAV293细胞、DHL5细胞
LL/2细胞系相关产品：MDA-436细胞、TCCPAN2细胞、BEP2D细胞
MM-1S细胞系相关产品：C12细胞、Human Embryonic Skin细胞、G 292 Clone A 141B1细胞
VK2细胞系相关产品：COR-L26细胞、H2170细胞、H2171细胞
"
