"COLO 829 Thawing人黑色素瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
COLO 829 Thawing人黑色素瘤细胞系
细胞生长：贴壁
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：３-１：６传代，２-３天换液１次。
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
COLO 829 Thawing人黑色素瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
常规的细胞实验(增殖，凋亡，迁移，分化之类的)，受消化影响不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验，比如病毒包装，对细胞代数，对细胞状态要求极高。这个时候，胰酶消化，就是润洗，都会对细胞包装病毒的能力有影响，传代次数一多，细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化，用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性，来使得细胞脱离基质附着表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。许多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白，trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白，而EDTA通过螯合Ca离子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者对付特别难消化的细胞，添加多一些EDTA，就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果１０min还消化不彻底的话)，而应该想其它办法；PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤，是常见的操作，因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲，对于一些难消化细胞，那么可以配制不含Ca，Mg离子的PBS，因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞，不需要配制如此溶液。
细胞形态特性：成纤维细胞
P3-Jiyoye细胞系相关产品：M-NFS-60细胞、SHZ-88细胞、SK-RC-39细胞
NIH 3T6细胞系相关产品：CP70细胞、H1373细胞、SKNBE(2c)细胞
CHL-11细胞系相关产品：U373 MG细胞、Chang Cells细胞、HC11 Mammary Epithelium细胞
NCIH1184细胞系相关产品：AU-565细胞、H498细胞、H-847细胞
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RGC5细胞系相关产品：HeLa.S3细胞、Okayama University Medical School-27细胞、D-283细胞
BRL-3A细胞系相关产品：Calu-6细胞、CL40细胞、SUM190PT细胞
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NCIH1694细胞系相关产品：GC1-SPG细胞、S3-HeLa细胞、Hs 636 T细胞
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HL7702细胞系相关产品：HPAFII细胞、MCAEC细胞、H-1373细胞
Fortner's melanotic melanoma #3细胞系相关产品：C4I细胞、AR4-IP细胞、NCI-H2347细胞
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JHH2细胞系相关产品：DMS 153细胞、KCL22细胞、675T细胞
COLO 829 Thawing人黑色素瘤细胞系
Gerner 7666细胞系相关产品：Hs 821.T细胞、RT 112细胞、HEK 293A细胞
IAR-20细胞系相关产品：LM1细胞、VA-ES-BJ细胞、BE(2)-M17细胞
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Lec1细胞系相关产品：ChaGo-K-1细胞、Caco-2/BBe 1细胞、EOMA细胞
NP69SV40T细胞系相关产品：MC3T3E1细胞、HOEC细胞、MGHU1细胞
H196细胞系相关产品：WM-2664细胞、HcaF细胞、GM01232细胞
Centre Antoine Lacassagne-12T细胞系相关产品：MDA MB 134VI细胞、HOS细胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞
MKN74细胞系相关产品：AtT20细胞、NCI-H838细胞、VeroC1008细胞
PFSK1细胞系相关产品：DC 2.4细胞、Hs-274-T细胞、TK 10细胞
NCI-BL6细胞系相关产品：HEC251细胞、TE15细胞、BJ1细胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞系相关产品：Fortner's melanotic melanoma #3细胞、3T3-442A细胞、HCCC9810细胞
CL1细胞系相关产品：BEL 7404细胞、HEL-92细胞、MiaPaCa-2细胞
DF1细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞、H838细胞、MC3T3-E1 Subclone 14细胞
COLO 829 Thawing人黑色素瘤细胞系
H1568细胞系相关产品：MSTO-211细胞、NCIH1694细胞、H-676细胞
MES-SA Dx5细胞系相关产品：Hs294细胞、HSC6细胞、C-33 A细胞
GC-1细胞系相关产品：Normal Rat Kidney-52E细胞、Hs 695T细胞、GM05372E细胞
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CD-18细胞系相关产品：B16 melanoma F10细胞、NCIH1573细胞、RAEC细胞
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SKNDZ细胞系相关产品：751-NA-15细胞、HCC366细胞、PFSK-1细胞
DMS273细胞系相关产品：CF PAC-1细胞、CC-LP-I细胞、P-815细胞
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